MultiSite Gateway技术在疟原虫条件性基因打靶载体快速构建中的应用

目的构建可条件性敲除约氏疟原虫ebl基因的打靶载体。方法以约氏疟原虫基因组DNA为模板,PCR扩增EBL-3U和EBL-5U1、EBL-5U2+EBL.orf同源臂片段,利用MultiSite Gateway技术,完成若干DNA片段的定性重组,构建打靶载体pCHD-EBL-RFT,并对质粒酶切和测序鉴定。PCR扩增约氏疟原虫UIS4-5U片段,置换质粒PbUIS4/flp中原有同源臂,并通过位点特异突变技术,获取AvrII和NheI两种线性化位点,构建插入载体PyUIS4/flp。结果构建出打靶载体pCHD-EBL-FRT和PyUIS4/flp,酶切鉴定和测序分析正确。结论将MultiSite Gateway技术成功地用于疟原虫条件打靶载体的构建,建立了以MultiSite Gateway技术为基础的打靶载体构建体系。     

胎儿右桡骨拇指缺如并左侧多囊性发育不良肾超声表现一例

<正>孕妇32岁,孕2产1,妊娠21周,查体:宫高14cm,胎心率140次/min。超声检查:胎头位于耻骨上,枕右前位,双顶径5.0cm,侧脑室对称,脊柱排列整齐。四腔心可见,胎心率136次/min,搏动规律。     

某校大学生蠕形螨感染影响因素分析

目的 调查某校集体生活大学生蠕形螨的感染现状并进行影响因素分析。方法 通过透明胶纸法检查在校集体生活大学生面部蠕形螨,并对调查对象的皮肤类型、来源地、民族、高或初中住校、毛巾和脸盆共用、化妆品共用、洗面奶每周的使用次数、床上用品换洗间隔时间等因素进行问卷调查。结果 共调查948名在校大学生,蠕形螨感染人数516名,感染率为54.43%。来源地为城市的学生感染率58.04%,高于来源地为农村的51.45%(P<0.05);少数民族的感染率54.55%,汉族54.43%,差异无统计学意义(P>0.05);高或初中曾住校者的感染率54.87%,不曾住校者53.72%,差异无统计学意义(P>0.05);脸盆、毛巾共用者蠕形螨的感染率59.64%,高于不共用者(50.89%,P<0.01);化妆品共用者蠕形螨的感染率68.75%,高于不共用者(53.67%,P<0.05);洗面奶每周的使用次数≥3者的感染率56.15%,洗面奶每周的使用次数<3者的48.61%,差异无统计学意义(P>0.05);床上用品换洗间隔时间>1个月者的感染率55.78%,床上用品换洗间隔时间≤1个月者的53.25%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 在校大学生蠕形螨感染率较高,蠕形螨感染受多种因素影响,其中皮肤类型、生活环境和卫生习惯等因素对蠕形螨的感染有较大影响。     

LFHP方案治疗晚期胃肠道肿瘤的疗效观察

目的观察LFHP方案治疗晚期胃肠道肿瘤的疗效及不良反应。方法32例晚期胃肠道肿瘤患者采用LFHP方案治疗：HCPT6mg／m^2静滴d1-5，CDDP6mg／m^2静滴d1-5，CF20mg／m^2静滴2h，d1-5，5-Fu0．5／m^2，恒速静滴8h以上d1-5，21天为一周期，至少2个周期后评价疗效。结果32例患者CR2例(6．30%)，PR13例(40．60%)，SD11例(34．5％)，PD6例(18．8％)，总有效率46．9％。KPS评分平均增加30分。不良反应：骨髓抑制29例(90．6％)，为Ⅰ～Ⅱ度，胃肠反应100％均为Ⅰ度，口腔溃疡8例(25．0％)，腹泻7例(21．9％)，Ⅱ度脱发10例(31．3％)，未见明显肝肾损害。结论LFHP方案治疗晚期胃肠道肿瘤，应用小剂量CF、CDDP增效5-Fu，与HCPT联合应用，有效率高，不良反应小，可用于临床晚期胃肠道肿瘤一线或二线治疗。     

