红色荧光蛋白和荧光素酶双报告基因转基因小鼠的建立

背景与目的:活体动物体内光学成像(optical in vivo imaging)主要采用生物发光与荧光两种技术。生物发光是用荧光素酶(luciferase,Luc)基因标记细胞或DNA,而荧光技术则采用荧光报告基团(GFP、RFP、Cyt及dyes等)进行标记,利用一套非常灵敏的光学检测仪器,能够直接监控活体生物体内的细胞活动和基因行为,生物发光成像具有高的灵敏度和特异性,同时生物发光信号可用于精确定量,而荧光成像具有方便、便宜、直观、标记靶点多样和易于被大多数研究人员接受的优点。本研究基于慢病毒介导的转基因方法制备红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)和Luc双报告基因转基因小鼠(即RL转基因小鼠),将这两种技术融为一体。方法:制备携带RFP和Luc基因(简写RL基因)的慢病毒,然后将携带RL基因的慢病毒注入小鼠单细胞受精卵卵周隙以感染受精卵,胚胎移植进假孕母鼠以获得仔鼠,应用小动物活体成像仪、体视荧光显微镜和PCR等在蛋白和DNA水平上筛选和鉴定,并获得RL转基因小鼠。结果:移植卵周隙注射有慢病毒的胚胎125枚给6只假孕母鼠,其中4只假孕母鼠怀孕,共生仔鼠20只;利用小动物活体成像仪检测RFP和Luc表达,在蛋白水平证实20只F0代中,3只高表达RFP和Luc;DNA水平检测证实,3只RFP和Luc阳性的小鼠基因组中确实整合有外源转基因RL,预示基因型鉴定结果很好验证了小动物活体成像仪筛选和鉴定结果。此外,RL转基因首建鼠基因组中整合的RL转基因可稳定遗传至下一代,并能正常表达。RL转基因小鼠主要脏器均可见红色荧光和Luc信号,但不同脏器间荧光和Luc强度有差异。结论:成功制备RL双报告基因转基因小鼠,为后续研究干细胞在肿瘤发生、发展和转移中的作用和造血重构等提供双报告基因标记的各种移植用供体细胞,并对此供体细胞及其在体内衍生的细胞进行灵敏的非损伤、实时可视化体内跟踪。     

整形技术在乳腺癌保乳手术中的应用

在保留乳房的基础上,结合肿瘤外科与整形外科技术以达到遵循肿瘤外科原则和审美观念的双重效果是目前乳腺癌治疗的发展趋势。作者就近年来在保乳术中应用到的整形技术包括：蝙蝠翼状乳房固定术、圆切技术、网球拍法、旋转皮瓣法和平行四边形乳房固定术,或以背阔肌小皮瓣重建、治疗性缩乳成形术修复乳房缺损等研究理论进行综述。     

预防医学本科毕业生基本能力自评量表的编制及其信度效度检验

目的　通过编制预防医学本科毕业生基本能力自评量表及进行量表的信度效度检验,为评价毕业生基本能力提供可靠的测量工具。方法　在构建《预防医学本科毕业生基本能力评价指标体系》的基础上,将三级指标转化为具体问题,经过预调查及专家论证,最终形成58个条目、22个子维度、8个主维度的自评量表。选取某校2017届、2018届205名预防医学本科毕业生及9位公共卫生教育专家进行问卷调查,应用内部一致性信度及组合信度对量表信度进行检验,应用内容效度和验证性因子分析对量表效度进行检验。结果　量表的内部一致性信度α系数为0.976;8个主维度的α系数及组合信度均大于0.8;量表的内容效度指数S-CVI为0.94,条目水平的内容效度指数I-CVI为0.78~1.00;8个主维度的平均方差抽取量（AVE）均大于0.50,以条目为观察指标的结构模型拟合合理（?字2/df=1.749,RMR=0.036,RMSEA=0.061,NFI=0.801,IFI=0.904,TLI=0.904,CFI=0.903）,而以子维度为观察指标的结构模型拟合良好（?字2/df=1.876,RMR=0.032,RMSEA=0.066,NFI=0.913,IFI=0.958,TLI=0.945,CFI=0.957）。结论　此次编制的量表是依据《公共卫生与预防医学类教学质量国家标准》制定的预防医学本科毕业生的基本能力自我测评量表,具有良好的信度和效度,可实现毕业生基本能力的量化评价。     

