健康学生大肠埃希菌第1类整合子的鉴定及特征

目的：探讨健康学生肠道大肠埃希菌携带第1类整合子的分布及所含基因盒的特征。方法：常规方法分离大肠埃希菌;纸片扩散法对10种抗生素进行耐药性监测和分析;PCR鉴定第1类整合子阳性株;PCR产物测序并对结果进行分析。结果：从97份标本中鉴定出大肠埃希菌76株,其中25株（32.8%）为多重耐药,耐药谱为复合磺胺-氨苄西林-四环素-红霉素-链霉素。25株中有14株(56.0%)鉴定出1类整合子,1 800 bp 10株, 750 bp 4株。PCR产物测序得知1 800 bp整合子携带aadA1-dfrA14-orf基因盒,传递对氨基糖苷类-磺胺类抗菌药物的耐药性;750 bp整合子携带dfrA14基因盒,传递对磺胺类抗菌药物的耐药性。结论: 不同种类的1类整合子存在于健康人大肠埃希菌中,携带耐药基因盒,决定多重耐药性。      

复发性非淋菌性尿道（宫颈）炎支原体的耐药性及相关机制

目的：探讨复发性非淋菌性尿道（宫颈）炎（NGU）支原体的分布、多重耐药特征及耐药机制。 方法：采集96例复发性NGU患者尿道或宫颈分泌物标本进行支原体培养和药敏试验,PCR检测耐药基因,PCR产物克隆测序。 结果：96例复发性NGU患者,解脲支原体并发人型支原体感染23例（24.0%）,男性8例（32.3%）,女性15例（32.1%）;支原体对各种抗菌药物耐药率由高到低依次为红霉素71.9%、氧氟沙星70.8%、四环素63.0%、强力霉素51.0%、原始霉素48.8%、罗红霉素37.5%、阿奇霉素13.5%、司帕沙星8.3%、交沙霉素8.3%。对四环素耐药的菌株携带tet M基因。结论：标本来源地区男女之间解脲支原体并发人型支原体的感染率和耐药率相同。抗解脲支原体的最佳药物为司帕沙星和交沙霉素,最不宜使用红霉素、氧氟沙星和四环素。     

中药材鹿心分子鉴定方法及检测试剂的研究

目的建立中药材鹿心DNA指纹鉴定方法,研发鹿心DNA检测试剂盒。方法以梅花鹿和马鹿mtDNA Cytb基因作为靶基因,设计小片段特异性引物,研制鹿心DNA提取及PCR检测试剂;应用分子克隆及测序技术,克隆鹿心对照药材;并对试剂的特异性、重现性、稳定性及灵敏度进行考察;对市售鹿心样品进行真伪鉴定。结果自主研发的试剂提取鹿心的DNA浓度纯度均达到PCR的要求;在退火温度为63℃时引物的特异性最强;克隆测序后的鹿心DNA序列与鹿心mtDNA Cytb特异指纹区段序列一致;自主研发的试剂重现性、稳定性良好,灵敏度达到0.5%;对市售30个鹿心样品进行检测,伪品率为40%。结论建立的鹿心DNA指纹鉴定方法特异、准确、可靠,研制的鹿心DNA检测试剂盒操作简便、结果稳定。     

儿科院内感染革兰阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶检测及耐药分析

目的 了解儿科院内感染革兰阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases,ESBLs)的耐药特征,为产ESBLs细菌的治疗提供依据.方法 采用纸片琼脂扩散法和双纸片协同试验对大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性及产ESBLs菌株进行监测.结果 从322份标本中分离出116株大肠埃希菌,产ESBLs菌株阳性率为31.0%(36/116);85株肺炎克雷伯菌产ESBLs菌株阳性率为 31.8%(27/85);ESBLs阳性株对多种抗生素的耐药率高于ESBLs阴性株,只对亚胺培南敏感.结论 吉林地区儿科院内感染革兰阴性杆菌ESBLs的检出率高并呈多重耐药性.     

貂心与其伪品的脱氧核糖核酸指纹特征研究

目的 探讨貂心脱氧核糖核酸(DNA)指纹特征鉴定方法.方法采用碱裂解法提取新鲜貂心与伪品动物组织中线粒体DNA,设计特异性引物,进行PCR扩增.结果 从新鲜貂心及鸡心、鸭心、鹅心、兔心等伪品动物组织中提取出相同大小的16.8 Kb线粒体DNA,只有貂心DNA可扩增出1 100 bp大小的片段.结论 貂心DNA具有特异性指纹特征,所得貂心DNA指纹特征图谱可用于与其伪品动物心脏的鉴定及分析,且方法简便,结果可靠.     

