人乳腺癌多西他赛耐药细胞株MCF7/Docetaxel的建立及其生物学特征

目的 建立人乳腺癌多西他赛耐药细胞株MCFT/Doeetaxel,探讨其生物学特征.方法 采用多西他赛中等浓度、间歇作用法建立耐药细胞株MCF7/Docetaxel,采用噻唑蓝(MTT)比色法测定其对Doeetaxel的耐药指数,观察冻存、撤药对耐药性的影响,比较耐药细胞株与亲本细胞株生长曲线、群体倍增时间及贴壁率的不同,流式细胞仪检测细胞周期,软琼脂实验检测细胞的恶性增殖能力,罗丹明实验检测其对药物的摄入、排出能力.结果 人乳腺癌耐药细胞株MCF7/Docetaxel的耐药指数为16.2,冻存对耐药性无明显影响,撤药培养可使耐药性降低,MCF7/Docetaxel与MCF7细胞的群体倍增时间分别为(39.89±0.43)、(27.51±0.55)h(P＜0.05),耐药细胞株倍增时间延长,生长缓慢,G2、M期细胞比例增加(39.50±3.83)%、(23.59±2.51)%(P＜0.05),克隆形成率明显高于亲本细胞67%、23%(P＜0.05),对罗丹明的摄入减少,排出增多.结论 成功建立人乳腺癌多烯紫杉醇耐药细胞株MCF7/Docetaxel,生长及耐药性稳定.

Abstract：

Objective To establish a docetaxel-induced human breast carcinoma drug-resistant cell line MCF7/Docetaxel and study its biological characteristics. Methods The drug-resistant cell line MCF7/Docetaxel was established in culture by exposing MCF7 parent cells to moderate concentration of docetaxel over a period of 11 months. The resistance index to docetaxel was determined by methyl thiazol tetrazolium (MTT) assay. Cell growth curve was drawed and the doubling time was accounted. Flow cytometry (FCM) was performed to determine cell cycle. Fluorescence activated cell analysis (FACS) was employed to determine the concentration of fluorescence dye of rhodamine 123 ( Rh123) in the cells for the evaluation of drug-absorptive and expelling capacity. Results The resistant index of MCF7/Docetaxel was 16. 2. When MCF7/Docetaxel was stored with docetaxel at - 196℃ for 3 months and then went back to the normal environment, its characteristic of anti-tumor drug resistance was still maintained. But after being cultured in RPMI 1640 without docetaxel for a period of 1 month, MCF7/Docetaxel showed a decrease in the resistant index. As compared with the parent cells, MCF7/Docetaxel exhibited a prolonged doubling time [(39. 89 ±0. 43 vs 27. 51 ±0. 55 h,P＜0. 05] and lower growth rate. The percentages of cells in G2 and M phases were significantly increased in MCF7/Docetaxel in comparison with those in MCF7 [(39. 50 ± 3. 83) % vs (23. 59 ± 2. 51) % , P ＜ 0.05]. In soft agar growth test, MCF7/Docetaxel cells formed more cell clones than MCF7 cells (67% vs 23% ,P ＜0. 05). Finally, the concentration of Rh123 in MCF7/Docetaxel was lower than that in MCF7. Conclusion The newly established stable cell line MCF7/Docetaxel possesses typical drug-resistant characteristics and its drug-resistant phenotype is stable.     

