重组人内抑素对兔耳增生性瘢痕成纤维细胞内钙离子浓度的影响

目的通过探讨重组人内抑素（rhEndostatin）促进兔耳增生性瘢痕成纤维细胞（HSFs）凋亡的部分机制,为临床上药物治疗增生性瘢痕（HS）提供实验依据。方法取新西兰大耳兔6只制备瘢痕模型。以HSFs为研究对象,应用激光共聚焦显微镜（CLSM）结合Fluo-4/AM（Ca2+荧光指示剂）检测在Hanks与D-Hanks液中（有、无细胞外钙）rhEndostatin（100 μg/mL）对HSFs胞内Ca2+浓度（[Ca2+]i）的影响。结果当细胞外液为Hanks液时,rhEndostatin（100 μg/mL）可使HSF胞质内[Ca2+]i水平持续增加,当持续10 s给予rhEndostatin处理后,HSFs胞内[Ca2+]i可迅速增加达峰顶再缓慢下降,在停止药物处理后,HSFs胞内[Ca2+]i继续下降,停止处理约50 s后,胞内[Ca2+]i尚未至基线水平;而当细胞处于D-Hanks液中时,rhEndostatin对HSFs胞质内[Ca2+]i无明显影响。结论rhEndostatin可通过干扰HSFs胞内钙离子稳态,推动胞外Ca2+内流导致胞内钙超载来诱导HSFs凋亡。     

结核分枝杆菌CE复合物对人单核-巨噬细胞的功能表型的影响及其作用机制

目的研究结核分枝杆菌早期分泌抗原CFP-10-ES-AT-6复合物(CE复合物)对人单核-巨噬细胞功能表型的影响及其作用的细胞信号传导通路。方法分别采用ELISA法以及流式细胞仪检测大肠杆菌克隆表达纯化的CE复合物在不同时间及浓度对人单核-巨噬细胞TNFα-产生对细胞表型的影响,并且应用各种细胞信号传导通路抑制剂来探讨CE复合物作用的细胞信号传导通路。结果结核分枝杆菌CE复合物能够在早期(6~8h)诱导人单核-巨噬细胞活化,大量产生TNFα-,但在晚期(>48 h),则没有此作用;细胞信号传导通路MEK1/2和p38MAPK的选择性抑制剂SB203580、PD98059、U0126能抑制CE的这种作用;CE复合物在早期(18 h)促进单核-巨噬细胞表面抗原提呈功能分子CD80、CD40的表达。结论CE复合物在感染早期可能通过激活MEK1/2和p38MAPK刺激单核巨噬细胞活化,但在晚期则没有此作用。在感染早期可能具有重要的抗结核保护作用。     

盆腔肿瘤放疗中膀胱充盈一致性初步研究

目的 利用B超膀胱容量测量仪(BS)寻找简单、易行方式对盆腔肿瘤患者放疗过程中保持相对稳定尿量,在体位固定、CT扫描、计划设计、放疗实施时膀胱充盈程度保持一致的方法。方法 让2013-2014年收治的66例盆腔肿瘤放疗患者排空膀胱后立即饮水500 ml,用BS分别测量4个时间节点的膀胱容量。对放疗前62例患者进行随机分组单盲试验,排空膀胱后饮水500 ml,等待主观感觉尿急。第1组对42例患者进行口头交代憋尿,患者主诉“尿急”时进行膀胱容量测量并记录尿量。第2组告知20例患者尿量需达到计划设计时的标准,用BS监测是否达标。结果 从排空到主观感觉尿急的时间集中在0.5~1.5 h,主观感觉尿急时测得的尿量在30~500 ml。第1组主诉尿急时膀胱容量与计划设计时膀胱容量差异为30.6%。第2组膀胱容量差异为12.6%。结论 利用BS监测膀胱容量,指导患者形成稳定的尿急感受并达到与计划设计时相接近的膀胱容量,可以保持膀胱稳定的充盈程度。     

Neuropilin-1的干扰RNA对胃癌细胞株AGS生物学行为的影响

目的:探讨神经纤毛蛋白-1(neuropilin-1,NRP-1)的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对人胃腺癌细胞株AGS某些生物学行为的影响.方法:通过脂质体lip-2000分别将NRP-1特异性siRNA、control siRNA转染入人胃腺癌AGS细胞株作为转染组、无意义序列组,加入PBS的细胞作为空白对照组,采用MTT法检测三组细胞24h、48h、72h的增殖情况;Transwell小室侵袭和迁徙实验检测细胞的迁徙和侵袭能力.结果:转染后,转染组细胞的增殖能力在24h、48h和72h与对照组相比,均显著下降(P=0.00).小室迁徙及侵袭实验表明:与对照组相比,转染组的胃癌AGS细胞迁徙能力显著下降,差异具有统计学意义(P＜0.05).转染组的胃癌AGS细胞侵袭能力显著下降,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:Neuropilin-1的siRNA能够明显影响人胃癌细胞株AGS的某些生物学行为.     

