肺结核患者血清IL-6、IL-12、IL-23、TNF-α、IFN-γ表达水平的临床意义分析

目的探讨肺结核患者血清中巨噬细胞相关细胞因子IL-6、IL-12、IL-23、TNF-α、IFN-γ的变化及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测30例活动性肺结核患者(患者);30例结核分枝杆菌感染者(感染者);30例健康人血清中的IL-6、IL-12、IL-23、TNF-α、IFN-γ分泌水平。结果 IL-6在健康人、患者者和感染组血清中的分泌水平分别为:0.43±0.03 pg/ml,0.86±0.04 pg/ml,0.46±0.02 pg/ml;IL-12在健康人、患者者和感染组血清中水平分别为:9.43±0.22 pg/ml,14.96±0.58 pg/ml,9.58±0.20 pg/ml;IL-23在健康人、患者者和感染组血清中水平分别为:269.58±28.58pg/ml,336.58±30.61 pg/ml;332.03±25.71 pg/ml;IFN-γ在健康人、患者者和感染组血清中水平分别为:90.80±2.05 pg/ml,116.15±4.96 pg/ml,114.29±3.16 pg/ml;TNF-α在健康人、患者者和感染组血清中水平分别为:13.87±3.28 pg/ml,14.06±2.14 pg/ml,13.43±3.12 pg/ml。统计分析发现:IL-6、IL-12、IL-23、IFN-γ在患者血清中的分泌水平显著高于健康对照组(p<0.05);IL-23与INF-γ在感染者血清中的分泌水平显著高于健康对照组(p<0.05);IL-6与IL-12在患者血清中的分泌水平显著感染者组(p<0.05);其余细胞因子在3类人群血清中分泌水平差别无统计学意义。结论血清中巨噬细胞相关细胞因子IL-6、IL-12、IL-23、IFN-γ在肺结核发病中具有重要意义,具有成为肺结核临床诊断依据可能。     

小鼠胰岛提取方法改良的实验研究

目的  探讨小鼠胰岛提取方法的改良及效果。方法  根据胰岛提取方法不同, 将小鼠随机分为胆总管穿刺组和胆总管穿刺联合胰腺原位注射组(联合注射组), 每组各100只。胰岛提取的改良方法采用胆总管穿刺联合胰腺原位注射法灌注胰腺, 体视显微镜下挑选并纯化胰岛。鉴定胰岛的形态和纯化情况, 统计两组的胰岛产量及胰岛提取成功率。分析胰岛在体外培养1周内的存活情况, 并评估体外培养24 h和4 d后胰岛的胰岛素分泌功能。结果  与胆总管穿刺组比较, 联合注射组提取胰岛的产量显著增高(P < 0.001)。两组胰岛提取成功率均为83%, 差异无统计学意义(P > 0.05)。胆总管穿刺联合胰腺原位注射法所提取的胰岛形态完好、纯度高、活性好。新鲜分离的胰岛体外培养24 h后胰岛存活率接近100%;体外培养1~5 d, 胰岛细胞存活情况良好; 体外培养6 d开始, 胰岛出现中心性死亡。体外培养24 h和4 d后, 给予高葡萄糖刺激胰岛后, 小鼠胰岛功能均正常。结论  胆总管穿刺联合胰腺原位注射法可以提高胰岛的产量, 且获取的胰岛细胞活性和功能良好。     

热灭活和紫外线照射灭活结核分枝杆菌的实验效果分析

我国卫生部公布的《人间传染的病原微生物名录》中结核分枝杆菌被列为第二类病原微生物（危害程度为Ⅲ级）,属高致病性病原微生物[1]。实验室研究课题中,大部分涉及到结核分枝杆菌的操作,实验室生物安全是首先要解决的问题。至今,已有一些关于实验室工作人员患结核病的报道,其中呼吸道吸入感染是实验室感染的最主要类型[2]。     

