PIWI相互作用RNA:结直肠癌诊断和预后的生物标志物

PIWI相互作用RNA（PIWI-interacting RNA,piRNA）是一种新型小分子非编码RNA,它通过与PIWI蛋白形成复合体发挥调节作用,主要存在于哺乳动物（人类、小鼠等）的干细胞与生殖细胞中。越来越多的研究表明,piRNA可以通过表观遗传改变来调节基因表达,包括转座子沉默、DNA甲基化和染色质修饰等,在肿瘤的发生中起关键性作用。因此,piRNA具有作为生物标志物的可能,为癌症诊断与预后监测提供新的方法。文章综述了piRNA在结直肠癌中的生物学作用,为结直肠癌的发病机制和寻找其有效生物标志物的研究工作提供线索。     

多重响应的单分散聚(N-异丙基丙烯酰胺-co-丙烯酸)纳米水凝胶的制备及性能表征

以N-异丙基丙烯酰胺(NIPAM)与丙烯酸(AA)为单体,在水相中通过乳液聚合法制得具有温度、pH双重响应的单分散聚(N-异丙基丙烯酰胺-co-丙烯酸)(P(NIPAM-co-AA))纳米水凝胶。利用动态光散射仪(DLS)、原子力显微镜(AFM)和傅里叶红外光谱仪(FT-IR)对纳米水凝胶的尺寸、形貌和化学组成进行了表征,讨论了单体含量和乳化剂含量对凝胶粒径和多分散指数(PDI)的影响,同时探究了纳米水凝胶的温敏性和pH敏感性。结果表明:当AA为单体总物质的量分数的20%、乳化剂用量为0.05 g时,制得的球形纳米水凝胶形态均匀规整,水合直径为403 nm,PDI仅为0.033,且对温度和pH具有双重敏感,尤其在pH为4~6时,响应极为明显。     

CDK4基因突变及其胰蛋白酶-抗胰蛋白酶失衡在胃癌发生中的作用

目的探讨胃癌患者中细胞周期蛋白依赖激酶基因(cell cycle-dependent protein kinase 4,CDK4)突变及其胃癌组织CDK4表达和血清胰蛋白酶-抗胰蛋白酶的失衡情况。方法应用PCR法扩增25例胃癌患者及62名健康体检者的CDK4基因外显子、启动子和侧翼序列,产物纯化后直接测序,分析不同基因型胃癌患者的临床特征,取患者的癌组织、癌旁组织和远离癌的正常组织做CDK4免疫组化,同时应用ELISA法检测同一时期患者及其对照的血清胰蛋白酶和α-抗胰蛋白酶水平,分析其差异性。结果在胃癌患者中发现CDK4基因3号外显子存在高频突变,其中5例患者为c.110 TA突变,突变造成p.M37T;免疫组化显示,癌组织高表达CDK4,癌旁组织呈弱表达,远离癌的正常组织呈阴性;胃癌患者的血清胰蛋白酶浓度(33.98±11.24)ng/ml显著高于正常对照组(15.96±18.23)ng/ml,而血清抗胰蛋白酶浓度与正常对照组相比,差异无统计学意义(P0.05)。结论 CDK4基因突变及其高表达与胃癌发生密切相关,机体内胰蛋白酶-抗胰蛋白酶的失衡可能是胃癌发病的重要原因。     

包覆紫外线吸收剂奥克立林的纳米胶囊的制备及其性能

以二甲基丙烯酸乙二醇酯（EGDMA）为壁材单体、2-氰基-3,3-二苯基丙烯酸异辛酯（奥克立林,OCT）和辛酸/葵酸三甘油酯（GTCC）为芯材、过硫酸铵（APS）为引发剂,采用自由基界面聚合法制备防晒纳米胶囊。利用扫描电镜（SEM）、透射电子显微镜（TEM）、纳米粒度与电位分析仪（Nano-ZS）、红外光谱仪（FT-IR）、紫外线透过率分析仪等对防晒纳米胶囊的形貌、核-壳结构、粒径分布、化学组成和防晒性能进行表征。利用CCK-8法探究防晒纳米胶囊的生物相容性。结果表明：制得的防晒纳米胶囊为规整的球形,具有明显的核-壳结构,平均粒径为318 nm,多分散系数为0.293;与未包覆OCT/GTCC的相比,防晒纳米胶囊具有更好的防晒性能,且降低了OCT对皮肤的刺激性,具有良好的生物相容性。     

双氯灭痛对小鼠肝脏氧化应激的诱导作用

目的 研究双氯灭痛(diclofenac)单次给药不同剂量和给药后不同时间对小鼠肝脏氧化应激的诱导作用。方法 成年雄性ICR小鼠单次灌胃给药(50、100、200和300mg／kg)，观察肝脏脂质过氧化、谷胱甘肽(GSH)和金属硫蛋白(MT)含量等指标的变化。结果 给药后的小鼠肝脏脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量显著升高，呈明显的剂量-效应关系和时间-效应关系，300mg／kg组的最高值为对照组的1．9倍。肝脏还原型谷胱甘肽(CSH)含量随染毒剂量加大和时间延长明显下降，最低值为对照组的34％。给药后肝脏MT含量明显升高，50mg／kg组的最高值达对照组的3．9倍。相关分析显示MDA与MT含量呈正相关。结论 双氯灭痛能诱导小鼠肝脏发生氧化应激损伤。MT诱导可能是对抗氧化损伤的保护机制之一。     

浅谈中医护理在医院中的作用

中医护理是祖国医学的重要组成部分,是在中医基本理论下的护理工作.辨证论治是中医护理的主要依据,辨证施护是中医护理的特点.中医一贯注重护理,主张"三分治疗,七分护理".     