预防医学本科毕业生应对突发生物性公共卫生事件核心能力评价指标体系构建

目的　构建一套预防医学本科毕业生应对突发生物性公共卫生事件核心能力评价指标体系。方法　采用深入访谈和小组讨论等研究方法确定核心能力结构,并运用德尔菲法进行2轮专家咨询。以21位专家对该体系的咨询结果为依据,最终确定指标体系及其权重。采用Excel和SPSS 21.0软件进行数据整理和统计分析。结果　专家咨询的积极系数大于80%,权威系数大于0.7,均值为0.906。最终确定的指标体系由4个一级指标、10个二级指标、39个三级指标构成。结论　该评价指标体系可为探索提高毕业生核心能力的有效途径提供参考依据。     

晚期胸腺瘤精确放疗计划的剂量学对比研究

目的 放疗是不可手术切除的晚期胸腺瘤重要的姑息性治疗手段。本研究拟对比不可手术切除胸腺瘤三维适形调强放疗（IMRT）、容积旋转调强放疗（VMAT）及螺旋断层放射治疗（TOMO）的剂量学参数，为晚期胸腺瘤放疗技术的选择提供理论依据。方法 选取本院9例接受姑息性放疗的晚期不可手术切除胸腺瘤患者，勾画放疗靶区及危及器官，传输至Raystation及TOMO计划系统，分别评估三组计划的等剂量曲线分布图、剂量体积直方图、均匀性指数、适形性指数以及危及器官受照剂量。结果 三组计划均能够满足处方剂量要求及危及器官限量。PGTV，TOMO组等剂量曲线覆盖体积的适形性及剂量均匀性优于IMRT及VMAT组，TOMO组的中位V₅为41.858%，小于IMRT组的45.9%，同时小于VMAT组的48.86%，TOMO组的中位V₂₀为20.25%，小于IMRT组的23.78%。TOMO组心脏的中位V₄₀为23.576%，明显小于VMAT组的27.81%。脊髓中位D_max相比，TOMO组为37.65 Gy，小于IMRT组的38.39 Gy及VMAT组的39.6 Gy。结论 不可手术切除的晚期胸腺瘤，与IMRT及VMAT相比，TOMO放疗计划具有更优的靶区适形性及剂量分布均匀性，并可减少双肺、心脏及脊髓的受照剂量。     

PBL与剖析临床教学病例相结合培养医学生临床思维的教学改革实践结果分析

以参加教学改革的临床医学专业本科 2个班 80人为实验组 ,采取传统授课方式的临床医学专业本科 2个班 80人为对照组 ,实验组采用问卷调查、平时 PBL讨论时同学自我表达能力 ;实验组和对照组期末通过综合能力测试成绩、期终理论考试成绩进行横向对比 ,结果表明 PBL与剖析临床教学病例相结合的临床课教学方式对培养医学生的临床思维能力、自学能力、解决问题的能力、学生自我表达能力等比传统教学方式有明显的提高 ,对提高临床医学专业本科医学生综合素质有明显的效果。     

