疏肝活血中药对骨髓间充质干细胞移植心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的观察疏肝活血中药对骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植心肌缺血再灌注损伤(IRI)大鼠心肌细胞凋亡的影响,探讨其保护心肌的作用机制。方法制备心肌IRI模型,分离、培养BMSCs,且移植于IRI大鼠,SD大鼠随机分为假手术组、IRI组、BMSCs组、疏肝活血中药+BMSCs组(联合组)。联合组以疏肝活血中药灌胃,其余各组灌胃等量生理盐水,4周后取心肌组织,采用TUNEL法和免疫组化法检测心肌细胞凋亡及心肌细胞Bcl-2和Bax蛋白表达。结果与IRI组比较,BMSCs组和联合组心肌细胞凋亡、Bax蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高(P0.01);与BMSCs组比较,联合组心肌细胞凋亡指数、Bax蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高(P0.05,P0.01)。结论疏肝活血中药对BMSCs移植IRI大鼠心肌细胞凋亡的抑制具有促进作用,进而保护心肌细胞。     

浅谈防盲治盲及儿童低视力的防治

目的探讨儿童盲、低视力和曲光不正预防、治疗问题,从而提高儿童身体素质、生活质量,减轻家庭、社会的经济负担。方法以理论为基础,以社会现象为依据,从三个方明逐一论述。     

神经内科重症监护室护理风险管理

随着科学技术和医学的发展,重症监护病房的优越性已被社会公认,并成为医院现代化的重要标志之一[1]。神经内科重症监护室（NCU）是以救治各类神经系统重症病人为主的诊疗     

丹参通络解毒汤对冠心病不稳定型心绞痛患者黏附分子的影响

目的观察丹参通络解毒汤对瘀热壅毒、毒损心营证不稳定型心绞痛(unstanble angina,UA)患者的血脂以及血清细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)的影响。方法选择瘀热壅毒、毒损心营型冠心病不稳定型心绞痛患者60例。将60例患者随机分为两组,对照组30例给予常规西药治疗,观察组30例在对照组治疗基础上加服丹参通络解毒汤治疗,观察两组治疗2个月后的中医证候积分、心电图疗效、心绞痛疗效以及治疗前后血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、ICAM-1和VCAM-1的水平变化。结果观察后,观察组中医证候积分心电图疗效,心绞痛疗效均较对照组高,差异有统计学意义(P0.05)。治疗后两组TC、TG、LDL-C、ICAM-1和VCAM-1水平较治疗前降低,HDL-C水平较治疗前增加,且观察组血脂、黏附因子水平改善程度优于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论丹参通络解毒汤治疗瘀热壅毒,毒损心营型冠心病不稳定型心绞痛疗效确切,其作用机制可能与调节血脂代谢、降低ICAM-1和VCAM-1水平有关。     

HLA-A*0201-BSP融合基因的构建与原核表达

克隆表达可生物素化的HLA-A＊0201的重链胞外区是制备HLA-A＊0201-肽四聚体的先决条件。本研究构建重组HLA-A＊0201-BSP融合基因的表达载体，以制备HLA—A2四聚体。根据已报道的序列设计特异引物，利用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法从已鉴定为HLA—A＊0201基因型的健康人白细胞中克隆HLA—A＊0201重链胞外区的基因．拼接上依赖生物素-蛋白连接酶（biotin-protein ligase，BirA）的可生物素化序列（BirA substrate peptide．BSP），构建HLA—A＊0201-BSP的原核表达载体，在大肠杆菌DH50t中进行表达。结果表明：成功扩增出HLA—A＊0201-BSP融合基因并测序证实，构建的pBV220-HLA—A＊0201-BSP可在大肠杆菌DH50t中高效表达HLA—A＊0201-BSP融合蛋白．表达量占菌体总蛋白的28％，以包涵体的形式表达，经洗涤、变性后，以Sepharcyl S-300HR（S-300）柱层析纯化，纯度可达90％以上。结论：获得了高效表达HLA—A＊0201-BSP的大肠杆菌工程菌株，建立了简便有效的包涵体纯化方法，为制备HLA-A＊0201-肽四聚体奠定了基础。     

两种方法完成护理执行单的效率研究

为探讨护理执行单系统执行医嘱的效率,采用完全随机设计的实验研究方法对应用护理执行单电子系统与传统的手工方法完成护理执行单进行了效率对比研究.现将结果报道如下.     

