免疫介导型再生障碍性贫血小鼠间充质干细胞成骨及成脂潜能改变

[目的]探讨免疫介导型再生障碍性贫血小鼠间充质干细胞（msenchymal stem cell,MSC）向成骨及成脂肪细胞分化潜能的改变。[方法]采用免疫介导法进行再障造模,Babl/c小鼠经60Co射线亚致死剂量照射后,自尾静脉输入DBA/2小鼠的淋巴细胞建立免疫介导型再生障碍性贫血小鼠模型;造模15天后进行再生障碍性贫血小鼠骨髓间充质干细胞培养,并检测骨髓成纤维细胞集落形成单位（CFU-F）数量变化,观察模型小鼠骨髓病理改变;茜素红和油红O分别检测模型小鼠MSC钙结节数和脂肪细胞形成率。[结果]再障模型小鼠CFU-F数明显减少;骨髓病理切片显示,造血组织减少,并脂肪化;再障小鼠MSC钙结节数量减少,脂肪细胞分化率显著增加。[结论]免疫介导再生障碍性贫血小鼠MSC成骨潜能减弱,成脂潜能明显增强。     

七叶皂苷钠诱导人单核白血病SHI-1细胞凋亡的研究

目的研究七叶皂苷钠对人急性单核白血病细胞株SHI-1细胞的抑制增殖及诱导凋亡的作用。方法 SHI-1细胞经不同浓度的七叶皂苷钠处理后,MTT法分析七叶皂苷钠对SHI-1细胞增殖的抑制作用,AnnexinⅤ/PI染色流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,DNA凝胶电泳观察凋亡特异性DNA降解梯形条带,半定量PCR检测凋亡特异性酶Caspase-3 mRNA表达水平。结果MTT法显示七叶皂苷钠能显著抑制SHI-1细胞的增殖,呈时间和剂量依赖性(P<0.05)。经不同浓度的七叶皂苷钠处理24h,AnnexinⅤ/PI染色显示AnnexinⅤ阳性的凋亡细胞率明显上升,DNA琼脂糖凝胶电泳分析出现凋亡特异性的DNA降解梯形条带,半定量PCR显示Caspase-3 mRNA表达水平随药物浓度增加而升高(P<0.05)。结论七叶皂苷钠对SHI-1细胞具有抑制增殖和诱导凋亡的作用,可能是其抗白血病作用途径之一。     

人细胞色素P4502B6的GST融合蛋白及其抗体的制备

目的：获得纯化抗原用于制备ＣＹＰ２Ｂ６多克隆抗体方法：ＰＣＲ扩增目的基因片段,亚克隆入融合蛋白表达载体ＰＧＥＸ－３ｂ,构建了重组质粒ＰＧＥＸ／２Ｂ６。然后将该重组质粒转化大肠杆菌ＤＨ５α,ＩＰＴＧ诱导表达,ＳＤＳ＿ＰＡＧＥ分离,获纯化融合蛋白ＧＳＴ－２Ｂ６。用ＧＳＴ－３Ｂ２免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠,自腹水中获取ＣＹＰ２Ｂ６多克隆抗体。结果：融合蛋白ＧＳＴ－２Ｂ６（ＣＹＰ２Ｂ６２０２￣３５２ａａ）,并获     

急性髓系白血病祖细胞集落培养及其对化疗药物敏感性试验的临床意义

目的观察急性髓系白血病(AML)祖细胞集落生成的增殖潜能,及对化疗药物的敏感性试验与临床预后的关系.方法采用液相-半固体相二步法,培养30例AML的骨髓白血病祖细胞集落(CFU-AML),按集落产率分成高、中和低三种生长类型,并检测其对高三尖杉酯碱、柔红霉素、阿糖胞苷和足叶乙甙四种化疗药物的敏感性,分析体外试验与临床疗效的符合率.结果30例AML骨髓的平均CFU-AML集落为142.2±23.0(27～556)/2×105细胞.高、中和低生长类型分别为4例、20例和6例,临床缓解率为25%、60%和100%,各组间具有显著差异.化疗药物敏感试验与临床疗效的总符合率为76.7%,阳性符合率80.0%,阴性符合率70.0%,敏感度84.2%,特异性63.6%.结论白血病克隆增殖潜能与临床预后密切相关,低生长型预后最佳,高生长型预后差,中生长型介于两者之间.CFU-AML药敏试验与临床化疗缓解率有较好的相关性,对筛选化疗方案进行个体化治疗有重要的临床参考价值.     

升血灵胶囊(人参总皂苷)治疗免疫性血小板减少症的临床研究

[目的]观察升血灵胶囊(人参总皂苷)对免疫性血小板减少症(ITP)患者的疗效。[方法]68例诊断明确的慢性ITP患者,均由免疫异常所致。升血灵胶囊治疗组48例采用升血灵胶囊口服;对照组20例采用常规药物肾上腺皮质激素治疗,疗程均大于2个月。[结果]升血灵胶囊治疗48例ITP的有效率达89.58%,外周血小板计数(PLT)提高(42.5±36.8)×109/L,并且未观察到明显的副作用。其中原发性ITP 32例的有效率90.63%,继发性ITP 16例的有效率87.50%,而对照组有效率40.00%(8/20),PLT计数提高(26.1±29.0)×109/L,均明显低于升血灵胶囊治疗组(P0.01)。[结论]升血灵胶囊治疗慢性ITP的疗效良好,能够有效地升高血小板数,且未见明显副反应,为ITP提供了安全有效的中药新药。