肿瘤转移抑制基因nm23—H1 mRNA在乳腺癌中的转录表达

目的：探讨nm23—H1基因mRNA在乳腺患组织中的表达及其与临床的关系．方法:采用半定量RT—PCR方法，检测30例乳腺患组织nm23—H1的表达．结果:①淋巴结阳性的原发灶组织nm23—H1 mRNAA表达明显低于淋巴结阴性的原发灶组织，Ⅲ期乳腺患组织nm23—H1 mRNA水平较Ⅰ、Ⅱ期的明显低．②多因素分析发现淋巴结转移与nm23—H1 mRNA的表达有显著性相关．结论nm23—H1基因mRNA表达强度与淋巴结转移呈负相关．在乳胰患转移过程中，nm23—H1 mRNA起重要的作用。     

放线菌素D/TNF-α诱导大鼠肝干细胞凋亡及HGF的拮抗作用

目的 研究TNF-α、肝细胞生长因子(HGF)在肝干细胞的增殖、分化调控及凋亡中的作用。方法 用大鼠肝干细胞系WB F-344细胞进行实验，用MTT法检测细胞毒作用；用DNA凝胶电泳及流式细胞仪检测细胞凋亡；用Western blot方法检测磷酸化MAPK及PI3K蛋白的表达。结果 发现TNF-α单独对WB F-344细胞无明显作用；而TNF-α对放线菌素D(ActD)致敏的WB F-344细胞有明显细胞毒作用。进一步，发现TNF-α能够诱导ActD致敏的WB F-344细胞发生凋亡，在作用9h即出现细胞凋亡(13．60％)，48h达高峰(51％)，并且这种凋亡呈剂量效应关系。我们还发现，HGF可以明显拮抗ActD／TNF-α诱导的WB F-344细胞凋亡，并且呈剂量效应关系。Western blot结果显示，HGF刺激后，磷酸化MAPK蛋白高表达，表明HGF激活了MAPK途径。我们进一步用PI3K特异的抑制剂WT阻断PI3K途径，发现HGF的抗凋亡作用被阻断；然而，用MAPK特异抑制剂U0126阻断MAPK途径后，却并不影响HGF的抗凋亡作用。结论 TNF-α能诱导ActD致敏的肝干细胞发生凋亡，而HGF则对这种细胞凋亡有明显的拮抗作用；虽然HGF能够激活PI3K及MAPK 2条途径，但其抗凋亡作用是由PI3K途径传导的。     

超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素基因B的原核表达

目的构建重组pET-30a-SEB原核表达载体,转化感受态大肠杆菌BL-21(DE3),诱导表达超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素B(staphylococcalenterotoxinB,SEB)。方法利用PCR技术从产SEB的金黄色葡萄球菌标准菌株CMCC-26075基因组DNA中克隆SEB全长序列,将其克隆到pGEM-TEasy载体中并进行测序。构建pET-30a-SEB原核表达质粒,转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),异丙基硫代β-D半乳糖苷(isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导表达,经镍离子螯合亲和层析纯化后免疫鉴定。结果PCR获得超抗原SEB基因片段,与克隆载体连接后经测序与文献报道的基本一致;成功构建了pET-30a-SEB原核表达质粒且成功诱导表达出相对分子质量(Mr)约31×103的蛋白。结论成功克隆了seb基因序列,并进行了原核表达和鉴定,获得了SEB蛋白,为后续对超抗原SEB的进一步研究奠定了基础。     

不同长度poly(A)尾对mRNA体外表达的影响及转录模板在大肠埃希菌中的传代稳定性

目的探索不同长度poly(A)尾对mRNA体外表达的影响以及含poly(A)尾转录模板在大肠埃希菌中的传代稳定性。方法设计并构建含38、60、103、125 nt和60 nt+6 nt间隔序列+60 nt(简称126 nt)poly(A)尾的模板质粒, 利用单酶切将其线性化并以此作为转录模板进行体外转录反应制备增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein, EGFP)-mRNA。将含有不同长度poly(A)尾的EGFP-mRNA转染293T细胞, 流式细胞术检测EGFP表达情况。将poly(A)尾长度为125 nt和126 nt的模板质粒分别转化至大肠埃希菌TransStbl3感受态细胞以及Top10感受态细胞中, 各挑取7个单克隆进行培养并提取质粒, 质粒经双酶切后进行毛细管电泳检测。分别从中选取3个测序正确的单克隆于37℃条件下进行连续传代, 每两代提取一次质粒, 双酶切后进行毛细管电泳检测。同时将poly(A)尾长度为125 nt的两组单克隆再分别于30℃条件下进行连续传代, 每两代提取一次质粒并进行双酶切鉴定和毛细管电泳检测。结果成功构...     