S-腺苷蛋氨酸对大鼠肝缺血再灌注损伤后清蛋白mRNA表达的影响

目的:探讨S-腺苷蛋氨酸(思美泰)对大鼠肝缺血再灌注损伤后清蛋白(ALB)mRNA表达的影响。方法:将72只SD大鼠随机均分为假手术组,肝缺血再灌注组(IR组),肝缺血再灌注+腺苷蛋氨酸干预组(SAM组)。IR组和SAM组均以肝脏缺血20 min后再灌注的方式造模。SAM组于术后1 h腹腔注射思美泰100 mg/(kg.d),假手术组和IR组予以等体积生理盐水。各组分别于术后1,4,7,10 d处死6只大鼠,用实时定量PCR方法测定肝组织ALB mRNA的含量。结果:术后第1天SAM组和IR组ALB mRNA相对表达量较假手术组明显降低(均P<0.05),但两组间差异无统计学意义(P>0.05);从术后第4天开始,SAM组ALB mRNA的相对表达量明显高于IR组(P<0.05),且至术后第10天明显超过假手术组(P<0.05)。结论:腺苷蛋氨酸能提高肝缺血再灌注损伤后ALB mRNA的合成,增强肝脏的合成功能。     

CD48表达可作为区分造血干细胞分裂方式的活性标志

造血干细胞在细胞分裂时具有维持自我更新和产生定向分化的能力,其依赖于三种细胞分裂方式,一个干细胞产生两个新的干细胞（对称的更新分裂）、两个分化细胞（对称的分化分裂）或者一个干细胞和一个分化细胞（不对称分裂）。本研究旨在探索一种高效、稳定的区分造血干细胞分裂方式的方法。前期研究表明,Numb蛋白的分布情况可以作为许多细胞辨别分裂方式的标志,本研究利用免疫荧光技术检测Numb蛋白在小鼠分裂期CD48-CD150＋LSK细胞中的分布情况,探索Numb蛋白与中心体的关系。由于CD48表达阳性标志着细胞失去了骨髓重建能力,因此本研究把CD48的表达作为区分造血干细胞自我更新或定向分化的一个活性标志。从小鼠全骨髓细胞中分选出CD48-CD150＋LSK细胞,培养体系中加入自行制备的AF488-conjugatedanti-CD48抗体,培养3d后共聚焦荧光显微镜观察及流式细胞分析是否存在AF488＋细胞及其所占比例,然后二次分选AF488＋和AF488-细胞进行细胞集落形成实验（colonyformingcellassay,CFC）与细胞增殖能力比较。结果表明：Numb蛋白在处于分裂期的CD48-CD150＋LSK细胞中对称或不对称分布在细胞分裂平面两侧,这提示Numb蛋白染色可以作为一种区分造血干细胞分裂方式的方法。此外,CD48-CD150＋LSK细胞在含有自行制备的AF488-conjugatedanti-CD48抗体的培养体系中培养3d后产生约40％AF488＋细胞,共聚焦荧光显微镜统计的阳性细胞比例与流式细胞分析检测结果一致。二次分选AF488＋和AF488-细胞,AF488＋细胞群的集落形成能力显著高于AF488-细胞群（P〈0．05）,AF488一细胞群的增殖能力显著高于AF488＋细胞群（P〈0．05）。结论：CD48表达作为细胞千性丢失的活性标志,可区分造血干细胞的分裂方式。该方法与Numb蛋白染色方法相比,具有用于活细胞的优势,它为后续的细胞培养与细胞移植等研究工作提供了更大的便利。     

