Tet-on和Cre／loxP双调控肝靶向表达Cre重组酶转基因小鼠的制备和功能评价

目的制备Tet-on和Cre/loxP系统双重调控下肝靶向性表达Cre重组酶的转基因小鼠rtTALAP-1/LC-1并评价其功能,为最终建立可突破胚胎期免疫耐受的双调控型HCV转基因小鼠模型奠定基础。方法选取适龄rtTALAP-1转基因小鼠与LC-1转基因小鼠交配,PCR法检测子代rtTALAP-1/LC-1转基因小鼠基因组中是否插入了rtTA元件和Cre基因片段。双阳性rtTALAP-1/LC-1小鼠dox诱导1周后,以小动物活体成像系统检测小鼠肝脏的Luc萤光素酶信号,免疫组化检测Cre重组酶在小鼠肝脏等组织中的表达状况。结果 rtTALAP-1/LC-1转基因小鼠在dox诱导后,仅在其肝脏检测到清晰的Luc萤光素酶信号,而其他脏器均未检测到萤光信号;免疫组化法也仅在小鼠肝细胞核中检测到Cre重组酶的表达,心脏、肾脏和骨骼肌等其他组织均未检测到Cre重组酶的表达。结论成功制备了rtTALAP-1/LC-1转基因小鼠,其靶基因表达的诱导反应性和肝靶向性均良好,为最终制备双调控型丙型肝炎病毒（HCV）转基因小鼠模型奠定了良好的基础。     

中药复方合剂抗甲型H1N1流感病毒活性的实验研究

目的:观察中药复方合剂对甲型流感病毒A/PR/8/34(H1N1)的抑制作用.方法:采用鸡胚法检测药物对鸡胚的最大无毒限量和半数鸡胚感染量(EID50),通过中药复方合剂对病毒的直接作用、预防作用和治疗作用,观察鸡胚的存活率和测定鸡胚尿囊液血凝滴度.结果:中药复方合剂对鸡胚最大安全浓度为500 mg/mL,半数鸡胚感染...     

ZMAT4、NCAM水平在甲状腺癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨苦参素型锌指蛋白4(ZMAT4)、神经细胞黏附因子(NCAM)水平在甲状腺癌组织中的表达及临床意义,为指导临床早期干预提供依据.方法 选取2018年1月～2019年12月收治的30例甲状腺癌患者作为甲状腺癌组,并选择同期甲状腺腺瘤患者30例作为甲状腺腺瘤组,两组均进行甲状腺手术治疗,术后病理组织均采用免疫组织...     

胰岛素样生长因子、瘦素与胎儿生长受限的相关性研究

目的探讨胰岛素样生长因子一1(Insulin-like growth factor-1,IGF-1)、瘦素与胎儿生长发育的关系,分析小于胎龄儿及宫内发育迟缓儿的原因。方法血清及脐血瘦素水平测定采用放射免疫法(RIA),血清及脐血IGF-1水平测定采用免疫放射法(IRMA),比较两组孕妇血清及脐血中IGF-1、瘦素水平。结果 FGR组孕妇血清瘦素为(24.56±2.37)ng/L,IGF-1为(136.45±10.46)ng/L;脐血瘦素为(5.68±0.34)ng/L,IGF-1为(66.37±3.42)ng/L,与对照组[(25.01±1.96)ng/L]比较两组孕妇血清瘦素比较无统计学意义(P>0.05)。FGR组脐血瘦素水平明显低于对照组[(9.25±1.22)ng/L],差异有统计学意义(P<0.05)。FGR组血清及脐血IGF-I水平低于对照组,两组比较有统计学意义(P<0.01)。结论瘦素与IGF一1在胎儿宫内生长和发育过程中起重要的调节作用,可评价胎儿的生长发育及营养状态。     

慢性盆腔炎的治疗进展

慢性盆腔炎是指女性内生殖器及其周围结缔组织、盆腔腹膜发生的炎症,经久不愈反复发作.现代医学认为盆腔炎是因产后或流产后感染、宫腔内手术操作后感染、经期卫生不良、感染性传播性疾病、邻近器官炎症蔓延、宫内节育器等原因所致.由于本病是妇科常见病、多发病,好发于育龄期妇女,且病程长、治愈率低,近年来发病率逐渐上升.目前无确切有效的治疗方法,因而就目前的治疗进展概述如下.     

