精子凋亡与精子密度、活力、形态关系探讨

目的 探讨精子凋亡与精子密度、活力、形态关系。方法 分析69例男性不育患者精液样本,采用计算机辅助精液分析进行精液参数检测,采用精子形态检测系统下人工修正方法进行精子形态分析,瑞-姬染色检测精子凋亡率。结果 精子凋亡率与精子密度之间没有显著相关性（P〉0.05）,精子凋亡率与精子活力、正常形态精子百分率之间有显著负相关性（P〈0.01,P〈0.05）;活力异常组精子凋亡率高于活力正常组,两组比较差异有显著性（P〈0.05）;严格标准下,形态异常组精子凋亡率高于形态正常组,两组比较差异有显著性（P〈0.01）。结论 精子凋亡率与精子活力和正常形态精子有相关性,精子凋亡率增加可能是弱精子症和畸形精子症患者不育的原因之一。     

ICAM-1表达与膀胱癌生物学行为关系的研究

目的：研究 Ｉ Ｃ Ａ Ｍ １ 表达与膀胱癌生物学行为的关系。方法：应用免疫组化法对 ４０ 例石蜡包埋的膀胱癌标本中 Ｉ Ｃ Ａ Ｍ １ 表达进行检测。结果：膀胱癌组织中 Ｉ Ｃ Ａ Ｍ １ 表达阳性率为８８％ ，而安全缘组织中阳性率为 １６％ ，两者之间差异非常显著，且 Ｉ Ｃ Ａ Ｍ １ 的表达与膀胱癌的临床分期与病理分级呈负相关，即随膀胱癌的临床分期和病理分级的增高 Ｉ Ｃ Ａ Ｍ １ 表达降低。结论：膀胱癌组织 Ｉ Ｃ Ａ Ｍ １ 表达检测可以作判定患者机体免疫功能状态、治疗效果及预后观察的客观指标。     

40例阴茎癌及其癌旁组织中ras癌基因P^21蛋白的表达

应用免疫组织化学技术（ＡＢＣ法）对４０例阴茎癌及癌旁组织中ｒａｓ癌基因Ｐ＾２１蛋白的检测。结果表明，阴茎癌组织中Ｐ＾２１蛋白阳性率为８５％；而４０例癌旁组织中Ｐ＾２１蛋白阳性率仅为２５％，Ｐ＾２１蛋白阳性率随着病理分级，临床分期的升级而增高，癌旁组织中Ｐ＾２１蛋白阳性者预后不佳。     

重组腺病毒载体携带反义微小RNA-21对膀胱癌细胞生长的作用

目的探讨重组腺病毒载体介导的微小RNA-21(miRNA-21)反义寡核苷酸(ASOND)对人膀胱癌细胞株T24生长的影响。方法构建反向插入miRNA-21基因的重组腺病毒载体(rAV-miRNA-21),并用反义rAV-miRNA-21转染T24,即病毒载体用药组。采用噻唑蓝(MTT)法和原位末端标记(TUNEL)法检测T24细胞的增殖和凋亡情况。同时设对照组和空病毒组作为对比。结果 rAV-miRNA-21用药组、对照组和空病毒组T24细胞的增殖率分别为(37.1±6.8)%(、95.7±5.8)%(、86.3±7.5)%;凋亡率分别是(31.6±4.7)%(、8.4±2.9)%(、7.3±4.6)%。用药组的增殖率和凋亡率分别与对照组和空病毒组相比较,差异均有统计学意义(P0.01),而对照组与空病毒组之间差异无统计学意义(P0.05)。结论反义miRNA-21重组腺病毒载体转染T24细胞可以抑制肿瘤细胞增殖,增加细胞凋亡,进而抑制膀胱癌细胞生长。     

反义缺氧诱导因子-1α联合丝裂霉素C治疗裸鼠原位膀胱癌的疗效

目的探素构建和治疗裸鼠原位膀胱移植瘤模型中反义缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)制剂+化疗药物丝裂霉素C(MMC)对裸鼠膀胱癌生长转移的影响。方法经尿道分别灌注反义HIF-1α基因制剂+MMC和单独灌注反义HIF-1α基因制剂或MMC。观察灌注后成瘤裸鼠肿瘤生长和膀胱外淋巴转移情况,同时采用免疫组织化学噻唑蓝(MTT)比色法和原位末端标记(TUNEL)法分别检测瘤细胞增殖率和凋亡指数。结果 MTT法检测结果:联合用药组,反义HIF-1α组和MMC组瘤细胞的增殖率分别是(19.8±3.7)%,(48.6±5.9)%,(35.8±7.4)%;TUNEL检测结果:联合用药组,反义HIF-1α组和MMC组瘤细胞的凋亡指数依次是(82.6±5.7)%,(43.7±8.4)%,(57.9±4.8)%;联合用药组,反义HIF-1α组和MMC组肿瘤大小分别为〔(15.28±6.37)%〕mm2,〔(31.94±5.72)%〕mm2,〔(27.85±3.81)%〕mm2。上述三组细胞增殖率、凋亡指数和肿瘤大小间相互比较,单独用药组虽无统计学意义(P>0.05),但单独用药两组分别和联合用药组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。成瘤裸鼠膀胱外盆腔淋巴转移情况:联合用药组转移率10%(1/10),单独用药的两组转移率40%(4/10),组间转移率差异显著(P<0.01)。结论靶向基因制剂和细胞毒药物化疗联合治疗裸鼠原位膀胱移植瘤的抗肿瘤治疗策略明显优于单一的基因治疗或化疗。     

