基于PI3K/PTEN/VEGF的菟丝子总黄酮抗肝癌作用机制研究

目的：基于PI3K/PTEN/VEGF通路探讨菟丝子总黄酮（TF）体外抗肿瘤作用机制,考察合适的给药浓度,为菟丝子药材的临床合理应用提供参考。方法：以人肝癌细胞HepG2为实验对象,CCK-8法检测TF给药后的细胞活性,计算其IC 50值;Annexin V-FITC/PI双染法分析细胞凋亡坏死比例;实时荧光定量PCR （qPCR）法检测胞内磷脂酰肌醇激酶（PI3K）、人类第十号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因（PTEN）、血管内皮细胞生长因子（VEGF） mRNA的相对表达;酶联免疫吸附法（ELISA）检测缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、血管内皮细胞生长因子受体2、3（VEGFR-2、VEGFR-3）表达变化趋势。结果：相对阴性对照组,给药组细胞抑制率和凋亡率均具有良好的量-效正相关;qPCR结果显示TF给药可以显著的上调PTEN mRNA,下调PI3K、VEGF mRNA;ELISA结果显示HIF-1α、VEGFR-2、VEGFR-3蛋白的表达在给药后均有下降（P<0.01）。结论：菟丝子总黄酮有较好的体外抗肝癌药效,其作用可能与上调PTEN的表达对PI3K-Akt通路进行负调控诱导细胞发生凋亡、下调HIF-1α以及VEGF相关基因和受体蛋白的表达等作用机制共同发挥抗肿瘤作用。     

医学教育PBL教学实施方式的探讨

PBL教学模式是当今世界医学院校广泛运用的一种新教学方法。在PBL教学过程中,国内外医学院校纷纷采取了不同的实施方式。在我国现行教育体制下,要紧紧抓住教师、学生、教学资源三个基本要素,坚持以学生为中心,深化教师教改意识,实现从传统教学模式向PBL教学的转换。     

气滞胃痛颗粒中枳壳抗炎镇痛作用的构效组学

目的 采用构效组学研究方法,阐释气滞胃痛颗粒中枳壳黄酮发挥抗炎镇痛作用的药效物质。方法 在课题组前期体外药效筛选的基础上,开展枳壳黄酮体内药效研究,运用中药系统药理数据库和分析平台（TCMPS）,人类在线孟德尔遗传数据库（OMIM）,检索互作基因（STRING）等网络数据库,获取枳壳黄酮抗炎镇痛活性成分的核心靶点;采用计算机虚拟筛选技术将不同类型的枳壳黄酮与核心靶点进行对接,以各靶点与活性结构的综合评分总分为遴选原则,得到高结合活性的关键核心靶点;以靶点为桥梁,将枳壳中一类或多类化学成分结构与药效紧密关联,通过各类结构与药效靶点结合规律探讨药效明确的化合物与药效之间的构效关系。结果 枳壳黄酮对葡聚糖硫酸钠（DSS）结肠炎小鼠具有良好的抗炎镇痛药效,能够改善结肠炎小鼠体征,明显降低炎症因子白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-1β（IL-1β）水平（P<0.05）,获得枳壳黄酮类活性成分12个,按照母核进行结构归类,其中二氢黄酮类9个,黄酮类3个。经韦恩（Venn）交互分析,得到枳壳抗炎镇痛靶点167个,通过度值（Degree）和分子对接综合评分,选择前列腺素内过氧化物合酶2（PTGS2）和丝裂原活化蛋白激酶3（MAPK3）进行进一步的结构分析。通过结构分析发现,含有糖苷类结构的成分与抗炎镇痛靶点结合活性更高。结论 该研究在体内药效实验的基础上采用构效组学的研究方法,可以分析枳壳黄酮抗炎镇痛的物质基础,同时构效组学为中药药效物质的阐释提供新思路新方法。     