MBP-1分子真核表达载体的构建及其在食管癌细胞株Eca109中的高表达

目的:初步探讨MBP-1的分子功能.方法:通过PCR扩增获得MBP-1基因编码序列,将其定向插入质粒pcDNA3.1(+)构建重组质粒pcDNA3.1-mbp-1,重组质粒转染体外培养的食管癌Eca109细胞株,Western-blotting检测MBP-1在食管癌细胞中的表达.结果:筛选出分子量较大的重组质粒,酶切分...     

白桦酯醇诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡及作用机制的研究

目的:研究白桦酯醇(betulin)体外诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的作用,并探讨其可能的作用机制.方法:以不同浓度的白桦酯醇处理HeLa细胞,采用MTT法检测白桦酯醇作用24、48和72 h时对细胞生长抑制的情况;倒置相差显微镜下观察对HeLa细胞形态学变化的影响;TUNEL法检测对细胞凋亡的影响;FCM检测细胞的凋亡率;蛋白质印迹法检测对HeLa细胞中caspase-3和多聚ADP-核糖聚合酶[poly (ADP-ribose) polymerase,PARP]蛋白表达的影响.结果:不同浓度的白桦酯醇能抑制HeLa细胞的增殖,且呈时间-剂量依赖关系(P＜0.01);倒置相差显微镜下观察结果显示,白桦酯醇处理24 h后,细胞体积缩小,核固缩,细胞的折光性减弱,且随着白桦酯醇浓度的增加上述形态变化增强,呈典型的凋亡形态学改变;TUNEL法及FCM检测结果显示,经不同浓度白桦酯醇处理24 h后,HeLa细胞发生凋亡,且随药物浓度的增加凋亡率明显增高;蛋白质印迹法检测结果显示,随加药浓度的增加,HeLa细胞中caspase-3和PARP蛋白表达均呈不同程度的上调.结论:在一定的浓度范围内,白桦酯醇可在体外抑制Hela细胞增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与其上调caspase-3及PARP蛋白的表达有关.     

苯并(a)芘对金属硫蛋白基因敲除小鼠免疫功能的抑制

目的:观察苯并(a)芘[benzo(a)pyrene, B(a)P] 对金属硫蛋白(metallothionei n, MT)基因敲除的转基因小鼠[MT(-/-)]免疫功能的影响 .方法:选用MT(-/-)小鼠和野生型小鼠[MT(+/+)]进行对照,50 mg·kg -1体重的B(a)P 一次腹腔注射染毒后,检测动物对绵羊红细胞(sheep red blood ce lls, SRBC)的体液和细胞免疫功能变化.体液免疫指标为抗体形成细胞(plaque formation cells, PFC)数量.细胞免疫功能指标为迟发型变态反应(delayed-type hypersensitivi ty, DTH)的动物足跖厚度变化 .结果:MT(-/-)小鼠的脾脏重量在S RBC刺激后有明显增加,但在B(a)P染毒后被抑制.B(a)P染毒使MT(-/-)小鼠脾脏的的PFC 数明显减少,PFC抑制率达40.4%;而MT(+/+)小鼠没有观察到上述改变.B(a)P染毒对MT (-/-) 小鼠和MT(+/+)小鼠的细胞免疫反应的DTH未见明显影响.MT(-/-)小鼠和MT(+/+)小鼠的胸腺重量在B(a)P 染毒后都有减轻.结论:MT(-/-)小鼠的体液免疫功能更易被B(a)P抑制.提示MT具有保护小鼠不受B(a)P体液免疫损伤的功能.     

血清β-hCG、PCT、CRP及分泌物GBS预测胎膜早破孕妇的宫内感染的临床价值

目的探讨血清β-人绒毛膜促性腺激素(β-h CG)、降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)和分泌物B族链球菌(GBS)在预测胎膜早破孕妇的宫内感染应用价值。方法选择2017年3月-2018年3月浙江新安国际医院收治的100例胎膜早破孕妇为研究对象,分析宫内感染情况。所有研究对象均于产前抽取外周静脉血,分离血清,采用放射免疫法测定β-h CG含量,采用免疫色谱检测法测定PCT含量,采用免疫比浊法测定CRP含量;采用实时荧光定量PCR仪检测分泌物GBS。结果胎膜早破孕妇100例中,宫内感染18例,感染率为18.00%。宫内感染组血清β-h CG、PCT和CRP含量高于宫内未感染组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。宫内感染组分泌物GBS阳性率高于宫内未感染组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。β-h CG+PCT+CRP+分泌物GBS联合诊断宫内感染灵敏度和特异度高于各单项检测。结论血清β-h CG、PCT、CRP和分泌物GBS在预测胎膜早破孕妇的宫内感染具有重要诊断价值,联合诊断具有较高的灵敏度和特异度,具有重要临床指导价值。