大鼠脑血肿周围组织半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达变化与尼莫地平的影响

目的：观察脑出血后血肿周围半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的表达。及尼莫地平对其的影响。方法：实验于2004—07在大连医科大学中心实验室进行。取120只SD雄性大鼠随机分为3组：①尼莫地平组（n=50）：尾壳核注射自体股动脉血50μL复制脑出血模型，造模即刻腹腔注射尼莫地平1．6mg／kg（即8μL／g），以后每天1次。②模型组（n=50）：同前造模，术后腹腔注射等量生理盐水。③假手术组（n=20）：手术，但进针人尾壳核后不注血。各组分为术后6，24，48，72h、5d 5个时间点。造模动物醒后进行Bederson评分，评估其行为和神经功能缺陷（0—3分。评分越高，神经功能缺陷越重，评分≥2分为造模成功）。人组动物在以上5个时间点进行Bederson评分后，麻醉状态下处死取脑，经尾壳核行冠状切片，行免疫组化测定半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达。结果：80只大鼠进入结果分析。①Bederson评分：模型组、尼莫地平组大鼠醒后迅速出现偏瘫，24h后评分趋于稳定，至72h之间评分最高，然后逐渐下降，5d时仍有体征。模型组、尼莫地平组各时间点评分均高于对照组（P〈0．01），尼莫地平组术后48，72h评分低于模型组（P〈0.05）。②血肿周围组织半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达：假手术组进针侧脑组织表达很少，模型组6h后即有表达，24h达高峰，持续72h后逐渐下降，5d后仅有少量表达；尼莫地平组动态变化趋势与模型组相同，但各时间点的数值均较低，尤其是术后24～72h（P〈0．01）。结论：①脑出血后血肿周围组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达升高，提示其与脑出血血肿周围组织损伤有一定关系。②尼莫地平降低脑出血后血肿周围组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达，从而减轻细胞凋亡程度，对神经细胞起到保护作用，降低神经功能缺陷。     

微血流成像与能量多普勒超声在显示活动性强直性脊柱炎骶髂关节血流中的对比研究

目的比较微血流成像(SMI)技术与能量多普勒超声(PUDS)技术显示活动性强直性脊柱炎(AS)患者骶髂关节滑膜血流的丰富程度及显示率的差异,探讨SMI评估活动性AS患者骶髂关节炎的临床价值。方法分别应用SMI和PDUS两种血流模式检查30例活动性AS患者(病例组)和30例健康志愿者(对照组)左右两侧各60个骶髂关节,比较两组滑膜血流丰富程度及血流显示率的差异。应用Kappa检验分析两种模式诊断结果的一致性;绘制受试者工作特征(ROC)曲线计算两种血流模式的诊断效能。结果 SMI和PUDS对病例组的血流显示率比较差异有统计学意义(96.7%vs.86.7%,P=0.048);病例组与对照组的血流丰富程度在两种血流模式中比较差异均有统计学意义(均P0.05)。病例组以2～3级多血流为主,而对照组以0～1级少血流为主;对照组中两种血流模式对血流分级的一致性较好(Kappa=0.761,P0.001),病例组中的一致性一般(Kappa=0.686,P0.001)。SMI和PDUS诊断活动性AS患者骶髂关节炎的ROC曲线下面积分别为0.783、0.775,两者比较差异无统计学意义。结论应用SMI和PDUS观测血流丰富程度均可作为诊断AS患者骶髂关节炎及评估其活动性的重要参考依据,两者诊断效能相当,但SMI能够提高骶髂关节滑膜血流的显示率,上调血流级别,血流显示更加清晰,有助于更好地评估AS患者骶髂关节炎的活动性。     

辛伐他汀含药血清对兔血管平滑肌细胞增殖及原癌基因表达的作用及意义

目的　探讨辛伐他汀对体外培养兔血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖的影响及机制。方法　 16只雄性新西兰兔随机分为空白血清对照组和 3个不同剂量的辛伐他汀组 (5mg/kg、10mg/kg、15mg/kg) ,7d后采血并混合每组 4只兔血 ,无菌分离制备分组辛伐他汀含药血清。另采用内皮素 1刺激原代培养正常喂饲兔主动脉VSMC建立增殖模型 ,采用MTT及3 H TdR法检测分组辛伐他汀含药血清对VSMC增殖的作用 ,采用免疫细胞化学方法检测VSMCc myc、c fos抗原表达、RT PCR半定量检测c myc及c fosmRNA表达。结果　与对照组相比 ,不同分组辛伐他汀含药血清呈剂量依赖性抑制血管平滑肌细胞增殖 (P <0 0 5～ 0 0 1) ;免疫细胞化学及RT PCR结果表明 ,不同分组辛伐他汀含药血清呈剂量依赖方式抑制VSMCc fos和c mycmRNA表达(P <0 .0 5～ 0 .0 1)。结论　兔口服辛伐他汀后的血清抑制VSMC增殖 ,而辛伐他汀含药血清抑制c fos和c myc表达可能是其抑制VSMC增殖和抗动脉粥样硬化的机制之一。     

