重组质粒pEGFP-C1-STAT6的构建及在HeLa细胞中表达

目的 构建以增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescence protein,EGFP)为报告基因的重组质粒pEGFP-C1-STAT6,观察其在HeLa细胞中的表达.方法 以重组质粒pCLNEO-STAT6为模板,PCR法扩增出目的 基因,将扩增片段双酶切后连接到质粒pEGFP-C1上,构建重组质粒pEGFP-C1-STAT6,脂质体法转染HeLa细胞,Western 印迹检测融合蛋白的表达,并在荧光显微镜下观察融合蛋白的定位和分布.结果 成功构建质粒pEGFP-C1-STAT6,并在HeLa细胞中实现表达;Western 印迹检测到融合蛋白EGFP-STAT6;在荧光显微镜下观察到绿色的融合蛋白表达和定位.结论 重组质粒pEGFP-C1-STAT6构建成功,可用于标记STAT6蛋白,为进一步研究STAT6在信号转导中的作用机制奠定基础.     

CTLA4-Ig对变应性接触性皮炎小鼠模型的治疗作用

目的 探讨B7／CD28共刺激通路阻断剂CTLA4－Ig对变应性接触性皮炎的作用。方法 建立小鼠二硝基氟苯（DNFB）变应性接触性皮炎模型，以不同剂量的CTLA4－Ig进行静脉注射，通过检测小鼠耳廓肿胀度观察其对DNFB和FITC刺激的反应，并观察CTLA4－Ig的长期疗效，同时对治疗后的小鼠脾细胞进行体外淋巴细胞增殖实验。结果 CTLA4－Ig有明显的治疗作用，DNFB变应性接触性皮炎小鼠经治疗耳廓肿胀抑制率最高达69．7％，而且治疗的小鼠在激发后的14d用DNFB再刺激能产生无应答反应，但对FITC的再刺激表现为耳廓肿胀明显，过继转移CTLA4－Ig治疗小鼠的淋巴细胞能诱导受体鼠对DNFB的刺激产生特异性免疫耐受。结论 应用B7／CD28共刺激通路阻断剂CTLA4－Ig融合蛋白能有效地抑制接触性超敏反应，为临床治疗Ⅳ型变态反应性皮肤病如湿疹等提供一种新的可能的治疗策略。     

卵巢成熟畸胎瘤合并抗NMDAR脑炎及肺炎1例及文献复习

抗N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)脑炎是一种罕见的神经系统疾病。近年来越来越多报道显示,畸胎瘤与抗NMDAR脑炎关系密切,且畸胎瘤相关的抗NMDAR脑炎病程进展快,病情重,早期给予免疫治疗及手术治疗可改善预后。本文报道了卵巢成熟畸胎瘤合并抗NMDAR脑炎及肺炎1例,以期提高妇科医生对该类疾病的认识,为研究者们提供参考。     

脑卒中后抑郁与血清胆红素和超敏C反应蛋白的相关性分析

目的分析脑卒中后抑郁发生的影响因素, 探讨血清胆红素和超敏C反应蛋白变化对卒中后抑郁的影响。方法选取青海省人民医院2019年12月至2020年12月住院治疗的脑卒中患者199例, 根据长居地不同将其分为西宁城区组(海拔2 000～3 000 m, n=165)及州县组(海拔 > 3 000 m, n=34);根据是否发生卒中后抑郁分为卒中后抑郁组(n=56, 其中西宁城区组45例, 州县组11例)、无卒中后抑郁组(n=143, 其中西宁城区组120例, 州县组23例)。采用相关量表评估两组神经功能缺损及抑郁程度, 分别检测血清总胆红素、直接胆红素与超敏C反应蛋白水平, 并进行相关性分析。结果卒中后抑郁组血清总胆红素、直接胆红素、超敏C反应蛋白分别为(19.95±7.22)mmol/L、(3.98±1.49)mmol/L、(1.40±2.29)mg/L, 均显著高于无卒中后抑郁组的(16.20±7.61)mmol/L、(3.19±1.62)mmol/L、(0.63±1.33)mg/L, 差异均有统计学意义(t=3.17、3.18、2.35, 均P < 0.05);轻-中度、重...     