全胸腔镜下肺段切除术的临床应用

目的通过对102例实施肺段切除术患者的临床回顾性分析,探讨全胸腔镜下肺段切除术的安全性和可行性。方法回顾性的分析了1997年10月-2012年7月,上海市肺科医院胸外科共实施全胸腔镜下肺段切除手术102例。其中全胸腔镜左肺上叶舌段20例（19．61％）、左肺上叶后段4例（3．92％）、左肺上叶尖后段5例（4．90％）、左肺上叶尖前后段5例（4．90％）、左肺上叶尖段1例（0．98％）、左肺上叶尖前段1例（0.8％）、左肺上叶前段3例（2.94％）、左肺上叶前后段1例（0.8％）、左肺上叶舌段＋左肺下叶10例（98.0％）、左肺上叶后段＋右肺下叶1例（0.98％）、左肺下叶前内基底段2例（1．96％）、左肺下叶背段6例（5．88％）、左肺下叶前基底段1例（0．98％）、右肺上叶后段14例（13．73％）、右肺上叶尖段3例（2.94％）、右肺上叶尖后段5例（4.90％）、右肺上叶尖前段1例（098％）、右肺上前段3例（2.4％）、右肺上叶后段＋右肺下叶2例（1.96％）、右肺下叶背段10例（9.80％）、右肺下叶背段＋中叶2例（1．96％）、右肺下叶背段＋前基底段1例（0．98％）、右上后段＋右下背段＋左下背段＋左肺下叶基底段1例（0.98％）。结果本组患者肺功能MVV为510～146．1L／min,平均（93．8±20g）L／min,中位数93．4L／min;占640％～125．4％,平均（9.43±15．4）％,中位数96.0％。FEV,为127～3．97L,平均（268±0．7）L,中位数2．64L;占52o％～117．9％,平均（8.82±16．4）％,中位数85．6％。本组无手术死亡,无术后早期死亡（30d内）。本组手术时间90～330min,平均（1.68±5.51）min,中位数150min;术中出血50～1800mL,平均（275±402．8）mL,中位数150mL;术中使用闭合钉数2～12枚,平均（5.5±2.0）枚,中位数5枚;占位大小0．3～7．5cm,平均（2．6±1．6）cm,中位数2．5cm。本组术后引流量100～900mL,平均（300.87±91．95）mL,中位数275mL;术后引流管置管时间2～12d,平均（4．83±1.42）d,中位数4d;术后住院天数3～15d,平均（6.60±1.76）d,中位数6d。1例中转小切口开胸．开胸原因均为胸内广泛粘连。本组1例患者术后并发乳糜胸,经治疗好转出院。本组术后病理诊断AHH1例、肺泡上皮不典型腺瘤样增生3例、错构瘤4例、结缔组织增生1例、大细胞癌2例、结核肉芽肿8例、肺结核8例、肺囊肿3例、肺泡细胞癌9例、机化性肺炎3例、转移性腺癌3例、乳腺癌肺转移1例、鳞癌10例、腺癌22例、腺鳞癌1例、炎性实变4例、硬化性血管瘤3例、神经内分泌癌1例、肺脓肿1例、真菌性肉芽肿3例、支气管扩张10。结论全胸腔镜下实施肺段切除术是安全可行的,但术者必须具备丰富的全胸腔镜下操作经验和娴熟的技巧。     

雷公藤甲素增强三阴性乳腺癌细胞对顺铂敏感性的实验研究

目的:探讨雷公藤甲素是否可增强三阴性乳腺癌(TNBC)对顺铂的敏感性及其作用机制。方法 :MTT实验检测雷公藤甲素、顺铂、雷公藤甲素联合顺铂对TNBC细胞增殖的影响;细胞周期实验检测雷公藤甲对TNBC细胞周期的影响;Western blot实验检测雷公藤甲素对PARP1、XRCC1和RAD51蛋白的影响。结果:雷公藤甲素可抑制TNBC细胞的增殖,并呈剂量依赖性;MDA-MB-231细胞的IC50值为(36.37±3.4)nmol/L,BT549细胞的IC50值为(52.78±4.2)nmol/L;雷公藤甲素可将TNBC细胞周期阻滞于S期;30 nmol/L的雷公藤甲素可明显减弱PARP1、XRCC1和RAD51蛋白的表达,抑制RCC1/PARP1信号通路传导;雷公藤甲素可增强顺铂对TNBC的敏感性。结论:雷公藤甲素通过抑制RCC1/PARP1信号通路的传导,阻止顺铂引起的DNA损伤修复,增强TNBC细胞对顺铂的敏感性。     