两种方法治疗幽门螺杆菌感染反流性食管炎的疗效观察

目的探讨两种不同方法治疗伴幽门螺杆菌感染的返流性食管炎的临床效果。方法将我院收治的伴有幽门螺杆菌感染的返流性食管炎患者60例随机分为观察组和对照组,两组均接受常规治疗,在此基础上观察组接受莫沙必利治疗,对照组接受吗丁啉治疗,评估两组治疗效果。结果症状疗效评定中观察组总有效率96.67%,对照组73.33%,两组分别比较差异具有统计学意义(P<0.05)。内镜疗效评定观察组总有效率93.33%,对照组66.67%,两组分别比较差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗8周、1年后观察组症状评分明显低于对照组,两组分别比较差异具有统计学意义(P<0.05)。两组治疗过程中均未见明显不良治疗反应。结论莫沙必利治疗伴有幽门螺杆菌感染的返流性食管炎的临床效果更肯定,治疗安全,值得应用。     

结核分枝杆菌Rv3803c、Rv3846基因的克隆、表达、纯化与鉴定

目的 克隆结核分枝杆菌Rv3803c和Rv3846基因,并在大肠埃希菌(E.coli)中进行表达和纯化。 方法 以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板,应用PCR方法扩增出Rv3803c和Rv3846基因片段,克隆至pGEX-6P-1表达载体中,测序正确后,在E.coli Rosetta中诱导表达,GST标签亲和层析法纯化蛋白,考马斯亮蓝染色及Western-blot分析鉴定。 结果 重组质粒pGEX-Rv3803c、pGEX-Rv3846测序表明核苷酸序列与设计完全一致。其在E.coli Rosetta中的存在形式均为可溶部分约50%、包涵体约50%,相对分子质量约为56 000和45 000, 纯化的GST-Rv3803c、GST-Rv3846样品纯度90%以上。完整的GST-Rv3803c的浓度大约为0.1 mg/ml,完整的GST-Rv3846的浓度大约为0.5 mg/ml。即相当于每升E.coli Rosetta培养物中,GST-Rv3803c产量为：0.25 mg/L、GST-Rv3846产量为1.25 mg/L。 结论 成功获得了纯化蛋白Rv3803c（MPT51）和Rv3846（SodA）,为进一步研究MPT 51和SodA蛋白的辅助诊断价值、构建保护性疫苗提供了实验依据。     

九味羌活汤加减治疗颈椎病27例

笔者在中医临床中运用九味羌活汤加减治疗颈椎病27例,取得了满意的效果. 1一般资料 27例中,男19例,女8例;年龄29～57岁;病程14天～8年.病例皆由门诊根据患者的症状、体征、X线检查确诊后转中医科治疗.     

溶石法治疗上尿路尿酸结石的体会(附14例报告)

我们自 1 998年 1 1月～ 2 0 0 2年 1月共收治上尿路纯尿酸结石患者 1 4例 ,均以碱化尿液方法完全治愈 ,现报告如下。1　资料与方法1 .1 　 临床资料本组 1 4例 ,男 1 0例 ,女 4例 ,年龄 2 1～ 76岁 ,平均 48.5岁。左肾结石 2例 ,右肾结石 4例 ,双肾结石 6例 ,结石最小 1 .2ｃｍ× 1 .5ｃｍ ,最大 2 .0ｃｍ× 3 .5ｃｍ。右侧输尿管结石 2例 ,大小分别为 0 .8ｃｍ× 1 .5ｃｍ和 0 .6ｃｍ× 1 .2ｃｍ。其中 1例双肾结石患者和 1例右输尿管结石患者 (左肾因车祸切除 )已出现梗阻性无尿 (时间为 5ｄ和 1ｄ) ,伴有腰痛、恶心、呕吐 ,血尿素氮分别…     