阿司匹林和氯吡格雷对体外血小板黏附内皮细胞基质活性的影响及其机制研究

目的 体外研究阿司匹林和氯吡格雷对血小板黏附内皮细胞基质活性的影响及其机制,从理论上寻找两种药物联合效果优于单药的原因。方法 于2013年在第三军医大学动物中心购买健康雌性SD大鼠42只,采用随机数字表法,将SD大鼠分为阿司匹林组（8只）、氯吡格雷组（8只）、阿司匹林联合氯吡格雷组（联合组,8只）、对照组（8只）以及用于原代细胞分离培养10只。分离培养原代大鼠血管内皮细胞,利用50 μg/ml氧化修饰低密度脂蛋白（ox-LDL）建立受损血管内皮细胞模型并采用100 mg/kg阿司匹林、10 mg/kg氯吡格雷、100 mg/kg阿司匹林联合10 mg/kg氯吡格雷以及200 μl蓖麻油制作内皮细胞基质板|血浆血小板分离制备前3 d,阿司匹林组喂养阿司匹林100 mg·kg-1·d-1,氯吡格雷组喂养氯吡格雷10 mg·kg-1·d-1,联合组喂养阿司匹林100 mg·kg-1·d-1,氯吡格雷10 mg·kg-1·d-1,对照组喂养蓖麻油200 μl/d。采用ELISA法检测黏附内皮细胞基质上的血小板数量|采用蛋白质免疫印迹法检测阿司匹林和氯吡格雷对血管内皮细胞蛋白血栓调节蛋白（TM）、氧化型低密度脂蛋白受体1（LOX-1）、CD40表达的影响。结果 经阿司匹林和氯吡格雷处理的血小板对内皮细胞黏附活性的影响：4组50、100、150、200 μl血小板黏附内皮细胞基质活性比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）,其中氯吡格雷组和联合组50、100、150、200 μl血小板黏附内皮细胞基质活性均低于对照组和阿司匹林组,阿司匹林组150 μl血小板黏附内皮细胞基质活性低于对照组（P＜0.05）。血小板黏附经阿司匹林和氯吡格雷处理的内皮细胞基质活性的影响：4组50、100、150、200 μl血小板黏附内皮细胞基质活性比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）,其中联合组50、100、150、200 μl血小板黏附内皮细胞基质活性分别低于对照组、阿司匹林组和氯吡格雷组（P＜0.05）。蛋白质免疫印迹法显示,阿司匹林和氯吡格雷均能抑制由ox-LDL引起的TM表达的减少。ox-LDL能明显诱导血管内皮细胞LOX-1表达,阿司匹林能明显抑制由ox-LDL引起的LOX-1和IL-6的表达|而氯吡格雷则能明显抑制内皮细胞CD40的表达。结论 阿司匹林和氯吡格雷均能从上调TM和抑制炎性因子两方面降低血小板对内皮细胞基质的黏附作用。但两者联合更能抑制由ox-LDL引起的炎性因子的表达,降低血小板对内皮细胞基质的黏附。     

不同剂量白酒对大鼠心肌影响的研究

目的 观察不同剂量白酒对大鼠心肌损伤标志物及心肌组织的影响并探讨其机制,为临床防治乙醇性心肌病提供理论基础和实验依据.方法 140只2～3月龄健康SD大鼠按随机排列表随机分为对照组及不同剂量白酒灌胃模型组[A组0.8 ml/(kg·d)、B组1.6 ml/(kg·d)、C组2.4 ml/(kg·d)、D组3.2 ml/(kg·d)、E组4.0 ml/(kg·d)、F组4.8 ml/(kg·d)],每组20只.对照组每日给予10 ml/(kg·d)生理盐水灌胃,其余模型组分别给予相应浓度白酒灌胃,每周称重1次,灌胃6次,连续灌胃16周.16周后每只大鼠禁食12 h取颈总静脉血检测肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白T(cTnT);处死大鼠取心肌组织进行病理学检查,同时取大鼠心肌组织用TUNEL法检测细胞凋亡相关蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3的表达水平.结果 A、B组与对照组相比,CK-MB、cTnT水平差异均无统计学意义(均P＞0.05).C、D、E、F组与对照组及A、B组相比,CK-MB、cTnT水平明显升高,差异均有统计学意义(均P＜0.01).对照组及A～F组大鼠的Caspase-3水平(吸光度值)分别为(93.76±14.76)、(92.49±15.39)、(93.19±13.36)、(94.99±14.33)、(196.67±25.16)、(239.86 ±20.99)、(246.66±23.16).D、E、F组分别与对照组、A、B、C组相比,差异均有统计学意义(均P＜0.05).A、B、C组与对照组相比,Caspase-3水平均差异无统计学意义(P＞0.05).结论 适量[0.8～1.6 ml/(kg·d)]饮酒不会引起心肌损伤标志物升高及细胞病理学改变,但过量乙醇摄入可导致心肌酶谱变化、Caspase-3表达增加、心肌细胞凋亡和坏死.

