马钱子总碱囊泡凝胶经皮给药后在大鼠组织中的分布研究

目的 研究马钱子总碱囊泡凝胶经皮给药后在大鼠组织中的分布。方法 18只SD大鼠经皮给予马钱子总碱囊泡凝胶后0.5、2、6 h,采集大鼠皮肤、骨骼肌、脑、心、肺、肝、脾、肾、胃、小肠、脂肪、睾丸、子宫、关节等组织,以溶剂萃取法对样品进行提取,应用LC-MS/MS联用技术对各组织中的马钱子碱和士的宁进行测定。结果 经皮给药后,马钱子碱和士的宁在大鼠体内分布较广,主要分布在肺、肝、肾、小肠,其次为心脏、关节、皮肤等,而在脑、肌肉、脂肪中的分布量较低。结论 马钱子总碱囊泡凝胶能减少马钱子碱和士的宁在脑、心脏的分布,有利于降低中枢毒性和心脏毒性。     

LC-MS/MS法同时测定犬血浆中7 种人参皂苷类成分及其在人参提取物药代动力学研究中的应用

目的:建立同时检测Beagle犬血浆中人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd、Rc、Rb2/3和Rf的分析方法,并应用混合有机溶剂萃取法提取含药血浆中的成分。方法:采用C18反相柱,流动相为甲醇乙腈等比混合液-0.01%甲酸水溶液梯度洗脱,质谱采用多反应监测(MRM)方式进行正离子检测。结果:定量分析的离子对(m/z)为:1131.8/789.5(G-Rb1)、1101.7/789.7(G-Rb2/3)、1101.7/789.7(G-Rc)、823.6/789.5(G-Rd)、969.7/789.7(G-Re)、823.6/643.6(G-Rg1)和823.6/365.3(G-Rf)。7种皂苷类成分定量分析可以在14.5 min内完成,且没有离子抑制现象,各成分的最低定量限分别为0.03125μg.L-(1G-Re和G-Rg1)、0.0625μg.L-(1G-Rf和G-Rd)和0.125μg.L-(1G-Rb1、G-Rc和G-Rb2/3),该方法的精密度、准确度和稳定性均符合要求。结论:该法选择性强、灵敏度高、操作简便,可用于血浆中7种人参皂苷了成分的药代动力学研究。     

LC-MS/MS法同时测定犬血浆中四氢巴马汀、脱氢紫堇碱、小檗碱和巴马汀及其在元胡提取物的药代动力学研究应用

目的:建立同时检测Beagle犬血浆中四氢巴马汀、脱氢紫堇碱、小檗碱和巴马汀的分析方法,并应用有机溶剂沉淀法提取含药血浆中的成分。方法:采用C18反相柱,流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱,质谱采用多反应监测(MRM)方式进行正离子检测。结果:定量分析的离子对(m/z)为:366.2/350.2(四氢巴马汀)、356.2/191.2(脱氢紫堇碱)、336.2/320.2(小檗碱)和352.2/336.2(巴马汀)。测定血浆中四氢巴马汀、脱氢紫堇碱和小檗碱的线性范围均为0.0488～50μg.L-1,巴马汀为0.0488～100μg.L-1,这4种成分的定量下限均为0.0488μg.L-1,该方法的精密度、准确度和稳定性均符合要求。结论:该法选择性强、灵敏度高、操作简便,可用于血浆中这4种生物碱的药代动力学研究。     

马钱子总碱囊泡凝胶经皮给药后在大鼠组织中的分布研究

目的研究马钱子总碱囊泡凝胶经皮给药后在大鼠组织中的分布。方法 18只SD大鼠经皮给予马钱子总碱囊泡凝胶后0.5、2、6 h,采集大鼠皮肤、骨骼肌、脑、心、肺、肝、脾、肾、胃、小肠、脂肪、睾丸、子宫、关节等组织,以溶剂萃取法对样品进行提取,应用LC-MS/MS联用技术对各组织中的马钱子碱和士的宁进行测定。结果经皮给药后,马钱子碱和士的宁在大鼠体内分布较广,主要分布在肺、肝、肾、小肠,其次为心脏、关节、皮肤等,而在脑、肌肉、脂肪中的分布量较低。结论马钱子总碱囊泡凝胶能减少马钱子碱和士的宁在脑、心脏的分布,有利于降低中枢毒性和心脏毒性。     

