逆转录酶抑制剂AZT对胶质瘤干细胞端粒酶活性和细胞增殖的影响

目的 探讨逆转录酶抑制剂3-叠氮-3-脱氧胸腺核苷(AZT)对脑胶质瘤干细胞增殖的影响及相关机制.方法 原代分离培养脑胶质瘤干细胞和脑胶质瘤细胞并鉴定,两种细胞同时设立为实验组(0.125 mot/L、0.250 mol/L、0.500 mol/L AZT)和对照组.MTT法检测AZT对两种细胞增殖的影响;流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期的改变;端粒重复序列扩增技术-酶联免疫吸附试验(TRAP-ELISA)检测端粒酶活性的变化.结果 AZT对两组细胞的生长抑制呈浓度-时间依赖性(均P<0.05),在同一浓度和时间点,AZT对脑胶质瘤干细胞的生长抑制作用弱于脑胶质瘤细胞(均P<0.05).0.250 mol/L、0.500 mol/L AZT作用72 h后,脑胶质瘤干细胞的凋亡率分别为(4.21±1.53)%、(10.60±0.38)%,而脑胶质瘤细胞的凋亡率分别为(6.75±1.25)%,(14.30±2,59)%,明显高于胶质瘤干细胞(均P<0.05).AZT对两组细胞端粒酶活性的抑制呈浓度-时间依赖性(均P<0.05),且在同一浓度和时间点对脑胶质瘤细胞的作用明显强于脑胶质瘤干细胞(均P<0.05).结论 逆转录酶抑制剂AZT对脑胶质瘤干细胞和脑胶质瘤细胞均有明显的生长抑制作用,可能机制是通过抑制端粒酶活性、调控细胞周期和诱导细胞凋亡实现.脑胶质瘤干细胞的耐药性强于胶质瘤细胞,其机制有待进一步研究.     

脑胶质瘤干细胞基因靶向治疗研究进展

脑肿瘤干细胞研究的不断深入,尤其对基因和关键信号路径认识的更加清晰,各种针对肿瘤干细胞基因治疗方案作为热点被研究,其中已经有多种运用于临床,并取得了一定的疗效。本文将重点对脑胶质瘤干细胞基因靶向治疗研究进展进行讨论。     

长期口服天麻素对SAMP8鼠记忆力及额叶Sst表达的影响

目的:研究长期口服天麻素对SAMP8鼠记忆力的影响及与额叶Sst表达水平的关系。方法:将4月龄雄性SAMP8鼠20只随机分成2组:天麻素治疗组和对照组。治疗组每只鼠平均每日饮10ml含60μg/ml天麻素的蒸馏水,对照组每日仅饮用蒸馏水,直至12月龄。然后,观察两组鼠皮毛、眼睑、运动等基本情况;并通过passive-avoidance-test实验检测两组鼠对疼痛刺激的短期记忆力;同时用QRT-PCR(quantitative real time polymerase c hain reaction)和Western Blot分别检测两组鼠额叶生长抑素(somatostatin,Sst)的转录水平和表达水平。结果:天麻素治疗组小鼠的毛发光泽好、眼睑无炎症、较活跃,而对照组小鼠脱毛明显、部分小鼠眼睑有炎症、运动少;Passive-avoidance-test实验中天麻素治疗组小鼠明室停留时间及进入暗室小鼠的比例与对照组相比具有显著性差别;QRT-PCR结果显示,天麻素治疗组小鼠额叶中Sst转录水平较对照组升高,二者比较差别具有显著性;Western Blot结果显示,天麻素治疗组小鼠额叶中Sst表达水平较对照组明显升高。结论:天麻素治疗可能通过增进额叶Sst的转录和表达水平以改善SAMP8鼠的学习记忆能力。     

大鼠胚胎中脑多巴胺神经元的分离培养与鉴定

背景：神经细胞移植治疗是最有希望治愈帕金森病的方法之一。 目的：探讨大鼠胚胎中脑多巴胺神经元分离、培养与鉴定的方法。 方法：解剖分离E14d SD大鼠胚胎中脑组织,制备单细胞悬液,以神经细胞培养液培养,观察其生长情况并进行RT-PCR和免疫组织化学鉴定。 结果与结论：在神经细胞培养液中,细胞生长良好。RT-PCR和免疫组织化学结果显示大多数细胞表达多巴胺神经元特异性分子标志。证实实验成功建立了大鼠胚胎中脑多巴胺神经元分离培养与鉴定的方法。     

