LC-MS/MS法同时测定犬血浆中丹酚酸A、丹酚酸B、紫草酸和迷迭香酸及其在丹参提取物的药代动力学研究应用

目的:建立同时检测Beagle犬血浆中丹酚酸A、丹酚酸B、紫草酸和迷迭香酸的分析方法,并应用混合有机溶剂萃取法提取含药血浆中的成分。方法:采用C18反相柱,流动相为甲醇乙腈等比混合液-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱,质谱采用多反应监测(MRM)方式进行正离子检测。结果:定量分析的离子对(m/z)为:493.2/295.1(丹酚酸A),717.2/519.1(丹酚酸B),537.2/493.2(紫草酸)和359.2/161.0(迷迭香酸)。测定血浆中这4种成分的线性范围均为0.3125～200μg.L-1,定量下限为0.3125μg.L-1,该方法的精密度、准确度和稳定性均符合要求。结论:该法选择性强、灵敏度高、操作简便,可用于血浆中这4种酚酸类成分的药代动力学研究。     

红景天注射液对麻醉犬心肌缺血、心肌梗死的影响

目的:观察红景天注射液对麻醉犬心肌缺血、心肌梗死的影响.方法:采用心外膜电图标测心肌缺血范围及程度,定量组织学(N-BT染色法)测定心肌梗死范围;比较在急性心肌缺血、心肌梗死过程中,相关血液生化指标的变化.结果:红景天注射液能明显减轻心肌缺血程度(Σ-ST)及心肌缺血范围(N-ST),缩小经N-BT染色所显示的梗死区;可有效抑制心肌缺血及心肌梗死引起的血清肌酸磷酸激酶(CK)活性升高、乳酸脱氢酶(LDH)的释放,降低血浆内皮素(ET)和血栓素B2(TXB2)水平,提高6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)含量及6-keto-PGF1α/TXB2的比值.结论:红景天注射液改善麻醉犬急性心肌缺血和心肌梗死的作用强度与阳性对照药合心爽注射剂相似.     

小型猪痰瘀互结证冠心病“痰、毒、瘀”病机演变规律的实验研究

目的：探讨小型猪痰瘀互结证冠心病病机演变的规律。方法：将18只中国小型猪随机分为正常对照组,模型组,丹蒌片组,每组6只。除正常对照组外,其他各组高脂饲料喂养 2周后,采用介入技术球囊损伤冠状动脉左前降支内皮,继续高脂饲料喂养8周,制备小型猪痰瘀互结证冠心病模型。于0周（实验前）、高脂2周（术前或给药前）、高脂6周（给药后4周）、高脂10周（给药后8周）,分别观察各组动物体重指数（BMI）、血液流变性参数、血脂水平、血清炎症因子水平的动态变化,并在实验结束时观察肝脏甘油三酯（TG）和总胆固醇（TC）水平及冠状动脉组织病理改变。结果：与对照组比较,模型组自第2周起至实验结束,血清TC,TG,LDL-C及VLDL-C水平均升高（P<0.01）,5 s^-1和60 s^-1切变率下的全血黏度均明显增加（P<0.05或P<0.01）;第6周时BMI和血清TNF-α水平均明显升高;第10周时BMI及血清hs-CRP,IL-6,TNF-α水平均明显升高,同时冠脉管腔狭窄率、内膜厚度,及内膜厚度/中膜厚度比值均明显增加（P<0.05或P<0.01）;肝脏TC和TG水平明显升高（P<0.01）。与模型组比较,丹蒌片组的冠状动脉病变程度明显减轻,其内膜厚度、管腔狭窄率,及内膜厚度/中膜厚度比值均明显减少（P<0.01）,BMI,血清TC,TG,LDL-C,VLDL-C,肝脏TC,TG,以及血清hs-CRP,IL-6,TNF-α水平亦均明显降低（P<0.05或P<0.01）,5 s^-1和60 s^-1切变率下的全血黏度均明显降低（P<0.05）。结论：痰浊、邪毒、瘀血三者的相互影响促进动脉粥样硬化（AS）斑块的发生和发展,是痰瘀互结证冠心病的关键病机所在。     