血管内皮生长因子及其受体双靶向阻断对膀胱癌细胞生长及血管生成的抑制作用

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(KDR)双靶向阻断对人膀胱癌T24细胞和裸鼠膀胱癌移植瘤生长的抑制作用.方法 构建VEGF siRNA和可溶性KDR(sKDR)表达质粒的共转染细胞系,采用二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法和流式细胞仪测定T24细胞的增殖和凋亡,采用免疫组化法检测裸鼠移植瘤组织中VEGF的表达、瘤间质微血管密度(MVD)和细胞DNA拓扑异构酶(Topo)Ⅱα的表达,采用原位末端标记(TUNEL)法检测裸鼠移植瘤中肿瘤细胞的凋亡.结果 MTT法检测结果显示,VEGF siRNA、sKDR和联合应用组细胞的生存率分别为56.3%±8.3%、42.6%±13.8%和32.5%±4.3%,均明显低于阴性对照组(97.3%±11.6%,P＜0.0001).流式细胞仪分析显示,VEGF siRNA、sKDR和联合应用组在G.期前均出现亚二倍体凋亡峰,凋亡率分别为5.1%±0.9%、4.2%±0.5%和8.8%±0.7%,均高于阴性对照组(0.9%±0.4%,P＜0.05),而且联合应用组的凋亡率还明显高于VEGF siRNA和sKDR组(P＜0.01).体内实验结果显示,VEGF siRNA、sKDR和联合应用组的肿瘤生长均受到不同程度的抑制,联合应用组从16 d开始肿瘤体积即明显小于阴性对照组(P＜0.05),28 d起肿瘤生长几乎处于停滞状态.免疫组化分析显示,联合应用组肿瘤组织中VEGF的表达水平为54.37±5.28,显著低于阴性对照组(141.66±8.59,P＜0.0001);瘤间质MVD仅为8.22±3.79,明显低于阴性对照组(61.76±5.28,P＜0.0001)和sKDR组(19.46±4.16,P=0.0089);瘤细胞增殖指数为1.5%±0.7%,显著低于阴性对照组(11.8%±5.2%,P＜0.0001);而凋亡率达到67.2%±8.5%,明显高于阴性对照组(8.7%±2.7%,P＜0.0001)、VEGF siRNA组(54.3%±4.8%,P=0.0492)和sKDR组(52.3%±6.4%,P=0.0293).结论 VEGF siRNA与sKDR单独应用均可不同程度地抑制肿瘤细胞增殖并诱导细胞凋亡,但二者联合应用时靶向双位点的治疗效果更为显著.     

肾脏孤立性纤维性肿瘤并发肾盂积水1例报告及文献复习

目的 分析肾脏SFT并发肾盂积水患者的临床表现、诊断和治疗方法,提高临床医生对该疾病的认识。 方法 收集1例肾脏SFT并发肾盂积水患者的临床症状、体征、影像学表现和术后病理结果等临床资料,并复习相关文献,总结肾脏SFT并发肾盂积水患者的临床特点、诊断和治疗方法。 结果 30岁男性患者因体检发现左侧肾肿物并发肾盂积水3 d入院。腹部超声提示左侧肾肿物和左侧肾盂积水,集合系统光点分离2.2 cm;进一步行CT检查显示左肾占位性病变并发肾盂积水,考虑肾透明细胞癌可能。初步诊断为左侧肾恶性肿瘤,术前准备后行经腹左侧根治性肾切除术;术后镜下见细胞丰富区和细胞稀疏区交替进行,梭形细胞呈无结构性排列。结合免疫组织化学染色结果［信号转导和转录激活因子6（STAT6）（+）、CD34（+）、Vimentin（+）、CD99（部分+）］,确诊为肾脏SFT。术后患者恢复良好,切口甲级愈合,无并发症出院。术后1个月门诊复查全腹CT检查未见局部复发和转移的异常表现,术后3个月电话随访患者无不适症状。 结论 肾脏SFT无特异性临床表现,且容易误诊为其他肿瘤;确诊主要依赖形态学和免疫组织化学染色检查结果,目前手术治疗仍是肾脏SFT的首选治疗方法。     