饮片规格对何首乌化学成分溶出和肝细胞毒性的影响

根据不同规格何首乌的煎煮成分对肝细胞毒性的差异,探讨何首乌饮片规格对其安全性的影响。该研究通过建立何首乌8种主要化学成分的含量测定方法,测定不同规格何首乌水煎液样品中各化学成分的含量,并以其对正常人L02肝细胞的抑制率作为肝毒性的评价指标,采用多元相关分析,试图找出与毒性相关的化合物。结果显示不同规格何首乌饮片成分溶出差异较大,何首乌打粉饮片的肝细胞毒性显著强于何首乌块状饮片;通过多元相关分析发现了3个与何首乌肝毒性密切相关的成分。结果揭示了饮片规格与何首乌肝细胞毒性的关系,其中粉状规格饮片毒性相对较大,有一定的肝损伤风险,应予以高度重视。     

心肌超声造影心动图联合斑点追踪成像评价2-氨基乙氧基二苯基硼酸酯对砷中毒大鼠心脏保护作用

目的 观察心肌超声造影心动图(MCE)联合斑点追踪成像(STI)评价2-氨基乙氧基二苯基硼酸酯(2-APB)对砷中毒大鼠心脏保护作用的价值。方法 将40只大鼠随机分为三氧化二砷(ATO)中毒后低剂量2-APB干预组(2-APB_L组)、ATO中毒后高剂量2-APB干预组(2-APB_H组)、单纯ATO中毒组(ATO组)、单纯2-APB干预组(2-APB组)及对照组,每组8只。对2-APB_L组、2-APB_H组及ATO组均经腹腔注射ATO 5 mg/kg体质量,对2-APB组和对照组注射等量生理盐水;之后分别以2、4、4 mg/kg体质量对2-APB_L组、2-APB_H组和2-APB组注射2-APB,对ATO组和对照组注射等量生理盐水;行MCE及STI检查,检测血清心肌损伤标志物及心肌肌浆网Ca²⁺-ATP酶(SERCA);最后行心肌病理学检查。观察组间各参数差异,并行相关性分析。结果 5组左心室短轴缩短率(LVFS)、左心室射血分数(LVEF...     

甘肃省鼠疫耶尔森菌规律成簇间隔短回文重复序列位点多态性分析及地区分布

目的 研究甘肃省鼠疫耶尔森菌（鼠疫菌）的规律成簇的间隔短回文重复序列（CRISPR）位点多态性及地区分布。方法 选取1962－2014年分离的203株鼠疫菌,培养并提取DNA。采用3对CRISPR引物对菌株DNA进行PCR扩增,对PCR产物进行测序。根据菌株CRISPR位点的间区序列种类和排列情况,确定菌株的基因型（类群）,采用BioNumerics 5.10软件进行聚类分析。结果 203株鼠疫菌发现有16种间区序列,包括YPa位点9种、YPb位点4种、YPc位点3种,发现新的间区序列a1''。共发现5个CRISPR基因簇,分别为Cb2、Ca7、Ca7''、CaΔ5''、Ca35''。不同的基因簇呈现区域性特征：Cb2主要分布在会宁县、平川区,Ca7主要分布阿克塞哈萨克族自治县;Ca7''主要分布在夏河县;Ca35''主要分布肃北蒙古族自治县、玉门市;CaΔ5''主要集中在肃南裕固族自治县。结论 CRISPR分子分型方法能够较好地区分甘肃省不同疫源地的菌株,且各基因簇呈现一定的区域性特征。对研究甘肃省鼠疫菌进化规律和人间疫情分子生物学溯源有一定意义。     

