9.1C3胞内抗体基因的克隆及其对9.1C3 分子表达的抑制作用

目的 获得9．1C3胞内抗体基因的真核表达载体,观察胞内抗体对9．1C3分子表达的抑制作用,为进一步研究9．1C3分子对NK细胞功能的影响打下基础。方法 设计引物,以9．1C3 ScFv基因为模板进行PCR扩增,引入蛋白质内质网定位所需的信号肽、KDEL以及作为表达检测标记的Etag序列。回收纯化PCR产物,酶切后连接到pUC19载体上,并进行序列测定。序列正确后切下胞内抗体基因片段,重组到真核表达载体pRc/CMV中,酶切鉴定后用DEAE－dextran方法瞬时转染真核细胞COS7,用胞内染色和Western blot方法检测胞内抗体的表达。接着用Lipofectamine把胞内抗体基因转入9．1C3阳性的Jurkat细胞,用FCM观察胞内抗体对9．1C3分子表达的影响。结果 DNA序列测定证明,通过PCR成功地为9．1C3 ScFv引入了内质网定位所需的信号肽、KDEL及E－tag序列,成功地构建了胞内抗体真核表达载体,通过胞内染色方法和Western blot证明胞内抗体在COS7中得到表达。转入Jurkat细胞后发现胞内抗体能下调9．1C3分子的表达水平。结论 以9．1C3 ScFv基因为模板PCR扩增得到9．1C3胞内抗体基因,并构建了真核表达载体。     

小鼠血小板/T细胞活化抗原1的表达分布与功能

目的研究小鼠血小板／Ｔ细胞活化抗原１（ＰＴＡ１）在小鼠组织及各种细胞系的表达分布与诱导,及其在杀伤性Ｔ细胞和ＬＡＫ细胞诱导中的作用。方法应用流式细胞仪技术分析ＰＴＡ１在小鼠组织及细胞系中的表达及诱导;用同种异体抗原诱导杀伤性Ｔ细胞,用ＩＬ－２诱导ＬＡＫ细胞,分别研究ＰＴＡ１特异性单克隆抗体对其分化的影响。结果小鼠ＰＴＡ１主要在Ｔ细胞系呈诱导性表达,参与杀伤性Ｔ细胞的分化,但不参与ＬＡＫ细胞的诱导。结论小鼠ＰＴＡ１与人ＰＴＡ１有相似的分布特点与功能,是一种进化中高度保守的白细胞分化抗原     

抗CD1d单克隆抗体的制备及其识别结构域的鉴定

目的:制备抗人CD1d单克隆抗体(mAb)并研究其结合特性。方法:应用淋巴细胞杂交瘤技术制备鼠源性抗人CD1d mAb。用免疫荧光染色和流式细胞术鉴定其识别位点。结果:获得1株分泌抗CD1d mAb的杂交瘤细胞株。mAb的腹水ELISA效价达10-6,为IgG1亚类,可识别293T细胞转染的CD1d分子的α1结构域。结论:获得1株可特异性识别CD1dα1结构域的mAb,为进一步研究CD1d的结构及功能提供了手段。     

硕士研究生<医学免疫学>教学初探

免疫学是一门新兴的前沿学科.随着分子生物学的发展,人类基因组计划的即将完成,以及人们对后基因组计划和结构生物学重要性的认识,每年都有众多与免疫功能相关的新分子被发现,大大地深化了对免疫应答本质的认识,并为免疫学技术的改进提供了理论依据.     

疳积散敷脐治疗小儿疳积59例报告

笔者临床用疳积散敷脐治疗小儿疳证共５９例。现报道如下：１临床资料５９例中,女３９例,男２０例;６个月～１周岁９例,１周岁～２周岁２６例,３周岁～４周岁１５例,４周岁～５周岁６例,５周岁～６周岁３例;轻型疳证３９例,重型疳证２０例。２药物制备和用法杏仁...     