骶管重建在症状性骶管囊肿后路手术中的应用

目的 探讨骶管重建在症状性骶管囊肿后路手术中的应用效果。方法 2010~2015年采用骶骨开窗后路手术治疗症状性骶管囊肿21例,其中12例术中行骶管重建（A组）,9例未行骶管重建（B组）。结果 A组术后脑脊液漏发生率（0）明显低于B组（33.3%,3/9;P<0.05）。术后随访6个月,术后a组11例症状明显缓解,1例稍缓解;b组8例明显缓解,1例稍缓解;均未发生囊肿复发。>结论 症状性骶管囊肿后路手术可有效缓解患者症状,术中进行骶管重建可减少术后脑脊液漏发生几率。     

芹菜素对顺铂化疗所致肾损伤及Nrf2/HO-1通路的影响

目的 探索芹菜素（APG）对顺铂（DDP）化疗所致肾损伤大鼠的保护作用及机制研究。方法 将60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、氨磷汀组（阳性对照组）及APG低、中、高剂量组,每组10只。模型组、氨磷汀组及APG低、中、高剂量组大鼠均采用一次性腹腔注射DDP（7.5 mg·kg^-1）的方法建立DDP致肾损伤大鼠模型,空白组大鼠仅腹腔注射生理盐水（不造模）;然后分别腹腔注射给药（APG低、中、高剂量组分别给予10、20、40 mg·kg^-1 APG,氨磷汀组给予1 mg·kg^-1氨磷汀,空白组和模型组均给予生理盐水）,1次/d,连续给药28 d。测定各组大鼠24 h尿蛋白量和血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）含量,HE染色法、TUNEL法分别行肾脏病理学检查和细胞凋亡检测,生化分析法检测MDA含量和抗氧化酶（SOD、GSH-Px）活性,ELISA法检测炎症细胞因子（TNF-α、IL-1β、IL-6）水平,Western blotting检测核因子E2相关因子2（Nrf2）、血红素加氧酶-1（HO-1）、核因子-κB（NF-κB）、激活型半胱胺酸蛋白酶-3（Cleaved Caspase-3）蛋白的表达水平。结果 与模型组比较,APG中、高剂量组和氨磷汀组大鼠24 h尿蛋白量和血清Scr、BUN含量显著降低（P<0.05）,肾脏组织病理学改变和细胞凋亡状况明显改善,凋亡指数（AI）显著降低（P<0.01）,MDA含量显著降低且SOD、GSH-Px活性显著升高（P<0.05）,TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著降低（P<0.05）,Nrf2、HO-1表达显著上调而NF-κB、Cleaved Caspase-3表达显著下调（P<0.01）。与氨磷汀组比较,APG高剂量组大鼠血清Scr、BUN含量显著降低（P<0.05）,肾脏组织病理学改变和细胞凋亡状况明显改善、AI显著降低（P<0.01）,MDA含量显著降低且SOD活性显著升高（P<0.01）,TNF-α、IL-1β水平显著降低（P<0.05）,Nrf2、HO-1表达显著上调且Cleaved Caspase-3表达显著下调（P<0.05）。结论 APG对DDP所致肾损伤大鼠具有保护作用,其作用机制可能与激活Nrf2/HO-1通路而抑制氧化应激损伤、炎症反应和细胞凋亡有关。     

血糖波动对糖尿病大鼠心肌组织中转化生长因子β_1的影响

目的:探讨血糖波动对糖尿病大鼠心肌组织中转化生长因子β1(TGF-β1)的影响。方法:雄性Wistar大鼠30只,分为对照组,波动性高血糖组,持续性高血糖糖组,饲养8周后,取血测定血管紧张素Ⅱ浓度,测定心肌组织中TGF-β1的表达。结果:波动性高血糖糖尿病大鼠心肌组织内TGF-β1的表达及血管紧张素Ⅱ的含量显著高于持续性高血糖组及对照组。结论:糖尿病时血糖波动对心肌细胞的影响,要强于平稳的高血糖状态。     