脑梗死气虚血瘀证大鼠模型表征及病理生理变化研究

观察多发性脑梗死气虚血瘀证大鼠模型表征及病理生理指标的变化。将大鼠随机分为4组(每组30只):正常组、假手术组、模型组、益气活血方组。模型组和益气活血方组大鼠均采用水环境小平台法进行睡眠剥夺1周后行多发性脑梗死手术,术后继续睡眠剥夺4周;同时益气活血方组大鼠术后每天灌胃给药26 g·kg-1,连续4周。于术后48 h、2周及4周每组随机选取10只大鼠,检测反映大鼠表征及病理生理动态变化的指标。结果显示,正常组和假手术组大鼠一般状况良好,行为和脑组织形态结构正常,模型组大鼠毛发枯黄,精神萎靡,静卧懒动,便溏,行为出现障碍,脑组织形态结构出现明显的病理性改变,且随造模时间的延长情况愈加严重,益气活血方组大鼠一般状态、行为障碍及脑组织形态结构病变程度均较模型组明显减轻;模型组3个时间点体质量、负重力竭游泳时间、舌面图像色彩饱和度R,G,B值均减少,切变率5,60,150 S-1下的全血黏度均增加,脑皮层Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性均降低,5-HT含量减少,血清TXB2含量增加,6-keto-PGF1a含量减少,与假手术组比较均有显著性差异(P0.05或P0.01);益气活血方组大鼠术后2周、4周上述指标的变化较模型组有明显改善(P0.05或P0.01)。以上结果表明,多发性脑梗死气虚血瘀证大鼠表征及病理生理指标变化明显异常,益气活血方对其有明显改善作用,说明该模型具有较好的稳定性和可靠性,模型演化的病理生理机制及生物学基础可能与能量代谢障碍、血管活性物质异常及神经递质变化等有关。     

冠状动脉微循环功能障碍动物模型及中医药防治研究进展

冠状动脉微循环功能障碍(CMD)是心脏X综合征、经皮冠状动脉介入治疗(PCI)后无复流等微循环病变的共同发病机制。随着现代影像学的迅速发展,CMD的发生和防治得到越来越多的关注。CMD动物模型是研究疾病发病机制及评价药物作用的必不可少的工具,选择合适的CMD动物模型建立方法是开展CMD实验研究首先面临的问题。临床及实验研究显示,中医药在CMD的防治方面具有一定的特色。如何进一步阐明中药作用机制寻求最佳的中西医结合治疗方案,将是中医药干预CMD的研究重点。该文将从冠状动脉微循环障碍动物模型的建立评价方法及中医药防治冠状动脉微血管环障碍的研究进展进行综述,旨为冠状动脉微循环障碍实验及中医药的实验研究提供参考。     

继发性红细胞增多症血瘀证病证结合动物模型的建立及清血颗粒的活血化瘀作用

目的:建立大鼠继发性红细胞增多症血瘀证病证结合动物模型,观察清血颗粒对该模型的干预作用.方法:以腹腔注射促红细胞生成素造成继发性红细胞增多症动物模型,分组,观察外周血象、血液流变学各项指标变化.结果:模型外周红细胞计数、血色素、红细胞压积、血液黏度、红细胞聚集率和变形指数均有明显增加,清血颗粒组的干预作用较为明显,多数指标与西药对照依那普利组相比改善更为明显.结论:提示该模型既符合继发性红细胞增多症疾病模型,又符合中医血瘀证模型,为病证结合模型.同时从动物实验角度证实清血颗粒的确是通过活血化瘀来发挥疗效的.     