可控性腹压带在泌尿系梗阻静脉肾盂造影中的应用价值

目的:完善静脉肾盂造影的检查方法,提高泌尿系梗阻部位的显影效果,减少和避免假性肾功能不全的产生.方法:采用可控性腹压带,对50例临床和B超所提供的泌尿系梗阻伴积水患者进行静脉肾盂造影(IVP)检查.将传统方法和改良方法先后应用于同一个患者,对患者肾盂肾盏、输尿管显影情况进行比较观察.结果:本组50例患者,泌尿系结石43例、泌尿系肿瘤3例、畸形2例、狭窄2例,均伴有不同程度的肾盂积水.通过"先传统再改良"的对比方法,使得泌尿系梗阻的患者在IVP中的显影率显著提高,与传统方法相比,经统计学处理,除轻度积水外,中、重度积水及输尿管全程显影比较,P均＜0.05,未显影比例比较,P＜0.01,有统计学意义.结论:改良法对中、重度积水患者在IVP检查中,肾盂肾盏及输尿管全程显影率明显优于传统法,提高了病变的显影率,减少和避免假性肾功能不全的产生,该方法不仅基层医院可以借鉴应用,有条件医院应用于数字胃肠机效果更佳.     

重症急性胰腺炎合并腹内高压28例外科治疗体会

大部分急性胰腺炎为轻型,约有20％的患者发展为重症急性胰腺炎（severeacutepanereatitis．SAP）．近年来SAP病死率呈下降趋势．约为10％～30％。SAP伴有腹内高压（intra—abdominalhypertension,IAH）者达40％,     

超声联合宫腔镜诊治Robert子宫1例

患者女,13岁,主因周期性下腹痛半年就诊.患者12岁月经初潮,经期下腹痛.查体:腹软,无压痛.肛查:女性外阴,可见一处女膜孔.子宫稍大,较硬,压痛明显.经直肠超声检查:可见一个子宫体回声,前位,增大,可测及2个宫腔回声,左侧宫腔与宫颈相通,右侧宫腔与宫颈不相通,右侧宫腔内可见潴留的经血.     

肿瘤坏死因子α对人脐静脉内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂1表达及转录调控的影响

探讨肿瘤坏死因子α对人脐静脉内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂1活性和mRNA表达的影响，以及纤溶酶原激活物抑制剂1基因5’上游序列的调控元件在该基因转录调控中的作用。体外培养人脐静脉内皮细胞，加入不同浓度肿瘤坏死因子α作用不同时间。采用发色底物法测定纤溶酶原激活物抑制剂1活性。Northern印迹分析法测定纤溶酶原激活物抑制剂1 mRNA水平。基因重组技术构建四个含人纤溶酶原激活物抑制剂1基因不同长度5’上游序列的荧光素酶报告基因质粒，瞬时转染进入内皮细胞，并测定荧光素酶的表达情况。运用聚合酶链反应和序列分析法对构建质粒上的三个AP-元件分别进行定点突变。结果发现，不同浓度肿瘤坏死因子α作用人脐静脉内皮细胞后，纤溶酶原激活物抑制剂1活性和mRNA表达量均明显增高；当转染质粒含有纤溶酶原激活物抑制剂1基因上游序列-1509/ 90和-823／ 90时，肿瘤坏死因子α使转染细胞的荧光素酶表达量比对照组明显增高；当转染质粒含有-553／ 90和-47， 90时，肿瘤坏死因子α的诱导作用不明显。在纤溶酶原激活物抑制剂15’上游序列的三个AP-1元件突变后，肿瘤坏死因子α的诱导作用明显降低。结果提示，肿瘤坏死因子α增强血管内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂1活性与mRNA表达；纤溶酶原激活物抑制剂1活性提高与其mRNA表达增加呈正相关；纤溶酶原激活物抑制剂15’上游序列中三个AP-1元件在肿瘤坏死因子α对纤溶酶原激活物抑制剂1诱导中具有重要调控作用。     

日本骨质疏松症研究的进展

日本骨质疏松症研究的进展井上哲郎综述李晓冬译１骨质疏松症的社会背景根据联合国人口统计局的推测，１９９０年全世界的总人口为５３亿人，其中发达国家１２亿人，发展中国家４１亿人；全世界６５岁以上老年人口所占的比例为６．２％，其中发达国家的老年人口比率为１２...