24例脑卒中偏瘫患者足下垂内翻的康复护理

<正>脑卒中是中老年人多发病,近年来有年轻化趋势。病死及病残率较高,致残率高达。70%~80%~([1])。脑卒中偏瘫患者足下垂内翻往往是患者步行能力以及步态恢复过程中的最为常见和困难的问题,也是致残的主要原因。严重影响患者的生存质量,严重影响步行能力及步态的恢复~([2])。通过对24例脑卒中偏瘫伴有踝足功能障碍,初期评定为BrunnstromⅠ~Ⅱ期的患者,早期行综合康复护理的干预,效果明显,现介绍如下。1临床资料2012年1月至2012年9月在我院住院的脑卒中患者24     

麦门冬多糖对高同型半胱氨酸血症大鼠心肌缺血再灌注血管紧张素和内皮素-1的影响

目的 探讨菊苣多糖对高同型半胱氨酸血症(Hhcy)大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及机制.方法 应用腹腔注射2％L-半胱氨酸5 ml/kg复制Hhcy大鼠模型,10 w后,腹腔注射戊巴比妥钠麻醉下气管插管安装呼吸机,开胸结扎冠状动脉左室降支60 min后松开结扎线再灌注60 min.标Ⅱ导联全程记录心电图,并于再灌注60 min取血.检测肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、血管紧张素(Ang)Ⅰ、AngⅡ、内皮素(ET)-1.结果 麦门冬多糖干预组的CK、LDH、Ang Ⅰ、AngⅡ、ET-I水平明显低于Hhcy模型对照组.结论 麦门冬多糖通过抑制血管活性因子对Hhcy大鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用.     

改良髌骨外侧关节面部分切除术治疗髌股关节炎

正2013年10月~2016年6月,我们对33例Iwano分期Ⅲ期髌股关节炎患者在髌骨外侧关节面部分切除术基础上同时采用外侧关节囊Z形切开松解术,效果良好,报道如下。1材料与方法1.1病例资料本组33例(36膝),男7例,女26例,年龄47~68岁。病程2~15年,Iwano分期均为Ⅲ期。1.2治疗方法全身麻醉或硬膜外麻     

算法和射野设置对肺癌容积旋转调强计划的剂量学影响

目的 分析不同剂量计算算法和不同射野设置对肺癌容积旋转调强计划(VMAT)的剂量学差异,为临床计划设计提供参考。方法 选择20例肺癌患者,分别设计4组VMAT计划:基于各向异性解析算法(AAA)的2野2弧(2F2A_AAA)、基于外照射光子剂量算法(AXB)射的2野2弧 (2F2A_AXB)、基于蒙特卡罗算法(MC)的2野2弧(2F2A_MC)、基于MC算法的1野2弧(1F2A_MC)。分别对不同算法、不同射野设置的计划,在靶区覆盖、高量控制、剂量均匀性指数(HI)、适形性指数(CI),以及危及器官(OARs)受照剂量进行评估。结果 3组不同算法的2F2A计划靶区结果表明,2F2A_MC在PGTV的D_1%和V_95%(受到95%处方剂量所包绕的靶区相对体积)上均优于2F2A_AAA(D_1%:t=-2.44,P=0.03;V_95%:z=-2.04,P=0.04)和2F2A_AXB(D_1%:t=2.34, P=0.03; z=-3.21,P<0.01)。 2F2A_AXB在PGTV的CI表现上优于2F2A_AAA(z=-3.66,P<0.01),与2F2A_MC相当。就危及器官而言,2F2A_AXB和2F2A_MC全肺的V_{5 Gy}上分别较2F2A_AAA减少了0.68%(z=-2.69,P=0.01)和3.05%(z=-3.52,P<0.01)。2F2A_AXB计划在全肺D_mean为1776.44 cGy,均优于2F2A_MC(t=2.67,P=0.02)和2F2A_AAA(t=8.62,P<0.01)。2F2A_AXB的Body_5mm在V_{20 Gy}相较于2F2A_AAA和2F2A_MC分别减少了1.45%(z=-3.88,P<0.01)和2.01%(z=-3.66, P<0.01)。而不同射野设置的两组计划结果表明,1F2A_MC在PTV1的CI和PTV2的HI上均优于2F2A_MC(CI: t=2.61, P=0.02; HI: z=-2.20, P=0.03)。1F2A_MC在全肺D_mean相对于2F2A_MC增加了26.29 cGy(t=2.28,P=0.04)。结论 在进行肺癌VMAT计划设计时,MC算法适用于靶区优先,AXB算法适用于危及器官优先;而仅有MC算法的情况下,靶区优先时推荐选择1F2A,危及器官优先时推荐选择2F2A。