中药复方塞络通中银杏内酯类成分的药代动力学及脑分布研究

目的：塞络通（SLT）是由人参、银杏叶、西红花组方,主治血管性痴呆的现代复方中药。为探讨SLT 药效物质基础,并为给药方案提供依据,该文对治疗剂量SLT 给与大鼠后,银杏内酯成分的血药浓度、药代特征、以及脑分布进行了研究。方法：实验建立了同时检测生物样品中4 种银杏内酯的高灵敏度LCMS/MS 分析方法,经过对线性、专属性、回收率、准确度、精密度的考察,所建立的分析方法符合临床前药代动力学研究要求。结果：灌胃SLT 60 mg?kg-1 后,4 种目标成分均在大鼠血浆中检出,各成分曲线下面积（AUC0~t）从大到小顺序依次为白果内酯（BB）、银杏内酯A（GA）、银杏内酯B（GB）和银杏内酯（GC）。银杏内酯的血浆消除半衰期（t1/2）较短,在1.61~2.82 h 之间,其中BB 半衰期最短。所有银杏内酯成分均能够快速进入在脑组织,GA 和BB 仍是脑组织中的主要成分。各银杏内酯在0.25、2、7 h 的脑组织浓度均较同时间点血浆中药物成分低得多,且各成分在脑组织中浓度随时间下降较快。结论：研究结果表明,银杏内酯能够快速吸收进入体循环并进入脑组织,GA、BB 和GB 是其中主要的体内成分,它们能够共同作用于外周和脑组织,通过各自的药理活性机制达到塞络通对缺血性痴呆的疗效。     

痰瘀同治方对痰瘀互结证冠心病小型猪心肌组织的保护作用

目的：观察痰瘀同治方对痰瘀互结证冠心病小型猪心肌组织的保护作用。方法：将36只中国小型猪随机分为正常对照组、模型组、丹蒌片组和痰瘀同治方高、中、低剂量组（生药2.0,1.0,0.5 g·kg^-1）,每组6只;除对照组外,其他各组高脂饲料喂养 2周后,采用介入技术球囊损伤冠状动脉左前降支内皮,术后继续高脂饲料喂养8周,制备小型猪冠心病痰瘀互结证模型;术后给药8周,分别于0周（实验前）、高脂2周（术前或给药前）、高脂6周（给药后4周）、高脂10周（给药后8周）,观察各组动物血清超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量;同时实验结束后进行心肌酶谱检测和HE染色病理观察,采用透射电子显微镜观察心肌细胞超微结构的改变。结果：与对照组比较,模型组自第2周起至实验结束,血清SOD活性明显下降,而MDA含量明显上升（P<0.05或P<0.01）;第10周时模型组动物血清肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）和CK-MB水平均明显升高（P<0.05或P<0.01）,心肌组织病理形态和超微结构明显异常;与模型组比较,实验结束时痰瘀同治方各剂量组血清SOD活性都有一定程度的上升,而MDA水平则明显下降（P<0.05或P<0.01）;同时痰瘀同治方可明显降低模型动物血清CK和LDH水平（P<0.05或P<0.01）,减轻心肌组织缺血性损伤,改善心肌细胞超微结构。结论：痰瘀同治方对痰瘀互结证冠心病中国小型猪心肌损伤有明显保护作用,其机制可能与对抗自由基氧化损伤,抑制脂质过氧化反应相关。     

自噬研究新进展

自噬是广泛存在于真核细胞内的一种溶酶体依赖性降解途径,是细胞进行自我保护的一种重要机制,在维持细胞存活、更新、物质再利用和内环境稳定中起着重要作用.近年来,针对自噬的研究日益深入,本文对新提出来的受损自噬(frustrated au-tophagy)概念及意义、自噬与凋亡间分子联系的新发现,以及雷帕霉素靶蛋白(mamalian target of mpamycin,mTOR)自噬调节的新动态概述如下.     

