普伐他汀对肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用

目的探讨HMG-CoA还原酶抑制剂(Statins)在体内外抑制肝细胞癌增殖和侵犯的作用及其机制。方法以不同浓度的普伐他汀(Pr)作用于培养的HepG2细胞,用噻唑蓝比色试验检测细胞的增殖活性,并观察细胞的形态学变化。建立HepG2细胞裸小鼠皮下移植瘤模型,腹腔注射浓度为5 g／L的Pr,每只每日10 ml／kg体重。观察肿瘤的生长情况,实验结束时切取肿瘤称重,检测血中AFP水平。肿瘤标本石蜡切片,免疫组织化学检测CyclinD1和FⅧRA的表达。结果 Pr作用96 h后明显抑制了HepG2细胞的生长,细胞出现明显的形态学改变。Pr也抑制裸小鼠皮下移植型肝癌的生长,Pr组和对照组瘤重分别是(0．246±0．129)g和(0．376±0．102)g(P< 0．05),抑瘤率34．6％。两组的AFP表达差异有统计学意义[(2．657±1．465)μg／L比(4．206± 1．204)μg／L,P<0．05]。Cydin D1在肿瘤间质的成纤维细胞表达,Pr组的积分吸光度(OPTID)为 219．40±24．00,对照组为451．54±47．97(P<0．05)。两组的微血管密度(MVD)分别为27．43± 6．83和41．22±6．26(P<0．05)。结论 Pr能抑制肝癌细胞的增殖,其机制主要是抑制肿瘤的血管形成和肿瘤基质中的成纤维细胞的增生。     

桥本病与甲亢患者抗钙调素自身抗体的检测和意义

钙调素(calmodulin,CaM)是一种真核细胞内的多功能调节蛋白,对免疫功能有调控作用。慢性淋巴细胞性甲状腺炎又称桥本病(HT),和甲亢均属自身免疫性甲状腺疾病(AITD),我们发现这类患者也存在较高水平的抗CaM自身抗体。现将研究结果报告如下。     

可溶性白细胞介素6受体β亚基在重组痘苗病毒中的表达及其对动物的免疫效果

目的 :构建可溶性白细胞介素 6受体 ( IL- 6R) β亚基 ( sgp130 )重组痘苗病毒 ,感染动物细胞使其表达 sgp130 ,用重组病毒免疫动物产生特异性抗 sgp130抗体。　 方法 :将 sgp130基因导入痘苗病毒载体 p JSA1175,用脂质体转染法将重组载体与野生型痘苗病毒在 TK-143细胞中发生同源重组 ,用 Bud R和 X- gal双重选择 ,得到带有人 sgp130的重组病毒 ( Vsgp130 )。　 结果 :采用 IDA和 Western Blotting法证实 ,感染 Vsgp130的 TK-143细胞上清中有较强的 sgp130表达 ,表达产物分子量为 10 0 0 0 0左右。用重组病毒免疫家兔和 Balb/c小鼠 ,可刺激抗体产生。　 结论 :sgp130在痘苗病毒载体系统中的表达成功及抗 sgp130多克隆抗体的产生为进一步研究 IL- 6等细胞因子信号传导机理及研制抗 sgp130单克隆抗体奠定了基础     

煤工尘肺患者γ-干扰素和淋巴细胞变化及意义

采用酶联免疫吸附法(ELISA),检测58例煤工尘肺患者(煤工尘肺组)、36例井下健康工人(井下对照组)及32例井上健康人(井上对照组)血清IFN-γ含量。采用免疫组织化学ABC法检测T淋巴细胞亚群(CD4、CD8细胞)百分率,用血细胞计数仪检测外周血淋巴细胞总数(TLC)。结果提示,随着病情加重,煤工尘肺患者IFN-γ水平降低,细胞免疫力下降,IFN-γ与T淋巴细胞共同参与了煤工尘肺发生和发展过程。     

促性腺激素释放激素激动剂对In-R1-G9细胞中胰升血糖素表达的影响

目的研究促性腺激素释放激素（GnRH）激动剂（GnRH agonist,GnRHa）对In-R1-G9细胞内胰升血糖素表达的调控作用。方法分别用终浓度为0．1nmol／L、10nmol／L、1000nmol／L的GnRHa处理培养的In-R1—09细胞2h（对照组用生理盐水处理）,通过Western blot和荧光定量PCR技术观察胰升血糖素在蛋白水平及转录水平的变化。结果与对照组相比,低浓度的GnRHa（0．1nmol／L）使胰升血糖素在蛋白水平和转录水平的表达均有所升高,但差异无统计学意义（P〉0．05）;而高浓度的GnRHa（10nmol／L、1000nmol／L）能明显增强胰升血糖素的表达（P〈0.05或P〈0．01）。结论一定浓度的GnRHa能增强In—R1-G9细胞内胰升血糖素的表达。     

