牛膝多糖与锌对小鼠树突状细胞增殖分化和抗原提呈能力的影响

目的 研究牛膝多糖与锌单用及合用在异源性抗原负载的条件下对小鼠树突状细胞 (DC) 增殖分化和抗原提呈能力的影响,并通过体内实验证实其对荷瘤小鼠的免疫效应,探讨其发生机制。方法 无菌处死正常小鼠获取其骨髓细胞,粒细胞-巨噬细胞刺激因子 (GM-CSF) 和白细胞介素-4 (IL-4) 体外诱导骨髓细胞生成 DC,同时培养液中加入不同质量浓度的牛膝多糖 (200、300、400 μg/mL)、锌 (0.02 μg/mL)。通过显微镜、流式细胞检测技术观察牛膝多糖、锌单用与合用在异源性抗原负载的条件下对 DC 的影响,并通过体内实验观察对 H22荷瘤小鼠脾指数、胸腺指数及肿瘤质量的影响。结果 牛膝多糖和锌单用在异源性抗原负载的情况下能够促进小鼠骨髓源性 DC 的分化、成熟及表面标记 CD86、CD11a 的表达,增强 DC 诱导的细胞毒性T淋巴细胞反应,能够使荷瘤小鼠免疫器官脾脏和胸腺的质量增加,明显抑制肿瘤的生长,并存在明显量效关系;中剂量为正性效应,高剂量为负性效应;但牛膝多糖和锌合用并不协同增强效应。结论 牛膝多糖和锌在异源性抗原负载的条件下能够通过刺激 DC 的分化成熟,提高其抗原提呈能力,进而起到提高机体细胞免疫的作用。     

曲古菌素A对食管癌细胞系EC1细胞凋亡的影响

目的:探讨曲古菌素A(TSA)对食管癌EC1细胞凋亡的影响.方法:用DMSO(对照组)和0.3、0.5及1.0μmol/L的TSA处理EC1细胞24h,用Annexin V-FITC和PI双染色,流式细胞仪检测4组细胞的凋亡率,West-ern Blot检测4组细胞中Bax及Bcl-2表达的变化.结果:对照组、0.3、0.5及1.0 μmol/L TSA组作用24 h后,EC1细胞凋亡率分别为(2.18±0.37)%、(2.96±0.34)%、(7.41±1.01)%和(14.03±1.23)%,Bax蛋白表达水平分别为(0.42±0.23)、(0.45±0.11)、(1.16±0.28)和(1.89±0.30),Bcl-2蛋白表达水平分别为(1.15 ±0.14)、(1.11±0.15)、(0.59±0.06)和(0.40±0.07),4组间3指标差异均有统计学意义(F=211.96,25.12和33.68,P均<0.001),随TSA作用浓度的增加,EC1细胞凋亡率、Bax蛋白表达均增加,Bcl-2表达减少.结论:一定剂量的TSA可以诱导EC1细胞凋亡,凋亡的发生町能与Bax表达增加和Bcl-2表达减少有关.     

肾虚型绝经综合征妇女生存质量分析

目的对肾虚型绝经综合征患者进行调查研究,分析其生存质量现状以及与中医证候的相关性.方法以现场问卷调查的方式对424名患者进行调查,分析绝经综合征肾虚证候的不同症状的出现率;对中医证候量表记分及生存质量量表总记分及其4个维度进行相关分析;对不同绝经时段患者生存质量进行比较分析.结果①本研究中患者的主要临床表现为血管舒缩功能紊乱、精神神经系统和骨骼运动系统等症状,绝经综合征主症以及肾虚的典型症状的出现率较高.心理和生理症状有较好的相关性.②中医证候记分越高,绝经综合征患者的生存质量越差.③绝经后患者的生存质量较绝经前普遍较差;肾阴虚患者在性生活维度方面,肾阳虚患者在生理症状维度方面,绝经前后有显著性差异.结论绝经综合征患者的生存质量状况欠满意,随绝经年限的增长生存质量有下降趋势.中医证候与生存质量有较好的正相关,具有不同中医证候期的患者,生存质量的维度变化有一定的差别.     

中药治疗大鼠急性脊髓损伤的初步实验观察

目的:研究活血化瘀中药对脊髓损伤的治疗效果及其对脊髓组织病理改变的影响,探讨其作用机制.方法:随机取5只大鼠作为空白组,将69只脊髓损伤造模(改良Allen法)后的大鼠随机分为损伤组、激素组和中药组.空白组和损伤组术后不用药,激素组和中药组术后分别给予甲基强的松龙和中药治疗,于术后6 h、24h、7 d、14 d观察各组大鼠脊髓运动功能恢复及脊髓组织学改变.结果:中药组脊髓运动功能评分明显优于激素组;中药组的病变与损伤组相比,有病损缩小、空泡面积减小的表现.结论:中药与激素在抑制病变进程、保护神经组织免受损害、促进间质细胞生长上发挥其有益作用.从功能和形态学上证实了中药与激素治疗的有效性.两者在病理学上影响类似.     

转染pcDNA3-hCEA的人树突状细胞对MGC803细胞的作用

目的：观察转染含人癌胚抗原（CEA）真核表达质粒pcDNA3-hCEA的人树突状细胞（DC）对胃癌细胞MGC803的抑制作用.方法：采用细胞因子rhIL-4和rhGM-CSF诱导培养法制备人外周血DC并用Lipofectamine向人DC转染pcDNA3-hCEA.RT-PCR检测转染细胞hCEA的表达,观察DC-hCEA细胞诱导的致敏的T淋巴细胞（CTL）对胃癌细胞MGC803的杀伤效应.结果：DC-hCEA诱导的CTL对胃癌细胞MGC803的杀伤效应强于DC（P＜0.05）.结论：编码CEA基因的真核表达质粒转染的人DC能够诱导较强的特异性抗肿瘤免疫效应.     