联合社交化网络平台的医疗管理应用于妊娠期糖尿病孕妇中的效果分析

目的 探讨联合社交化网络平台的医疗管理应用于妊娠期糖尿病(GDM)孕妇中的效果。方法 选择定期做产前检查的孕妇,在孕24~28周进行葡萄糖耐量试验诊断为GDM的孕妇作为研究对象,观察组96例,在进行门诊常规指导外并加入微信群、医疗APP等社交化网络平台的医疗管理,对照组102例,根据就诊时的情况进行门诊的常规的孕期保健和产前检查。两组观察指标包括血糖控制、定时用药用餐、适度运动及饮食调控4项治疗依从性评分,血糖控制情况、孕期体质量增长量、巨大儿发生率、胎儿窘迫发生率、剖宫产率、产后出血发生率及产褥感染发生率等。结果 观察组血糖控制显效84.38%、有效13.54%、总有效97.91%均高于对照组(P<0.05),依从性评分中看,观察组血糖控制(4.84±0.42)分、定时用药用餐(4.97±0.17)分、适度运动(4.96±0.20)分及饮食调控(4.91±0.29)分4项评分均大于对照组(P<0.05),观察组体质量增加(9.83±3.28)kg均小于对照组(P<0.05),观察组空腹血糖(4.49±0.46)mmol/L,餐后2 h血糖(5.83±0.75)mmol/L均低于对照组(P<0.05),观察组巨大儿发生率、胎儿窘迫发生率、产褥感染发生率、产后出血发生率及剖宫产率等指标均小于对照组(P<0.05)。结论 通过联合社交化网络平台,深入开展有效的GDM患者网络平台管理服务,能够有效地帮助妊娠期糖尿病患者,控制血糖水平,降低孕妇及胎儿风险,可以良好控制病情,提高孕妇生活质量,完全值得推广的。     

塑料输液包装材料中抗氧剂降解产物对药液的迁移研究

本文建立了液相色谱法测定抗氧剂168的降解产物2,4-二叔丁基苯酚、抗氧剂1010和1076的降解产物3,5-二叔丁基-4-羟基苯丙酸的含量,并以复方氨基酸注射液(18AA-II)作为模拟提取药液,检测了这两种降解产物在药液中的提取情况。     

血浆置换治疗儿童急性播散性脑脊髓炎2例报告并文献复习

目的探讨血浆置换治疗儿童急性播散性脑脊髓炎(ADEM)的疗效及安全性。方法回顾分析2例ADEM患儿的临床资料,并检索1998年1月至2018年1月万方和PubMed数据库的相关文献进行分析。结果 2例男性患儿,分别为5岁和2岁,临床有发热伴有抽搐、意识障碍等多种脑病表现;影像学提示白质多发病变,符合ADEM诊断标准。予大剂量激素、免疫球蛋白治疗后,病情仍进展,肌无力、意识障碍加重,出现呼吸衰竭。予呼吸机辅助呼吸、血浆置换(于病程2周左右)等,症状快速缓解,神志转清,肌力逐渐恢复,脱离呼吸机。分别随访1年及6个月,均未遗留神经系统症状。结论在ADEM患儿对大剂量激素及丙球治疗反应不佳且病情迅速进展时,血浆置换可作为挽救性治疗措施。     

白癜风皮损旁黑素细胞自噬相关蛋白表达的研究

目的通过比较体外培养的白癜风黑素细胞与正常黑素细胞中自噬标志物微管相关蛋白轻链3（LC3II/I）、自噬相关蛋白p62、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）和自噬相关基因5（Atg5）的表达差异,分析其在白癜风发病中的可能作用。方法分离并原代培养来自于泛发型白癜风患者皮损旁皮肤的黑素细胞（白癜风黑素细胞组）以及正常志愿者皮肤的黑素细胞（正常对照组）,采用免疫印迹法分别检测不同来源黑素细胞中自噬标志物LC3II/I、自噬相关蛋白p62、mTOR和Atg5的表达,同时以改良的多巴氧化法测定细胞中的酪氨酸酶活性。结果LC3II/I及Atg5的表达在白癜风黑素细胞组中明显高于正常对照组（t=10.36、13.01,均P＜0.01）,而p62、mTOR蛋白水平及酪氨酸酶活性在白癜风黑素细胞组中明显低于正常对照组（t=5.12、7.22、36.51,均P＜0.01）。结论体外培养的白癜风黑素细胞存在自噬的活化及上调并伴有黑素细胞黑素合成功能的下降,提示自噬可能与白癜风的发病有关。