乙型及丙型肝炎病毒感染与原发性肝癌的临床研究

目的研究HBV DNA、HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb及抗-HCV与原发性肝癌发生的相关性。方法采用回顾性调查分析方法,对58例原发性肝癌患者（病例组）,同期收治的58例其他恶性肿瘤患者（对照组）HBV和HCV感染情况进行统计,并分析HBV血清标志物及HBV DNA与原发性肝癌发生发展的规律。结果两组资料的HBV感染率分别为82.76%和44.83%,病例组与对照组比较有显著性差异（P〈0.05）,单纯HCV感染及HBV/HCV混合感染率两组无明显差异（P〉0.05）;血清HBV DNA阳性率在病例组和对照组分别为72.92%、23.08%（P〈0.05）;HBsAg、HBeAb和HBcAb检出率病例组高于对照组（P〈0.05）;而HBeAg阳性率两组比较无显著性差异（P〉0.05）。结论在慢性HBV感染的肝癌高发人群中,HBV DNA、HBsAg、HBeAg、HBeAb及HBcAb所反映的HBV感染状态及不同临床演变过程与肝癌的发生发展密切相关,共同参与肝癌的发病机制。     

SEDL基因及其突变体真核表达载体的构建与鉴定

目的构建SEDL基因及其突变体与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达载体的融合表达质粒pEGFP-C3-SEDL并获得表达。方法分别提取X连锁迟发性脊柱骨骺发育不良(SEDT)患者和正常对照外周血淋巴细胞RNA,RT-PCR方法扩增SEDL基因cDNA,双酶切后克隆至pEGFP-C3空载体,构建表达质粒pEGFP-C3-SEDL。双酶切和DNA测序鉴定后,转染COS-7细胞,通过流式细胞仪和荧光显微镜观察重组蛋白表达情况。结果 DNA测序显示重组真核表达载体pEGFP-C3-SEDL构建成功,SEDL基因c.370-371ins A突变位点被成功克隆到突变体重组质粒中。荧光倒置显微镜观察证实重组质粒均能在细胞内进行蛋白表达。结论 SEDL基因及其突变体真核表达载体的成功构建为其进一步研究SEDL基因突变致SEDT的分子机制奠定了基础。     

多层螺旋CT肝脏灌注成像在肝硬化血流状态评价中的应用

目的探讨多层螺旋CT肝脏灌注成像在肝硬化血流状态评价中的应用。方法 37例行上腹部CT灌注扫描的肝硬化住院患者,Child-pugh A级15例、Child-pugh B级14例、Child-pugh C级8例;12例因其他疾病(无肝病史)行上腹部灌注增强检查结果为阴性者为对照组。采用GE AW 4.3工作站分别测量HBF、HBV、MTT、HAF、HAP、PVP值,分析比较肝脏灌注参数在正常肝脏与Child-pugh A、B、C级之间差别,以及各级之间的差别。结果肝右叶灌注参数比较,对照组HBF、HBV及PVP值均高于肝硬化各组(P<0.05);MTT值对照组低于Child B、C级(P<0.05);HAF值在Child C级与对照组、Child A、B级之间差异均有统计学意义(P<0.05)。左内叶灌注参数比较,对照组HBF、HBV值高于肝硬化各组(P<0.05),BV值Child A级高于Child C级(P<0.05);HAF值在Child C级高于Child A、B级及对照组(P<0.05)。HAP值对照组高于Child B、C级,且Child A级高于Child C级(P<0.05);PVP值在对照组高于肝硬化各组(P<0.05)。左外叶灌注参数比较,BF值对照组高于Child B、C(P<0.05)。BV值对照组高于肝硬化各组(P<0.05);HAP值及PVP值对照组高于肝硬化各组(P<0.05)。结论多层螺旋CT肝脏灌注成像可有效评价肝硬化血流状态,是肝硬化严重程度及肝脏储备功能的重要影像学指标。