Luminal B型乳腺癌骨转移患者的临床特点和预后分析

目的探讨luminal B型乳腺癌骨转移患者的临床特点和预后情况。 方法收集2004年1月至2012年1月郑州大学人民医院诊治的luminal B型乳腺癌骨转移患者128例,其中75例人表皮生长因子受体（HER）-2阴性,53例HER-2阳性,回顾性分析其临床特点和预后。 结果两组患者在骨转移确诊年龄、原发肿瘤大小、腋窝淋巴结转移数目和术后骨转移发生的时间方面的差异有统计学意义（χ²=4.477、6.927、12.209、11.222,P=0.034、0.023、0.002、0.004）。Luminal B型HER-2阴性乳腺癌患者发生骨转移后的中位生存时间为29.8个月,5年生存率22.7%,HER-2阳性乳腺癌患者分别为27.1个月和20.7%,两组患者骨转移后的生存时间差异无统计学意义（χ²=0.398,P=0.528）。 结论Luminal B型HER-2阳性比luminal B型HER-2阴性乳腺癌骨转移患者更具有发病年龄大、原发肿瘤直径大、腋窝淋巴结转移数目多、术后发生骨转移时间早等特点,但两种类型患者的预后无显著差异。     

心理护理干预对缓解新型冠状病毒肺炎疫情防控期间乳腺癌化疗患者焦虑、抑郁情绪的效果研究

目的探讨心理护理对缓解新型冠状病毒肺炎(新冠肺炎)疫情防控期间乳腺癌化疗患者焦虑、抑郁情绪的效果。方法选取2020-02—2020-03间在河南省人民医院乳腺外科接受乳腺癌术后化疗的56例患者。按随机数字表法分为心理护理组和常规护理组,各28例。采用焦虑自评量表(SAS)和抑郁自评量表(SDS)评估患者化疗前及第一个疗程结束后患者的焦虑、抑郁状态。结果化疗前2组患者的SAS评分、SDS评分差异无统计学意义(P>0.05)。一个疗程结束后,2组患者的SAS评分、SDS评分均较化疗前显著改善,其中心理护理组的改善效果优于常规护理组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在新冠肺炎疫情防控期间,加强对乳腺癌术后化疗患者的心理护理,可缓解其不良情绪,以良好的心理状态主动配合医护人员开展各项治疗和护理工作,有助于患者顺利完成化疗疗程。     

环乳晕切口联合术中彩超定位技术治疗乳房多发性纤维腺瘤效果分析

目的分析环乳晕切口联合术中彩超定位技术与麦默通(MMT)微创旋切术治疗乳房多发性纤维腺瘤的效果。方法选取2018-01—2018-06间在河南省人民医院接受乳房多发性纤维腺瘤切除术的146例患者。将采用环乳晕切口联合术中彩超定位技术的62例患者作为开放手术组,将接受MMT微创旋切系统手术的84例患者作为微创旋切组。比较2组的治疗效果。结果术后1周复查彩超,2组均未见腺瘤残留。随访3个月复查彩超,未见腺瘤复发征象。2组的VSS量化评分和Harris评分均较理想,而且患者的满意度均较高,差异均无统计学意义(P0.05)。结论环乳晕切口联合术中彩超定位技术与MMT微创旋切术治疗乳房多发性纤维腺瘤,均有理想疗效,可根据医院的设备条件、术者的技术水平及手术适应证个体化予以选择。     

立体定向放射外科治疗颅内肿瘤

伽玛刀(γ-刀)治疗颅内肿瘤已成为神经外科领域重要的治疗手段之一。我中心自1999年6月至2002年6月应用OUR—XGD旋转式伽玛刀治疗颅内肿瘤934例，疗效满意，现报告如下。     