胶质瘤U251干细胞的培养、分离以及体内成瘤的实验研究

目的 以U 251为研究对象探索恶性胶质瘤的新治疗方案,培养恶性胶质瘤干细胞并同时建立肿瘤模型,为下一步体内靶向治疗奠定肿瘤模型基础.方法 培养普通的U251细胞,并在无血清的条件下加入EGF、bFGF、LIF、B27因子,培养获得U251干细胞;分别制备浓度为3.5×107/mL的U251和U251干细胞悬液,并分别种植于BALB/c Nude小鼠左右臀部皮下,观察并测量荷瘤体积.结果 通过以上方法培养,获得U251干细胞:在相同浓度的条件下,干细胞移植组荷瘤生长速度明显比普通的恶性胶质瘤快,并且荷瘤体积明显大于普通的U251细胞组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 U251恶性胶质瘤干细胞比普通U251胶质瘤细胞更具有高生长率、高侵袭性、和高表达CD133抗原;应用U251恶性胶质瘤干细胞建立肿瘤模型更优于普通U251胶质瘤细胞.     

七氟醚预处理在单肺通气肺缺血再灌注损伤中的保护作用

目的 探讨七氟醚预处理对单肺通气肺缺血再灌注损伤局部脑氧饱和度、肺顺应性、炎性应激及氧化应激状态的影响.方法 选取2015年10月至2017年7月于本院诊治行肺叶切除术患者88例作为研究对象,依据随机数字表法分为对照组(n=44)和观察组(n=44),对照组患者给予丙泊酚麻醉处理,观察组患者在对照组治疗基础上给予七氟醚预处理(单肺通气前预先吸入1.0％～2.0％七氟醚30 min),比较麻醉诱导前(T0)、单肺通气15 min(T1)以及双肺通气15 min(T2)3个时间点两组患者局部脑氧饱和度(regional cerebral oxygen saturation,rSO2)、肺动态顺应性(dynamic lung compliance,Cdyn)、炎性因子[细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1),肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)]与氧化应激水平[超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD),丙二醛(malondialdehyde,MDA)]水平.结果 两组T0时刻左侧rSO2、右侧rSO2、Cdyn、ICAM-1、TNF-α、SOD、MDA水平比较,差异无统计学意义(P＞0.05);观察组T1、T2时刻左侧rSO2、右侧rSO2及Cdyn水平均显著高于对照组(P＜0.05).两组T1、T2时刻ICAM-1、TNF-α、MDA水平均显著高于T0时刻,且T2时刻水平显著高于T1时刻,观察组T1、T2时刻水平均显著低于对照组(P＜0.05).与T0比较,T1、T2时刻两组SOD水平均显著降低,且观察组水平显著高于对照组(P＜0.05).结论 七氟醚预处理可有效改善单肺通气肺缺血再灌注患者局部脑缺氧状态和肺顺应性,减轻炎性应激反应,改善患者氧化应激状态.     

胰十二指肠损伤的临床特点及术后并发症危险因素分析

目的探讨胰十二指肠损伤的临床特点及术后并发症发生的危险因素。方法回顾性分析47例外伤性胰十二指肠损伤手术病例的临床特点,探讨年龄、术前/术中休克、胰十二指肠联合损伤、确诊时间及ISS、APACHEⅡ评分等因素与术后并发症发生率、死亡率的关系。结果47例病例中,腹部闭合性损伤占76.60%,开放性损伤23.40%,多发伤40.43%。胰腺损伤13例,十二指肠损伤28例,胰十二指肠联合损伤6例。术前确诊率为53.19%,手术诊断率97.87%,确诊时间(7.85±3.17)h。术后并发症发生率和死亡率分别为27.66%和8.51%。并发症组的术前/术中休克发生率、胰十二指肠联合损伤发生率、确诊时间、ISS、APACHEⅡ评分分别为53.85%、38.46%、(9.78±2.16)h、20.92±8.11、10.32±3.16,无并发症组分别为11.76%、2.94%、(6.81±2.35)h、16.47±5.28、7.12±2.74,组间差异均有统计学意义(P<0.01或<0.05)。死亡组ISS、APACHEⅡ评分值分别为29.17±10.31、14.75±5.37,显著高于无死亡组的16.85±6.73、8.39±3.13(P<0.01)。结论胰十二指肠损伤在病史、实验室及影像学检查方面具有其特点,综合分析有利于迅速明确诊断,休克、胰十二指肠联合损伤、确诊时间及高ISS、APACHEⅡ评分是其术后并发症发生的危险因素。