原发性高血压SCNN1G基因多态性特征分析

目的:本实验通过分析SCNN1G基因rs5729的基因型及等位基因分布特点,探究此基因单核苷酸多态性与原发性高血压(EH)的关系。方法:采用高分辨率熔解曲线法(high resolution melting,HRM)对rs5729位点进行基因多态性分型检测。样本来自2018-06-2019-07吉林市中心医院高血压患者115例(病例组)和非高血压人群88例(对照组)。同时,在上述样本中随机选取81例采用测序法进行验证。结果:病例组的基因型频率是TT 67.82%、AT 25.22%、AA 6.96%,T、A等位基因频率分别为80.43%和19.57%;对照组中rs5729位点TT、AT、AA基因型频率分别为89.77%、9.10%、1.13%;T、A等位基因频率分别为94.32%和5.68%;病例组和对照组的基因型与等位基因频率在2组间分布差异有统计学意义(P<0.05)。结论:利用HRM法对SCNN1G rs5729位点进行基因分型,发现其在高血压人群中分布存在差异。     

45株儿科呼吸系统感染大肠埃希菌耐药性与耐药质粒相关性

目的:探讨儿科呼吸系统感染大肠埃希菌临床分离株耐药性与耐药质粒相关性,指导临床合理用药。方法:采用常规方法分离鉴定北京地区儿科呼吸道感染大肠埃希菌,纸片琼脂扩散法进行药敏试验,碱裂解法抽提质粒。结果:45株大肠埃希菌中25株为多重耐药,对氨苄两林、头孢呋辛、头孢唑啉的耐药率达100%,对头孢噻肟、头孢曲松、氨曲南、氨基糖苷类、复方新诺明及非β-内酰胺类抗菌药物的耐药率高于56%,并携带3～6个数目不等的大小约为1.2～60kb的天然质粒。结论:北京地区儿科呼吸道感染大肠埃希菌的耐药率高,其耐药性与细菌携带1.2～60kb的质粒密切相关。     

下呼吸道感染病原菌分布及耐药性监测

目的:了解吉林省油田总医院下呼吸道感染病原菌分布及耐药性.方法:收集该院痰标本865例,进行常规细菌培养及药敏试验.结果:痰培养共分离出582株细菌,阳性率为67.3%,主要分离菌为铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌和葡萄球菌.大肠埃希菌产ESBLs菌阳性率为42.3%,肺炎克雷伯菌为48.6%,产与非产ESBLs菌株的耐药率比较,除庆大霉素对大肠埃希菌无统计学意义外,其他测试抗菌药物对大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药率差异有统计学意义(P<0.01).耐甲氧西林葡萄球菌检出率较高,凝固酶阴性葡萄球菌为50.1%.金黄色葡萄球菌为65.3%.所有分离菌株对常用抗菌药物的耐药性检测结果显示抗菌药物的多重耐药现象严重.结论:痰培养的病原菌以革兰阴性杆菌为主,革兰阴性杆菌对亚胺培南和阿米卡星的耐药率最低:未发现万古霉素和替考拉宁耐药的葡萄球菌;病原菌多重耐药现象严重.     

基于PCR技术可视化鉴别金钱白花蛇方法的建立

目的 基于聚合酶链式反应(PCR)技术,利用核酸扩增产物,建立一种可以快速鉴定金钱白花蛇中药材真伪的可视化试纸条检测方法。方法 提取金钱白花蛇、赤链蛇及市售样本的基因;根据mtDNA Cytb序列进行对比分析,设计1对特异性鉴别引物,进行修饰物标记;建立鉴别PCR反应体系,使用核酸扩增产物,利用可视化试纸条对市售样本进行真伪鉴定。结果 鉴别引物可将正品金钱白花蛇中药材扩增出500~600 bp之间的特异性条带,而伪混品则不出现相应的特异性条带;可视化试纸条对市售样本进行检测,鉴别效果良好,灵敏度高,可准确鉴定中药材真伪。结论 可视化试纸条可以快速鉴别金钱白花蛇中药材真伪,稳定性高、特异性强,可应用于市场出售金钱白花蛇中药材的鉴定。