红景天注射液对麻醉犬心脏血流动力学及心肌耗氧量的影响

目的:研究红景天注射液治疗冠心病的药理作用及作用机制。方法:将实验犬20只,随机分为空白对照组、阳性药对照组和红景天注射液小、大剂量组。经戊巴比妥钠30mg·kg^-1静脉麻醉后开胸,分别测定冠脉血流量、心输出量、左室内压、左室内压上升最大速率(dp/dt_max)、冠状静脉窦血氧含量、动脉血氧含量、心肌耗氧量、心搏出量、耗氧指数、心脏指数、冠脉阻力、总外周阻力及氧利用率等。结果:动物静脉注射红景天注射液后,冠脉阻力、动脉血压、总外周阻力、耗氧指数、心肌耗氧量、心率明显降低,心输出量、心搏出量及冠状静脉窦血氧含量明显上升,与药前及空白对照组比较均有显著性差异(P<0.05-0.01);左室内压和心肌收缩力则无明显改变。结论:结果表明,用红景天注射液可扩张冠脉血管、降低心脏后负荷,在不明显增加心肌收缩力和左心室压力的情况下,心输出量和每博出量明显增加,心脏有效作功得到加强;还能使冠状静脉窦血氧含量显著增加,心肌耗氧指数降低,心肌耗氧量下降,从而改善心肌的供血供氧,调整心脏血管的顺应性,对心血管系统起到调整和改善作用。这可能是红景天注射液治疗冠心病的药理机理。     

痰瘀同治方对小型猪冠状动脉粥样硬化炎症反应的影响

目的：观察痰瘀同治方对小型猪冠状动脉动脉粥样硬化炎症反应的抑制作用。方法：将36只中国小型猪随机分为正常对照组,模型组,舒降之组和痰瘀同治方高、中、低剂量组（生药2.0,1.0,0.5 g·kg^-1）,每组6只;除对照组外,其他各组均给予高脂饲料喂养 2周后,采用介入技术球囊损伤冠状动脉左前降支内皮,术后继续高脂饲料喂养8周,制备小型猪冠状动脉粥样硬化模型;术后给药8周,采用血管内超声观察各组动物冠状动脉斑块负荷,进行冠状动脉病理形态学观察,ELISA法测定血清超敏性C反应蛋白（high-sensitivity C-reactive protein,hs-CRP）,肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）-α和白介素（interleukin,IL）-6等炎症因子水平。采用免疫组化的方法观察冠状动脉血管壁NF-κB p65核移位的表达。结果：与对照组比较,模型组动物在实验结束时冠状动脉斑块负荷明显增加（P<0.01）,冠状动脉病变血管组织结构改变明显异常,管腔狭窄,出现大量的泡沫细胞以及炎细胞侵润;循环中hs-CRP,TNF-α及IL-6水平均显著升高（P<0.01）;免疫组化显示模型组小型猪冠脉NF-κB p65核移位显著增加。与模型组比较,痰瘀同治方能够明显减轻AS斑块负荷（P<0.01）,抑制管腔狭窄,减少炎细胞侵润,降低血清hs-CRP,TNF-α和IL-6等炎症细胞因子水平并抑制冠脉NF-κB p65核移位（P<0.05或P<0.01）。结论：痰瘀同治方能够通过控制NF-κB p65核移位而降低下游炎症反应,从而抑制中国小型猪冠状动脉粥样硬化斑块的发生和发展。     

中药复方双参通冠方的PK/PD数据分析研究

中药复方指征药代动力学是以复方在体内发挥作用的机制为黑箱系统,将各成分的药代动力学数据为该系统的输入,多指标的药效动力学产生相应变化的数据为输出,通过定量描述成分和药效并结合适当的数学方法来分析和研究其间的关系和规律.在此思路指导下,本研究进行了13个时间点15个成分的PK数据和24个药效指标的PD数据测定,并在此基础上通过稳健变换、基线漂移处理、有效性判断和差值分析等方法对数据进行分析处理,最终从复方中得到了12个指征成分.     

红景天注射液对动物血小板聚集、体外血栓形成及血液黏度的影响

目的：探讨红景天注射液活血化瘀作用机理。方法：观察红景天注射液对家兔血小板聚集率、大鼠体外血栓形成及血液黏度的影响。结果：红景天注射液可明显降低花生四烯酸（AA，和胶原诱导的家兔血小板聚集率（P〈0．05），对二磷酸腺苷（ADP）诱导的家兔血小板聚集率有降低趋势；能显著缩短大鼠血栓长度（P〈0．05），减轻血栓湿重及干重（P〈0．05～0．01）；降低中切速30S^-1及低切速5S^-1下的全血黏度（P〈0．05）及血浆黏度。结论：红景天注射液具有活血化瘀作用。