负载人HUVECs抗原的DC疫苗诱导小鼠对宫颈癌U14的特异性免疫反应

目的:探讨负载人脐静脉内皮细胞(HUVEC)抗原的DC疫苗诱导小鼠对宫颈癌U14的特异性免疫反应.方法:原代培养和鉴定人HUVECs,制备抗原,负载树突状细胞(DC),免疫小鼠,免疫结束后1周小鼠皮下注射小鼠宫颈癌U14细胞,观察肿瘤生长大小、检测免疫后小鼠脾细胞体外CTL效应、表面CD3+CD8+百分率和血清抗体滴度,通过细胞免疫组化和Western blot血清特异性反应分析.结果:经免疫组化鉴定成功培养出纯度高的HUVECs,抗原负载DC并注射BALB/c小鼠后,PBS组肿瘤生长最快,DC组和HUVEC-DC组肿瘤也有生长,但生长较慢,在2周后HUVEC-DC组肿瘤消失,3周后DC组肿瘤消失.小鼠脾细胞体外CTL结果显示HUVEC-DC组有明显的特异性杀伤HUVEC的作用.CD3+CD8+百分比提示HUVEC-DC组细胞毒性T细胞比例较其他两组高.小鼠血清抗体滴度示有抗体产生,免疫组化检测示组与HUVEC有特异性抗原抗体反应,Western blot显示在相对分子质量(Mr)130 000和220 000处有特异性条带.结论:负载人HUVECs抗原的DC疫苗和DC疫苗对小鼠宫颈癌U14有抑制作用,HUVEC-DC疫苗诱导了小鼠的细胞和体液免疫,并诱导了针对HUVECs细胞中的某些抗原的应答,这些抗原可能是整合素αν和VEGF-R2.     

淋巴细胞表面的一种热休克蛋白BE_2的分离与鉴定

目的 :ＢＥ2 是皮肤Ｔ细胞淋巴瘤 (ＣＴＣＬ)Ｔ细胞白血病的恶性淋巴细胞、艾滋病 (ＡＩＤＳ)患者的部分淋巴细胞以及ＥＢ病毒转化的Ｂ淋巴细胞 (ＥＢＶ -Ｂ)所表达的细胞表面的一种单聚体蛋白质 ,分子量为 78ｋＤ。Ｂｅｒｇｅｒ等用ＨＴＬＶ - 1 的成人Ｔ细胞白血病 (ＡＴＬ)患者的淋巴细胞免疫小鼠 ,制备抗ＢＥ2 的单克隆抗体。该单抗可以识别在ＣＴＣＬ和ＡＴＬ的恶性Ｔ细胞 ,ＥＢＶ -Ｂ细胞 ,慢性Ｂ淋巴细胞白血病的淋巴细胞及ＡＩＤＳ的部分淋巴细胞所表达的一种 78ｋＤ的单链膜蛋白。休止状态的淋巴细胞受丝裂原等刺激后 ,其正常的Ｔ…     

胃肠道间质瘤免疫表型及预后分析

目的:探讨胃肠道间质瘤(GIST)的免疫表型特征及其与侵袭危险性和预后的关系.方法:采用免疫组织化学SP法检测59例GIST(良性19例,恶性19例,交界性21例)组织CD117、CD34、Vimentin、Desmin、SMA、MSA、S-100、NSE和NF的表达.38例获随访12～72个月,按Fletcher等GIST生物学行为评价标准进行侵袭危险性评估,极低度(Ⅰ)2例,低度(Ⅱ)11例,中度(Ⅲ)11例,高度(Ⅳ)14例,分析生存率与侵袭危险性的关系.结果:59例GIST中,平滑肌源性22例,神经源性22例,神经和平滑肌双源性10例,狭义GIST 5例;4类GIST CD117、CD34、Vimentin阳性率、不同恶性程度GIST上述几种免疫表型阳性率差异均无统计学意义(P>0.05).生存率随侵袭危险性增大而降低(P<0.05).结论:CD117、CD34有助于GIST的诊断.GIST侵袭危险性与预后有关.     

EC9706肿瘤条件培养基对树突状细胞的影响

目的:探讨食管癌EC9706细胞肿瘤条件培养基模拟的体外肿瘤微环境对人单核细胞来源的树突状细胞(DC)分化发育的影响.方法:密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,加入含rhGM-CSF和rhIL-4的RPMI 1640培养液诱导DC.第2天对照组同前培养,实验组在此基础上加入含rhGM-CSF、rhIL-4的EC9706肿瘤条件培养基;第4天加入超声破碎法制备的EC9706抗原;第6天加入脂多糖.第8天收集对照组正常成熟DC和实验组肿瘤相关DC(TADC),显微镜观察其形态,流式细胞仪检测其免疫表型,RT-PCR检测CD1a基因的表达,混合淋巴细胞反应及体外杀伤活性实验检测其诱导的细胞毒T细胞(CTL)的增殖能力及对EC9706细胞的杀伤能力.结果:第8天,与正常成熟DC相比,TADC细胞呈发育迟缓状态,CD86、CD1a及CD11c表达降低(P<0.01),CD1a基因不表达(正常DC较强表达),TADC体外刺激形成的CTL增殖率及对EC9706细胞的杀伤率均降低(P<0.01).结论:EC9706肿瘤条件培养基所模拟的微环境对DC的诱导分化及功能有明显的抑制作用,这可能是肿瘤细胞逃避机体免疫监视的机制之一.