金匮肾气丸防治老年病的研究纂要

金匮肾气丸为补肾名方,出自东汉医家张仲景所著<金匮要略>,由干地黄、山茱萸、山药、泽泻、丹皮、茯苓、桂枝、附子组成.本方在<金匮要略>中共出现5次,分别用于治疗虚劳、脚气、消渴、痰饮、转胞等病证.近年来越来越多学者应用该方防治老年病均取得了明显的临床疗效,现在综述如下:     

酵母三杂交系统研究进展

许多生物过程是通过大分子如蛋白-蛋白，核酸-蛋白的相互作用来实现的，对这些大分子间的相互作用的研究有助于揭示生命过程的分子作用机制。酵母双杂交系统是研究蛋白间相互作用的有用工具，随着该系统的广泛应用，在此基础上发展了三杂交系统，研究包括三种成分在内的更为复杂的大分子相互作用，为蛋白-蛋白、RNA-蛋白和小分子-蛋白相互作用的研究提供了新的手段。     

人β2-微球蛋白基因的克隆与原核中的表达

本研究获取主要组织相容性复合体（MHC）Ⅰ类分子的轻链部分,即β2-微球蛋白（β2m）以制备MHC Ⅰ类分子-肽四聚体.根据已报道的序列设计特异引物,利用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法从人白细胞中克隆β2m的基因,并构建β2m的原核表达载体,在大肠杆菌中进行表达.结果显示：构建的编码成熟β2m的pET-β2m可在大肠杆菌BL21（DE3）中高效表达β2m,表达量占菌体总蛋白的32%,β2m以包涵体的形式表达,经洗涤、变性后,以Sephacryl S-200HR（S-200）柱层析纯化,纯度可达95%以上,纯化产物采用稀释法复性.Western blot分析表明,该蛋白具有与抗人天然β2m抗体反应的特性.结论：获得了高效表达人β2m的大肠杆菌工程菌株,建立了简便有效的β2m包涵体纯化、复性方法,为制备MHC Ⅰ类分子-肽四聚体奠定了基础.     

丹参通络解毒汤联合骨髓干细胞移植对急性心肌梗死大鼠心肌纤维化的影响及其机制

目的探讨丹参通络解毒汤联合骨髓干细胞移植对急性心肌梗死(AMI)大鼠心肌纤维化的影响及作用机制。方法采用全骨髓贴壁法结合密度梯度离心法分离和培养骨髓间充质干细胞(BMSCs)。经结扎冠状动脉的左前降支(LAD)建立心梗模型。大鼠随机分为假手术组、AMI模型组、BMSCs移植组、中药组(丹参通络解毒汤组)、联合组(丹参通络解毒汤+BMSCs移植组)。除假手术组外其余组造模,术后中药组与联合组分别灌胃丹参通络解毒汤,其余各组用等量生理盐水灌胃,1次/d,连续14 d。Masson染色观察心肌组织胶原含量,ELISA法测定血清Ⅲ型前胶原末端肽(PⅢP)、Ⅳ型前胶原末端肽(PⅣP)、一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)浓度。蛋白印迹法检测心肌组织中内皮细胞蛋白c受体(EPCR)和血栓调节蛋白(TM)的表达水平。采用SPSS 19.0统计软件对数据进行分析。结果与假手术组比较,各组大鼠EPCR及TM蛋白表达下降,NO水平降低,ET-1、PⅢP、PⅣP水平升高,心肌有不同程度的胶原纤维产生,差异有显著性(P0.01);与AMI模型组比较,BMSCs移植组、中药组和联合组EPCR和TM蛋白表达及NO水平均显著上升,ET-1、PⅢP及PⅣP水平均降低,胶原纤维产生均减少,差异具有显著性(P0.01);与BMSCs移植组比较,中药组EPCR和TM蛋白表达及NO水平均上升,ET-1、PⅢP及PⅣP水平均降低,胶原纤维产生均减少,差异具有显著性(P0.01);与中药组比较,联合组EPCR和TM蛋白表达及NO水平均上升,ET-1、PⅢP及PⅣP水平均降低,胶原纤维产生均减少,差异具有显著性(P0.01)。结论丹参通络解毒汤联合BMSCs移植能够抑制心肌纤维化产生,其机制可能与上调AMI大鼠心肌EPCR及TM蛋白表达,保护血管内皮功能有关。