HIV-1慢性感染Jurkat细胞系的建立及其特性研究

目的建立艾滋病病毒Ⅰ型（HIV-1）慢性感染Jurkat细胞系,研究其生物学特性。方法参照文献方法改良,建立HIV-1ⅢB慢性感染Jurkat细胞系。其细胞系特性采用以下方法检测：光学显微镜观察细胞形态;流式细胞仪检测HIV-1ⅢB感染细胞的阳性率;噻唑蓝（MTT）法检测抗病毒药物对慢性感染细胞的毒性作用;酶联免疫吸附试验（ELISA）检测药物对慢性感染细胞中病毒复制的影响;合胞体形成方法检测药物对HIV-1ⅢB慢性感染细胞与正常细胞融合的阻断作用。结果成功建立了HIV-1慢性感染Jurkat细胞系（Jurkat/HIV-1ⅢB）,感染细胞阳性率〉90%。检测影响病毒复制各周期的抗病毒药物对Jurkat/HIV-1ⅢB细胞的作用,发现Jurkat/HIV-1ⅢB细胞具有HIV-1慢性感染细胞的生物学特征。结论成功建立Jurkat/HIV-1ⅢB细胞系,为抗HIV-1药物的研发和病毒感染机制研究提供了新的工具。     

痰、瘀、虚为慢性阻塞性肺疾病发病的关键环节

目的:近年来,应用中医药治疗慢性阻塞性肺疾病研究已经深入到细胞分子生物学及病理形态学水平。本文对慢性阻塞性肺疾病从痰、瘀、虚三个关键环节进行辨证论治。方法:应用计算机检索万方数据库1994-01/2005-12期间的相关文章,检索词为“痰,瘀,虚,慢性阻塞性肺疾病”,并限定文章语言种类为中文。对资料进行初审,并查看每篇文献后的引文。纳入标准:文章所述内容应与慢性阻塞性肺疾病或痰、瘀、虚三个关键环节相关。排除标准:重复研究或Meta分析类文章。结果:共收集到176篇相关文献,20篇文献符合纳入标准,排除的156篇文献为内容陈旧或重复。符合纳入标准的20篇文献中,6篇从痰论治,4篇从瘀论治,5篇从虚论治,5篇以痰、瘀、虚综合论治慢性阻塞性肺疾病。结论:痰、瘀、虚三者互相影响,共同导致慢性阻塞性肺疾病的发生。今后应立足中医揭示中药治疗的作用靶点和起效途径,从而展示中医药在防治慢性阻塞性肺疾病领域的优势。     

曼氏裂头蚴病流行病学调查及动物实验

2008年4～11月在河南省漯河市开展曼氏裂头蚴病流行病学调查。现场采集并检测中间宿主感染情况,包括显微镜检查剑水蚤体内曼氏迭宫绦虫原尾蚴,解剖镜下观察青蛙和蝌蚪皮下、肌肉组织和内脏感染裂头蚴的状况。水洗沉淀法收集终宿主家猫和犬粪便,镜检计数虫卵。收集蝌蚪体内的裂头蚴灌胃感染家猫,观察其排卵情况。结果显示,剑水蚤、蛙类和蝌蚪的感染率分别为3.5%(3/85)、35.9%(120/334)和16.8%(75/446)。调查家猫3只、犬31只,分别有1只和6只(19.4%)感染曼氏迭宫绦虫。感染家猫裂头蚴后12d粪检,曼氏迭宫绦虫卵阳性,25d自小肠取出17条曼氏迭宫绦虫成虫。表明河南省漯河市为曼氏裂头蚴病疫源地,终宿主和中间宿主感染率均较高。当地居民有生食蝌蚪的不良习俗是感染曼氏裂头蚴的主要原因。     

弓形虫排泄-分泌抗原含糖组分对小鼠调节性T细胞的影响

目的观察弓形虫排泄-分泌抗原(ESA)含糖组分对小鼠CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的影响。方法采用刀豆蛋白A(ConA)琼脂糖凝胶亲和层析技术提取ESA中的含糖组分,经硫酸-苯酚法测定提取物糖含量,并采用BCA法进行蛋白定量测定。将20只雌性C57BL/6小鼠随机分为5组,分别对各组小鼠腹腔注射ESA、ConA结合ESA、ConA未结合ESA、完全RPMI-1640和甘露糖各100μl。4d后处死,流式细胞仪检测各组脾脏CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞占脾细胞的比例。结果采用ConA琼脂糖凝胶亲和层析法成功提取弓形虫ESA中含糖成分。与对照组相比(RPMI-1640组和甘露糖组),ESA、ConA结合ESA、ConA未结合ESA注射组小鼠的CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞占脾细胞的比例均明显下降(P均0.01)。结论弓形虫ESA中含糖组分和蛋白组分均能引起小鼠CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞占脾细胞的比例下降。