污水中大肠埃希菌携带第1类整合子的鉴定和特征分析

目的：探讨污水中大肠埃希菌携带第1类耐药整合子的分布、特征及所含基因盒的种类。方法：常规方法分离大肠埃希菌；纸片扩散法对9种抗生素进行耐药性监测和分析；PIER鉴定1类整合子阳性株；PCR产物测序并对结果进行分析。结果：42份标本中分离出24株大肠埃希菌，为多重耐药菌株，耐药谱为氨苄西林-复方磺胺-红霉素-四环素-链霉素-庆大霉素。有3株（12．5％）鉴定出1．6kb 1类整合子，PCR产物测序得知携带pse-1-aadA1、pse-1-aadA2、pse-1-aacA1基因盒，传递对β-内酰胺类-氨基糖苷类抗生素的耐药性。结论：1类整合子存在于污水来源的大肠埃希菌中，并携带相应的耐药基因盒，决定着对β-内酰胺类-氨基糖苷类抗生素的耐药性。     

PCR-核酸试纸条检测方法鉴别蛤蚧真伪

目的:蛤蚧为我国的名贵中药材,建立PCR-核酸试纸条检测方法对蛤蚧进行定性鉴别。方法:通过碱裂解法提取蛤蚧及其伪品的基因组DNA,以蛤蚧细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(CoⅠ)为靶基因,设计特异性引物,确定合适的PCR-核酸试纸条反应体系以及反应条件。结果:通过PCR-核酸试纸条对蛤蚧进行定性分析,正品蛤蚧在PCR-核酸试纸条上均出现2条带,伪品以及阴性对照均出现1条带。结论:PCR-核酸试纸条检测方法可实现短时间内蛤蚧可视化检测,操作方便,结果准确,可以为蛤蚧的DNA分子鉴别提供技术保障。     

梅花鹿鞭与伪品牛鞭细胞色素b DNA指纹鉴定

目的 探讨梅花鹿鞭及牛鞭线粒体细胞色素b(cytochrome b,Cytb)基因特异性片段特征,建立梅花鹿鞭的DNA指纹鉴定方法.方法 采用引物设计软件Primer Premier 5.0设计了用于鉴定梅花鹿鞭的特异性引物,用此引物对市售的梅花鹿鞭样本进行DNA指纹鉴定.结果 梅花鹿鞭能扩增出306 bp大小的片段,而牛鞭未能扩增出相应片段.结论 梅花鹿鞭DNA具有特异性指纹特征,所得梅花鹿鞭DNA指纹特征图谱可用于市售梅花鹿鞭的鉴定.     

儿科抗生素使用现状及细菌耐药性监测

目的探讨吉林地区儿科抗生素使用现状,监测细菌耐药性变化趋势,为儿科抗生素的合理使用提供参考指导。方法对2003年4月~2005年10月期间吉林市三级甲等医院儿科感染性疾病住院病例进行回顾性调查。采集患儿上呼吸道感染性标本,常规方法分离培养细菌和K-B法进行抗菌药物敏感性监测。结果662例感染病例均使用抗生素治疗,使用率为100%。病例中有12例（1.5%）根据药敏试验选用抗生素的记录。各种抗生素使用频次依次为头孢他定（55%）,罗红霉素（23%）和青霉素（22%）。242份上呼吸道感染标本共分离出366株细菌。革兰阳性球菌196株（53.6%）,以表皮葡萄球菌62株（31.6%）和金黄色葡萄球菌53株（27.0%）为主。革兰阴性杆菌170株（46.4%）,以肺炎克雷伯菌68株（40.0%）和大肠埃希菌49株（28.8%）为主。革兰阳性球菌对氨苄青霉素耐药率为86%,对其他抗生素的耐药率均超过18.5%。革兰阴性杆菌对氨苄西林耐药率高达79%,对其他抗生素的耐药率均超过26%。结论吉林地区儿童感染性疾病使用抗生素以青霉素、头孢类、大环内酯类为主,抗生素应用品种较单一,存在不合理使用抗生素现象。呼吸道分离出的革兰阳性球菌和革兰阴性杆菌对所使用抗生素有较高的耐药率。     