银杏蜜环口服溶液改善犬急性心肌缺血的研究

目的:观察银杏蜜环口服溶液对犬急性心肌缺血的保护作用。方法:36只犬随机分为6组,模型组,合心爽组(5.0 mg/kg);天麻蜜环粉组(100 mg/kg);银杏提取物组(3.0 mg/kg);银杏蜜环口服溶液高剂量组(206 mg/kg)和银杏蜜环口服溶液低剂量组(103 mg/kg)。通过结扎犬冠状动脉前降支的方法复制急性心肌缺血模型。观察心肌缺血后不同时间点冠状动脉血流量、血氧含量、心肌耗氧量及心肌氧利用度,心肌梗死范围的变化。结果:与模型组比较,银杏蜜环口服溶液大、小剂量组以及蜜环粉组和银杏提取物组心肌梗死范围明显下降(P0.05);同时银杏蜜环口服溶液高剂量组在缺血后30 min静脉血氧含量明显下降(P0.05),在缺血后15、30、60 min心肌耗氧量和心肌氧利用度明显增加(P0.05),在缺血后60~180 min时冠状动脉血流量明显升高(P0.05)。结论 :银杏蜜环口服溶液可在心肌急性缺血状态下短期内促进心肌氧供给和氧消耗;有效增加冠脉血流量,增加心肌的供血供氧,提高心肌氧利用度。药效作用优于银杏提取物和天麻蜜环粉。     

2种分析方法对睡眠剥夺大鼠血瘀证评价的初步研究

采用舌像,足底图像R,G,B分析方法和耳廓、足底体表激光多普勒血流灌注量2种方法对睡眠剥夺大鼠进行血瘀证评价的比较。该实验通过水环境小平台站立进行睡眠剥夺,每周固定时间称重,观察大鼠宏观体征;并在造模第2,4,6周用单反相机分别采集正常组和模型组大鼠舌和足底图像,通过标准比色卡校对,进行色彩饱和度分析;在相同时间点采用激光多普勒血流仪分析大鼠耳廓和足血流灌注量情况。结果发现,第2周模型组大鼠舌面、足底的R,G,B值与正常组无显著差异;同样耳廓和足底血流灌注量亦无明显差异。第4周模型组大鼠舌面R(P0.01)值显著低于正常组,舌面G,B值及足底R,G无统计学差异;模型组大鼠左耳(P0.01)、右耳(P0.01)血流灌注量明显低于正常组,左足、右足血流灌注量有低于正常组的趋势,但未见统计学差异。第6周模型组大鼠舌面、足底的R,G,B值有下降趋势但无统计学差异;左耳(P0.01)和右耳(P0.01)血流灌注量明显低于正常组,左足、右足血流灌注有低于正常组的趋势,但未见统计学差异。比较2种证候评价方法结果显示,舌面R,G,B值结果能够客观反映模型大鼠的血瘀证特征,且更加符合中医临床舌像诊断的特点;耳廓表面激光多普勒血流灌注量作为体表微循环评价方法,同样能够反映模型大鼠的血瘀特征,且评价方法更加客观,可重复性好。因此在中医证候动物模型研究中,将舌面图像分析的R,G,B值与耳廓激光多普勒血流仪2种分析方法结合,更有助于血瘀证指标的客观评价。     

中药方剂对实验性发热模型动物体温的影响

目的观察相关中药方剂(一至六号方)退热的药理作用。方法给大鼠注射酵母菌,给家兔注射内毒素,复制发热模型,测定药后各时间点肛温,计算各时间点体温变化。结果一至六号方均有不同程度的退热作用,其中一号方、三号方、四号方对内毒素引起的体温升高的抑制作用比较明显,二号方和四号方对酵母菌引起的体温升高的抑制作用比较明显。结论一至六号方对实验性发热模型动物体温有不同程度的缓解作用,尤其是四号方有良好的应用前景。