零距离接触 让我感受到了农民对健康的真实期盼

本想在全省深化拓展“树新形象、创新业绩”主题实践活动电视电话会议的第二天开展下村蹲点调研,突发的公共卫生事件却延缓了我的行程。4月5日,我带领3名同志,自带铺盖等生活用品,到磐安县玉山镇马塘村开展蹲点调研。农民健康体检和新型农村合作医疗制度是这次调研的主题。     

双靶向组织特异性HSV-tk/GCV抗瘤系统的构建及体外效应研究

目的：构建高靶向性基因转移及表达系统，并研究其介导HSVtk/GCV自杀基因系统对肝癌细胞的体外杀伤作用。方法： 通过重组技术分别构建antiTfR ScFvGAL4融合蛋白表达载体ScFvGAL4pET28a及含AFP启动子、GAL4特异性识别序列（GAL4rec）的HSVtk真核表达载体pEBAF/tkGAL4rec。IPTG诱导后，利用受体介导内吞作用介导pEBAF/tkGAL4rec质粒转染表面均高表达TfR的人肿瘤细胞株HepG2，SMMC7721及A549。潮霉素筛选后，MTT法检测GCV对它们的杀伤作用。结果：双酶切鉴定、SDSPAGE电泳及测序分别证明antiTfR ScFvGAL4融合蛋白及重组pEBAF/tkGAL4rec真核表达质粒构建成功。体外杀伤实验中，高分泌AFP(845 ng/ml) 的HepG2/tk细胞对GCV很敏感，且抑制率与GCV浓度及作用时间呈正相关；而低分泌AFP(2 ng/ml)的SMMC7721/tk细胞对GCV低度敏感；不分泌AFP 的A549/tk细胞则不敏感。结论：双靶向组织特异性HSVtk/GCV抗瘤系统构建成功，并显示出很好的靶向性。     

实验动物微生物、寄生虫抽样调查及分析

目的 监控实验动物微生物、寄生虫质量.方法 细菌检测:常规培养、生化鉴定,免疫荧光试验(IFA)查抗体.病毒检测:酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫酶试验(IEA)、免疫荧光试验(IFA)、血凝试验(HA)、血凝抑制试验(HAI)方法检测抗体.真菌检测:常规培养、镜检.寄生虫检测:涂片镜检、间接血凝试验(IHA)方法查抗体.结果 五年来,SPF级动物检出了绿脓杆菌、嗜肺巴斯德菌、金黄色葡萄球菌、鞭毛虫,另外,泰泽病原体、小鼠细小病毒(MVM),小鼠仙台病毒(M-SC)抗体阳性.清洁级动物检出了蠕虫,且泰泽病原体、大鼠仙台病毒(R-SC)、小鼠仙台病毒(M-SV)、小鼠肝炎病毒(MHV)抗体阳性.普通级动物检出了志贺菌、皮肤病原真菌、体外寄生虫、弓形虫,同时检出兔出血症病毒(RHDV)、犬细小病毒(CPV)、犬瘟热病毒(CDV)、犬肝炎病毒(ICHV)未达抗体保护效价,犬布鲁杆菌、猕猴疱疹病毒Ⅰ型(BV)抗体阳性.不同生产企业动物质量差异很大,有的动物合格率达100%,有的则同一动物有多种病原感染.结论 实验动物微生物、寄生虫质量控制有待加强.     

沈阳市集中屠宰后市场鲜猪肉二次污染监测与分析

1998年7月至2000年7月沈阳市工厂化集中屠宰生猪以来共屠宰生猪270万头,日均3700头,检出病害猪肉10670头,平均14.8头/日,全部进行了无害化处理,由于白条猪肉运输、销售环节不科学造成白条猪肉二次污染严重,感官指标符合鲜猪肉标准,但菌落总数和大肠菌群检测结果为次鲜肉,应引起各级政府和有关部门的重视。     

医学微生物学实验教学体会

实验课教学是医学微生物学教学过程中的关键环节,在培养学生学习能力、实践能力和创新能力中发挥着重要作用。从提高教师素质,加强课前准备,创新教学理念,综合多元化教学模式,改变评估体系,重视课后反馈等方面阐述几点体会。