谷氨酰胺和生长激素联合应用对大鼠氨基酸水平的影响

本文对化疗后大鼠肠外补充谷氨酰胺和生长激素 ,研究血浆和组织 (肌肉和小肠 )中游离氨基酸的变化 ,探讨谷氨酰胺和生长激素联合应用对氨基酸代谢的影响。材料与方法1.研究方法5 0只雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠平均体重 184ｇ± 12 .4ｇ。在手术日晨行中心静脉插管 ,随机分为 5组 ,每组 10只 :Ａ组普通饮食 (Ｃｈｏｗ) ;Ｂ组肠外营养 (ＰＮ) ;Ｃ组肠外营养加甘氨酰-谷氨酰胺双肽 (Ｇｌｙ -Ｇｌｎ) ;Ｄ组肠外营养加生长激素(ＧＨ) ;Ｅ组肠外营养加谷氨酰胺双肽和生长激素 (Ｇｌｎ加ＧＨ)。Ａ组提供普通饮食 ,其它组给予等氮 2 .5ｇ/ (ｋｇ·ｄ)、等…     

咨询门诊与精神科门诊初诊精神分裂症病人的诊治情况比较分析

目的 了解心理咨询门诊和精神科门诊中初诊精神分裂症病人的诊治特点。方法 随机抽取1999、2000、2001年一月份所有在上海市心理咨询中心和上海市精神卫生中心就诊的共550例初诊精神分裂症病人，进行回顾性比较分析。结果 在3个月内疗效上两种门诊之间差异没有明显的统计学意义；常用抗精神病药平均剂量咨询门诊略高于精神科门诊；合并用药咨询门诊明显多于精神科门诊；精神科门诊需住院治疗的比例高于咨询门诊；咨询门诊常用的前三种药物依次为：利培酮、氯氮平、氯丙嗪，而精神科门诊则为氯丙嗪、利培酮、奋乃静。结论 心理咨询门诊与精神科门诊对精神分裂症的诊治模式上稍显不同，但疗效相仿。     

细胞DNA荧光测量法及癌变进程分析

恶性肿瘤的诊断依据是癌细胞和组织的形态不典型性。这种不典型性基本上与细胞核DNA的异常有关。为了对癌细胞能作出定量的和客观的诊断,许多研究者采用了测定单个细胞核DNA含量的方法。然而,准确地测量核的DNA是困难的。已经出现了不少错误的或夸大的数据,以致使DNA测量本身的可靠性常常受到怀疑。最近,有人介绍了一种精细的细胞荧光测量技     

青年精神分裂症患者家庭情况调查及家庭心理干预研究

目的 探讨家庭心理干预对青年精神分裂症患者及家庭成员心理健康及家庭功能的影响.方法 将入选的60例青年精神分裂症患者及家庭随机分为干预组和对照组各30例,随访1年,干预组进行个别家庭治疗与团体治疗相结合的家庭心理干预;使用家庭亲密度和适应性量表、症状自评量表、简明精神症状量表、社会功能缺陷筛查量表对干预组和对照组分别在进入研究时、研究12个月末进行评定.结果 干预前两组家庭的实际亲密度、实际适应性和不满度(亲密度、适应性)、主要照料者的症状自评量表总分及人际关系敏感、焦虑、抑郁因子分、患者的精神症状、社会功能缺陷得分均无显著差异;干预后干预组与对照组的上述得分出现差异(P＜0.05);干预组自身在干预前后的上述得分存在显著差异(P＜0.01).结论 家庭心理干预能有效改善青年精神分裂症患者家庭的亲密度、适应性,降低对家庭的不满度;改善患者主要照料者的心理健康状况;有助于改善患者的精神症状;对患者的社会功能影响不显著.     

前庭大腺囊肿造口术80例临床观察

我院自1999年1月～2000年12月对妇科门诊就诊的前庭大腺囊肿病人均行造口术治疗,取得了良好的效果,与以往所施的囊肿剥除术相比有明显的优越性。现将临床资料总结如下。