Abstract：

Objective To observe the influence of different doses of alcohol on rat cardiac tissue, to establish a chronic animal model and to explore the prevention and treatment of alcoholic heart muscle disease. Methods Totally 140 SD rats were randomly divided into 7 groups: the normal control group and the different doses lavage alcohol model group. Four months later, Jugular Venous blood was immediately taken from each rat to detect creatine kinase isozymes (CK-MB) , cardiac troponin T (cTnT). The myocardial tissue in vivo from rat was taken for pathological examination to observe the impact of alcohol on them. The expression of apoptosis-related protein product Caspase-3 in the myocardial cells was detected. Results The CK-MB, cTnT of A, B groups had no significant change, but CK-MB, cTnT levels in C, D, E, F groups were significantly increased (P＜0.01). Myocardial edema, myocardial cell degeneration and necrosis in model D, E, F groups had obvious changes, but the myocardial pathological in model A, B, C groups and the control group had significant changes. Caspase-3 expression rates of model of A, B, C groups had no significant differences, but Caspase-3 expression rate in model of D, E, F groups was obviously higher than that in A, B, C groups and control group (P ＜ 0.05). Conclusions Low dose of alcohol does not cause the increase of cardiac markers and the change of cytopathology. However, excessive alcohol consumption can lead to the increase of myocardial enzymes and Caspase-3 expression, furthermore, the myocardial cell apoptosis or necrosis.     

阴式子宫肌瘤剔除术56例临床观察

目的探讨阴式子宫肌瘤剔除术用于子宫肌瘤治疗的临床效果。方法入组符合子宫肌瘤剔除术适应证的患者95例,随机分为2组,观察组56例行阴式子宫肌瘤剔除术,对照组39例行腹式子宫肌瘤剔除术。比较2组的术中和术后临床指标。结果观察组与对照组术中的手术时间、术中出血量、剔除子宫肌瘤数量和质量比较差异无统计学意义(P均>0.05)。观察组术后体温恢复正常时间、肛门排气时间、住院时间均短于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论阴式子宫肌瘤剔除术与腹式子宫肌瘤剔除术比较具有手术效果好、手术时间短、腹腔干扰小、术后恢复快等优点,值得临床推广应用。     

参芪扶正汤联合阿帕替尼治疗晚期结肠癌临床研究

目的：观察参芪扶正汤联合阿帕替尼治疗晚期结肠癌的效果。方法：将82 例脾气虚型晚期结肠癌患者分为治疗组与对照组各41 例。2 组患者均接受护肝、止吐以及营养支持等对症治疗,口服甲磺酸阿帕替尼片,治疗组加服参芪扶正汤治疗。2 组均连续治疗4 周。比较2 组治疗前、治疗4 周后的中医证候积分、大肠癌患者生命质量测定量表（FACT-C） 评分、Karnofsky（KPS） 评分及外周血T 淋巴细胞CD3+、辅助性T 细胞CD4+、细胞毒性T 细胞CD8+水平及CD4+/CD8+比值,比较2 组的疗效与不良反应发生率。结果：治疗4 周后,治疗组临床疗效总有效率高于对照组（P＜0.05）。2 组脘腹胀满、不欲食、大便溏稀、肢体怠倦及神疲乏力积分均较治疗前降低（P＜0.05）,治疗组5 项证候积分均低于对照组（P＜0.05）。2 组CD3+、CD4+水平及CD4+/CD8+比值均较治疗前升高,CD8+水平均较治疗前降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）。治疗组CD3+、CD4+水平及CD4+/CD8+比值均高于对照组,CD8+水平低于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。2 组FACT-C 评分及KPS 评分均较治疗前升高,差异均有统计学意义（P＜0.05）。治疗组FACT-C 评分、KPS 评分均高于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。2 组不良反应发生率比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：参芪扶正汤联合阿帕替尼治疗可显著缓解脾气虚型晚期结肠癌患者的临床症状,对免疫功能的改善有显著效果,并能提高患者的生活质量,有较高的安全性和较好的疗效。     

饮酒对心脏功能影响的研究进展

酒精是一种日常生活中常见的饮料和药物,随着饮用酒的种类和质量不断地提升,其口益成为人们生活中不可缺少的"润滑剂".饮酒对人体可产生有益和有害的双重作用.适度饮用,可以减轻疲劳,增加愉快的感觉,尤其是减少冠心病、动脉粥样硬化的发病率,并降低由此导致的死亡率.但是,过量饮酒甚至嗜酒,能够引起许多系统的病变.