“宣畅汤”联合常规方案治疗阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征合并2型糖尿病30例临床研究

目的:观察自拟宣畅汤治疗痰瘀互结型阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)合并2型糖尿病的临床疗效。方法:将60例痰瘀互结型OSAHS合并2型糖尿病患者随机分为治疗组与对照组,每组30例。对照组采用基础降糖治疗方案及一般性的干预措施(包括减肥、戒烟酒、尽量采取侧位睡眠、避免服用镇静剂和过度疲劳),治疗组在对照组治疗的基础上加用自拟宣畅汤口服。治疗8周后,比较2组患者中医证候疗效和治疗前后中医证候积分、Epworth嗜睡量表(ESS)评分、睡眠呼吸监测相关指标、体质量指数(BMI)、糖尿病患者生存质量特异性量表(DSQL)评分及血糖指标改善情况。结果:治疗组总有效率为93.33%,显著高于对照组的73.33%(P<0.05)。治疗后2组患者中医证候总积分、DSQL评分以及空腹血糖、餐后2 h血糖均较治疗前明显降低(P<0.05),治疗组上述指标明显低于对照组(P<0.05,P<0.01)。治疗后2组患者睡眠呼吸监测相关指标和ESS评分均较治疗前明显改善(P<0.05),治疗组改善程度明显优于对照组(P<0.05)。治疗后2组患者BMI均较治疗前明显降低(P<0.05),组间比较无统计学差异(P>0.05)。结论:在常规治疗方案基础上加用宣畅汤治疗痰瘀互结证OSAHS合并2型糖尿病患者有较好的临床疗效,可有效改善睡眠呼吸暂停低通气及血糖水平,提高生活质量,值得进一步研究。     

外源性表达VEGF165b对顺铂诱导人膀胱癌T24细胞损伤的影响及其机制

目的:观察人膀胱癌T24细胞中外源性表达血管内皮生长因子(VEGF)变构体VEGF165b对顺铂(DDP)诱导人膀胱癌T24细胞损伤的作用,并探讨相关机制。方法:构建VEGF165b表达载体pcDNA-VEGF165b;T24细胞分为对照组、VEGF165b组(转染VEGF165b表达载体)、DDP组和VEGF165b+DDP组(DDP联合转染VEGF165b表达载体)。MTT法检测各组细胞存活率;Western blotting法检测各组T24细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和caspase3表达;TUNEL法检测细胞凋亡数。结果:MTT法检测,与对照组比较, VEGF165b组24和48 h时T24细胞存活率无明显变化(P>0.05);与DDP组比较,VEGF165b+DDP组24和48 h时细胞存活率均明显降低(P<0.05)。Western blotting法检测,与对照组比较,DDP组细胞中cleaved-caspase3/pro-caspase3比值升高(P<0.05),Bcl-2/Bax比值降低(P<0.05);与DDP组比较,VEGF165b+DDP组细胞中cleaved-caspase3/pro-caspase3比值升高(P<0.05),Bcl-2/Bax比值降低(P<0.05)。TUNEL法检测,与对照组(5.1±2.7)和VEGF165b组(7.4±3.2)比较,DDP组的凋亡细胞数(26.3±8.2)的凋亡细胞数增加(P<0.05)。与DDP组比较,VEGF165b+DDP组的凋亡细胞数(41.3±6.9)增加(P<0.05)。结论:外源性表达VEGF165b能通过增加细胞凋亡促进DDP对T24细胞的损伤,其机制与VEGF信号通路受抑制有关联。     

根治性膀胱切除术联合乙状结肠原位新膀胱术治疗浸润性膀胱尿路上皮癌的临床应用(附16例报告)

目的: 探讨根治性膀胱切除术联合乙状结肠原位新膀胱术治疗浸润性膀胱尿路上皮癌的临床疗效。方法: 浸润性膀胱癌患者16例,全部为男性患者。年龄53~75岁,平均年龄63岁。均采用根治性膀胱切除术联合乙状结肠原位新膀胱术治疗。结果: 16例患者住院时间37~62d,平均51d。平均术后住院时间43d。随访5个月~6年,平均26个月。患者血肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平均正常,未出现酸中毒。膀胱造影未出现单侧输尿管返流。白天可自控排尿14例(87.5%),夜间尿失禁6例(37.5%),皆可通过夜间唤醒控制。新膀胱容量245~380 mL(平均316 mL),新膀胱充盈时最大压力28~57 cmH₂O (平均39cm H₂O,1 cm H₂O=0.098 kPa)。结论: 根治性膀胱切除术联合乙状结肠原位新膀胱术治疗浸润性膀胱尿路上皮癌术后无严重并发症,临床疗效可靠,患者原位排尿,生活质量较高,值得临床推广应用。