1975至2014年上海市静安区户籍人口脑血管病死亡的流行趋势分析

目的 了解1975至2014年上海市静安区户籍人口脑血管病死亡的流行趋势,为制定预防控制策略和 措施提供科学依据。 方法 利用静安区1975至2014年居民死因监测资料,计算脑血管病粗死亡率,标化死亡率,40年间死 亡率变化趋势及平均死亡年龄的变化趋势。 结果 1975至2014年上海市静安区户籍人口脑血管病死亡的平均粗死亡率及标化死亡率分别为 165.60/10万和120.54/10万,男女性的死亡率差异无统计学意义;40年间脑血管病粗死亡率呈上升趋 势（χ 2 趋势=10.58,P <0.001）,标化死亡率呈逐年下降的线性趋势,用SAS系统中的AUTOREG（自回归） 过程进行时间序列线性趋势拟合,回归模型有意义（t =32.13,P <0.001）;脑血管病平均死亡年龄呈 逐年上升的线性趋势,采用时间序列线性趋势拟合,回归模型有意义（t =260.46,P <0.001）。 结论 本文的研究结果提示上海市脑血管病的患病率将持续升高,而脑血管病的存活年龄逐年上升。     

X线—病理对照研究中肺标本的制做和应用

本文通过总结我们做过的周围型肺肿块X 线一病理对照研究并结合有关文献,将X 线-病理对照研究中肺标本的制做和应用等问题加以讨沦。一、肺标本制做的方法与步骤1.将收集到的术后切除肺标本立即轻轻挤压,使     

PCBP1:一种在多水平上参与基因表达调控的蛋白因子

多聚胞嘧啶结合蛋白1 (poly C binding protein-1,PCBP1),属于RNA结合蛋白亚家族,因其具有同RNA的多聚胞嘧啶(poly C)区域特异的结合活性而得名.目前该亚家族共有5个成员:hnRNP K(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K)、PCBP1、PCBP2、PCBP3和PCBP4.PCBP1蛋白在多个水平参与基因的表达调控,如转录、mRNA加工、mRNA的转运、mRNA稳定以及翻译水平调控等.本文对PCBP1基因的结构和生物学功能进行了综述.     

线粒体转运蛋白质家族

线粒体转运蛋白质家族(mitochondrial transporter family)等可溶性物质载体(solute carrier,SLC),主要包括SLC25,广泛存在于真核生物线粒体中,负责可溶性物质跨线粒体内膜的转运.SLC25家族成员拥有相似的结构特征、种类繁多的转运底物,并与细胞的多种生理功能密切相关.有研究表明,SLC25家族蛋白质的缺失或突变可导致多种代谢性疾病或神经系统疾病的发生.     

塑料刷取样涂片法应用于宫颈癌病变检测的研究

目的探讨塑料刷取样涂片法在宫颈病变检测中的意义,以期找到宫颈癌早期筛查的合理方案。方法2005年5～12月,对在徐州市第一人民医院妇产科门诊就诊的妇女分别以传统宫颈细胞涂片法(1850例),塑料刷取样涂片法(1500例),液基细胞检查(TCT)法(2200例)进行宫颈病变的检测。细胞诊断系用TBS分级系统,阳性诊断为意义不明的不典型鳞状上皮(ASCUS)及以上病变。所有阳性结果病例全部在阴道镜下活检。结果传统宫颈细胞涂片法、塑料刷取样涂片法、TCT法对ASCUS以上病变的检出率分别为4.9%、9.8%、10.2%,后二者与前者相比,结果差异有显著性(P﹤0.01),后两者结果无明显差别(P﹥0.05)。三者与病理诊断的阳性符合率分别为20.8%、36.7%、35.8%,后两者与前者相比有明显优势(P﹤0.05),而后两者无明显差别(P﹥0.05)。结论塑料刷取片法应用于宫颈病变的检测操作简单,费用较低,特异性敏感高,较传统涂片法及TCT有明显优势,可作为宫颈癌筛查的最佳选择。     

访美国罗马林达大学医学中心及其影像学科

因成功地进行了心脏移植术而著称于世的美国罗马林达大学医学中心(Loma Linda University Medical Center,LLUMC)正日益引起中国和世界医学界的瞩目。目前,我正在该医学中心影像学科访问学习。现将LLUMC及其影像学科简介如下。一、罗马林达大学和LLUMC概况罗马林达大学(Loma Linda University,LLU)地处美国南加利福尼亚州,始建于1905年。它是一所教会办私立综合大学,共有两处校园:一处为位于Riverside市的La Sierra校园,一处为位于Loma Linda市的Loma Lin-