川芎嗪注射液联合低分子肝素钙辅治慢性肺源性心脏病急性加重期疗效观察

目的 探讨川芎嗪注射液联合低分子肝素钙辅治慢性肺源性心脏病急性加重期的临床效果.方法 将慢性肺源性心脏病急性加重期患者64例随机分为观察组和对照组,各32例.对照组给予常规治疗,观察组在对照组治疗基础上给予川芎嗪注射液联合低分子肝素钙治疗.比较2组临床疗效及氧分压(PaO2)、血氧饱和度(SpO2)、二氧化碳分压(PaCO2)、血浆黏度、低切黏度、高切黏度和血小板黏度率.结果 观察组总有效率为96.88%高于对照组的75 00%,差异有统计学意义(P＜0.05).治疗后2组患者PaO2、SaO2及PaCO2均较治疗前改善(P＜0.05);治疗后观察组PaO2、SpO2及PaCO2水平均优于对照组(P＜0.05).治疗后2组患者血浆黏度、低切黏度、高切黏度及血小板黏度率均较治疗前改善(P＜0.05);治疗后观察组血浆黏度、低切黏度、高切黏度及血小板黏度率均优于对照组(P＜0.05).2组均未见明显的药物不良反应.结论 川芎嗪注射液联合低分子肝素钙辅治慢性肺源性心脏病急性加重期效果显著,不良反应少,值得推广应用.     

温经活血治疗脑血管神经性头痛

脑血管神经性头痛是由于头部损伤或感受寒邪，致使瘀血阻络，寒凝经脉，使经脉拘急所致。在临床巾以急性多见，尤其是以中、青年发病率较高。其症为头痛剧烈，尤如针刺且部位固定，痛处多以头部两侧为主，性质属多发性，遇寒则头痛加重。     

沉默小窝蛋白1对棕榈酸作用下的胰岛β细胞存活的影响

目的探讨小窝蛋白1(Cav1)对棕榈酸作用下的胰岛β细胞存活的影响。方法通过慢病毒载体构建Cav1沉默的小鼠胰岛素瘤NIT-1细胞株和小鼠原代胰岛(Cav1-shRNA组),以空载体病毒组作为对照组(Ctrl-shRNA),并设空白对照组,各组均分别加入脱脂牛血清白蛋白和棕榈酸(0.5 mmol/L)处理24 h及48 h,通过四甲基偶氮唑蓝比色法及Hoechst33342/碘化丙啶(PI)双染色法检测细胞活性及细胞凋亡,实时荧光定量PCR、Western blot检测凋亡相关的mRNA及蛋白表达水平。结果采用t检验和单因素方差分析法进行统计学分析。结果与对照组比较,棕榈酸处理组的细胞存活率显著下降(0.89±0.10比0.24±0.04,t=13.49,P<0.01),P18、P19的mRNA和蛋白表达均上调(1.00±0.09比1.30±0.04、1.00±0.04比1.37±0.13,t=5.28、4.71,均P<0.05;0.87±0.04比1.48±0.05、1.02±0.06比1.41±0.07,t=16.50、7.33,均P<0.01);含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-6、Caspase-9和Caspase-12的mRNA表达水平明显上调(1.00±0.04比1.57±0.08、1.01±0.15比1.57±0.20、1.02±0.19比1.57±0.09,t=11.04、3.88、4.53,均P<0.05),蛋白表达也明显上调(0.86±0.10比1.28±0.11、0.69±0.01比0.86±0.06、0.70±0.02比1.18±0.01,t=4.89、4.84、37.18,均P<0.01)。而Cav1-shRNA+棕榈酸组细胞存活率较Ctrl-shRNA+棕榈酸组显著上升(0.53±0.10比0.26±0.08,t=4.71,P<0.01),P19的mRNA和蛋白表达均下调(1.53±0.18比0.66±0.04、1.48±0.05比0.70±0.02,t=8.17、25.09,均P<0.01);Caspase-6、Caspase-7、Caspase-9和Caspase-12的mRNA表达水平下调(1.82±0.11比1.03±0.07、1.43±0.24比0.42±0.15、1.41±0.22比0.51±0.18、1.45±0.18比0.42±0.13,t=5.48~10.49,均P<0.01),蛋白表达也下调(0.99±0.14比0.63±0.11、0.90±0.14比0.62±0.04、0.90±0.02比0.60±0.04、1.30±0.01比0.65±0.04,t=3.50~27.31,均P<0.01)。结论Cav1沉默可以通过影响胰岛β细胞Caspase家族,促进其增殖、减少棕榈酸作用下的β细胞凋亡,保护脂毒性下胰岛β细胞活性。