脑缺血大鼠脑组织中Survivin、血管内皮生长因子、微血管密度检测

目的:探讨大鼠脑缺血组织中Survivin、血管内皮生长因子(VEGF)的表达与血管新生的关系.方法:144只SD大鼠随机等分为模型组、假手术组和正常对照组,每组分2周、4周、8周、12周4个亚组.模型组采用永久性双侧颈总动脉结扎方法制备脑缺血模型,假手术组不结扎双侧颈总动脉,余同模型组.采用免疫组织化学方法检测各组大鼠脑缺血组织中Survivin、VEGF蛋白和微血管密度(MVD)的变化.结果:模型组Survivin、VEGF在双侧大脑皮质和海马齿状回区神经元、胶质细胞及血管内皮细胞上均表达突出,2者在脑组织内的表达均在2周时为高峰,以后逐渐递减,8周时回升,但仍低于2周时,与正常组和假手术组相比,差异均有统计学意义(P<0.05).模型组MVD 2周时升高,8周时达高峰,12周时下降,与正常组和假手术组相比差异有统计学意义(P<0.05).结论:Survivin和VEGF在大鼠脑缺血组织中表达上调和表达的时空模式的高度重叠,提示2者之间存在密切协同关系,而2者与MVD表达部位的一致性提示2者与血管新生关系密切.     

恶性高位梗阻性黄疸的介入治疗

背景与目的:侵犯或压迫肝门部胆管的恶性肿瘤造成的胆道高位梗阻,因梗阻部位多位于胆总管上段、肝总管,左右叶肝管甚至互不相通,单侧PTBD引流只能局限于引流管头端所放置的单一分支肝管,部分病例PTBD术后黄疸没有明显减退,甚至短期内加重,导致病情进一步恶化。本研究探讨左右叶双侧PTBD结合内支架术治疗恶性高位梗阻性黄疸的疗效。方法:17例高位恶性梗阻性黄疸的患者(男性11例,女性6例,平均年龄63.4岁),行左、右叶双侧PTBD结合内支架治疗。置入2枚支架的15例;2例为一侧肝管至胆总管置入支架,另一侧留置引流管。15例PTBD术后行TAI/TACE或放疗。结果:全部患者PTBD手术成功。治疗后总胆红素明显下降,由(357.7±142.5)μmol/L降至(174.7±87.6)μmol/L。引流通畅中位时间8.9个月,全组生存中位时间11.2个月。结论:左右叶双侧PTBD结合内支架治疗高位恶性梗阻性黄疸近期疗效肯定,早期引流与多支引流同样重要。     

CT引导下带钩钢丝术前定位在胸腔镜下孤立性肺小结节切除术中的应用

Objective Video-assisted thoracoscopic surgery (VATS) provides a minimally invasive approach to resect small solitary pulmonary nodules (SSPN). The aim of this study is to evaluate the efficacy and safety of preoperative CT-guided hookwire localization for SSPN in VATS. Methods Hookwire was used to localize 26 SSPN under CT guidance in 24 patients (14 male, 10 female, age range 21-61 years, mean 52.3 years), preoperatively, and wedge resection was performed through VATS. The lesion size, distance from the lesion to parietal pleura, the time of localization and complications were evaluated. Results All the 26 pulmonary nodules were preoperatively detected and localized with hookwire under CT-guidance. The mean lesion size was 10.05 ± 3.08 nun in diameter, and the mean distance from lesion to parietal pleura was 10.09±2. 62 mm. The mean localization time was 20. 18±7.16 min, and then the nodules were removed by VATS within 18 ± 6. 65 min. The major complication of CT-guided hookwire localization was mild pneumothorax in 6 patients (25.0%), but no one needed chest tube drainage. The dislodgment of hookwire was found in only one patient (4.2%) during the operation, but the lesion was still successfully resected under VATS. Of those patients, 8 were confirmed to have a primary NSCLC by rapid pathologic diagnosis during VATS wedge resection, and then VATS lobectomies were performed. Condusion The preoperative CT-guided hookwire localization for small solitary pulmonary nodules is an effective and safe technique to assist VATS resection of the nodules.