新生儿眼分泌物中耐甲氧西林葡萄球菌耐药性分析

目的:探讨新生儿结膜炎分泌物中耐甲氧西林葡萄球菌的分布及耐药特征,指导临床合理使用抗生素。方法:常规分离培养葡萄球菌,K-B法药敏实验。结果:40例新生儿患者眼分泌物中常规培养出葡萄球菌18例,血浆凝固酶阳性葡萄菌2例;血浆凝固酶阴性表皮葡萄球菌16例。药敏试验显示葡萄球菌对青霉素、苯唑西林、头孢呋辛、红霉素、克林霉素、环丙沙星、四环素、新诺明耐药率较高,对庆大霉素耐药率低。结论:本地区新生儿结膜炎分泌物中耐甲氧西林葡萄球菌分离率高,对抗菌药物表现出多重耐药。     

儿科院内感染肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶基因型检测及分析

采用琼脂纸片扩散法和双纸片协同试验,对儿科院内感染肺炎克雷伯菌的耐药性及产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株进行检测;用PCR检测耐药基因和DNA序列,分析产ESBLs菌株的基因型.结果 从422份感染标本中分离出201株肺炎克雷伯菌,产ESBLs菌株阳性率39.4%(63/201);携带blaCTX-M-11基因17株(17/63,26.9%)、blaTEM-1基因7株(7/63,11.1%)、blaSHV-2基因5株(5/63,7.8%).ESBLs阳性株对多种抗生素的耐药率高于ESBLs阴性株,只对亚胺培南敏感.提示吉林地区儿科院内感染肺炎克雷伯菌产ESBLs检出率高,并呈多重耐药性,携带三种ESBLs基因型.     

中药材龟甲细胞色素b基因特异性鉴定研究

 目的 建立一种实用、简便、准确的中药材龟甲DNA分子标记鉴定方法。方法 采用酚-三氯甲烷抽提法和盐析法提取龟甲mtDNA。从GenBank数据库中下载乌龟及常见伪品源动物mtDNA细胞色素b基因序列,经序列比较分析,设计特异性引物,并使用该引物对正品及其伪品mtDNA进行扩增并测序。结果 盐析法提取DNA的浓度高于酚-三氯甲烷抽提法,并且盐析法省时、经济。本实验所设计引物只能扩增正品龟甲mtDNA,测序结果与龟甲同源性100%。结论 盐析法是一套适合从龟甲中提取高质量DNA的方法,本实验所设计的引物具有高度特异性,可用于龟甲类药材的鉴定。     

北豆根总碱胶体溶液的制备及其治疗女性尖锐湿疣的临床研究

目的 寻找一种治疗女性尖锐湿疣（CA）的安全有效的药物及方法。方法 采用北豆根总碱、蚕蛹复合氨基酸、铜绿等矿物质铬合制成胶体制剂自制成北豆根总碱胶体溶液并用于临床。49例女性CA患者（观察组）外用北豆根总碱胶体溶液涂搽去除疣体和阴道内冲洗、带药,1次／d,7d为1个疗程;对照组30例用CO2激光仪一次性去除外生疣体,α-干扰素100万U局部封闭,隔日1次,2周为一疗程。结果 两组均达到首次治愈;随访8个月,观察组无复发,对照组复发19例（58．0％）,两组复发率比较,P〈0．01。结论 北豆根总碱胶体溶液局部涂搽和阴道内冲洗、带药治疗CA疗效确切,并能降低复发率。     

支原体在泌尿生殖道中感染及耐药性的研究进展

近年来，非淋菌性尿道炎(NGU)在性传播疾病中所占的比例有所升高，支原体是NGu的重要病原体之一，其中解脲支原体(Uu)和人型支原体(Mh)最多见。由于广谱抗生素的广泛使用，以及一些药物应用不当，致使耐药茵株不断出现，因此，合理有效的抗生素治疗是治愈支原体性泌尿生殖道炎以及防止并发症的关键。