基于柴胡皂苷抗溃疡药效成分的药动药效相关性

目的:明确柴胡皂苷发挥治疗胃溃疡作用的化学成分,开展柴胡皂苷治疗胃溃疡药动药效相关性研究,为探讨其药效物质及作用机制提供前期实验基础。方法:采用高分辨质谱,一、二级质谱解析方式解析柴胡皂苷化学成分,同时取SD大鼠灌胃柴胡皂苷提取液(300 mg·kg~(-1))后不同时间点采血,采用高效液相色谱法对其入血成分柴胡皂苷B_2,柴胡皂苷D进行血药浓度测定;分别对柴胡皂苷B_2,柴胡皂苷D血药浓度与人体胃黏膜上皮细胞体外增殖率,超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA)进行时效相关性分析,评价柴胡皂苷作用特点及可能机制。结果:柴胡皂苷抗溃疡化学成分主要为柴胡皂苷A,D,B_2,I,E,prosaikogenin D,F,G;柴胡皂苷含药血浆与损伤的人体胃黏膜上皮细胞增殖率具有良好的相关性,其吸收也与血中MDA,SOD水平呈一定的时效关系。结论:该研究明确了柴胡皂苷发挥治疗胃溃疡作用的化学成分,探讨了入血成分与药效相关性,其作用机制可能与MDA,SOD蛋白调控有关。     

基于灰色关联度的旋覆花黄酮类有机成分与无机成分分析

目的:在建立不同产地旋覆花黄酮类有机成分指纹谱和无机成分轮廓谱的基础上,探讨有机成分与无机成分的相关性,为全面控制旋覆花药材的质量提供前期基础。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)建立有机成分指纹谱,采用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)建立无机元素轮廓谱,并通过灰色关联度法探讨两者的相关性。结果:从有机成分指纹图谱中获得18个共有指纹峰;从无机元素轮廓谱中获得13种共有特征元素;灰色相关分析结果显示1号色谱峰与K,Ca相关性最强,2号,17号色谱峰与Na,Mg,Mn相关性最强,4号,13号色谱峰与Zn相关性最强,5号色谱峰与Fe相关性最强,9号,11号色谱峰与Al相关性最强,相关系数均0.969 0。结论:该研究在控制旋覆花黄酮类有机成分和无机元素含量基础上进行关联分析,二者存在较强相关性,说明控制有机成分含量的同时也可以部分反应无机元素含量高低,为建立一种全面的质量控制方法及系统评价旋覆花药材质量提供实验参考。     

灰色关联分析中药蒲公英不同部位对RAW264.7细胞的抑制作用

目的 研究蒲公英不同部位化学成分的差异及其对RAW264.7细胞的抑制作用区别,探讨蒲公英不同部位的精准应用.方法 使用HPLC建立不同部位的液相图谱并进行成分指认,使用MTT法测定不同部位提取物对炎症细胞RAW 264.7增殖的抑制作用,使用灰色关联软件,将色谱峰的峰面积与抗炎药效相关联,计算每个成分的贡献率.结果 ...     

基于“质-量”双标的五味子质量分析方法研究

目的 建立以对照药材为基准物质的定性和不依赖多种对照品定量的五味子Schisandrae Chinensis Fructus药材“质-量”双标控制方法。方法 采用HPLC技术建立五味子对照药材的特征图谱，将其与供试药材图谱进行比对来辨别药材的真伪，即“质”；采用“五味子甲素”作为内标物质对特征峰化学成分进行相对定量来区分药材的优劣，即“量”。结果 建立的五味子药材“质-量”分析方法符合方法学考察要求，各供试药材与对照药材的相似度均大于0.97；规定了五味子药材特征峰化学成分相对含量下限。结论 该方法不依赖多种对照品，能清晰、快速地判断药材的真伪优劣，弥补目前五味子药材质量控制的不足，且操作简单，结果稳定、可靠。不仅完善中药材质量控制体系，还能减轻中药企业经济负担，为推动中医药事业可持续发展做出贡献。     

基于“质-量”双标的甘草质量分析方法研究

目的 建立以对照药材为基准物质的定性和不依赖多种对照品定量的甘草Glycyrrhiza uralensis药材“质-量”双标控制方法。方法 采用HPLC技术，以对照药材为基准物质建立甘草特征图谱，通过Q-TOF-MS技术，鉴定共有峰的化学成分，以对照药材和供试药材特征峰的相似度，明确药材真伪，即“质”；对内标成分“甘草酸”进行准确定量，以内标成分计，计算不同批次供试品中各特征峰的相对含量，取“平均数－标准差”作为特征峰化学成分相对于内标物质化学成分的相对含量下限，依据特征峰相对含量下限明确甘草药材优劣，即“量”。结果 建立的特征图谱及含量测定方法符合方法学考察要求；确定了10个共有色谱峰，鉴定出了5个化学成分，分别为芹糖甘草苷、甘草苷、芹糖异甘草苷、异甘草苷、甘草酸，各甘草供试药材与甘草对照药材的相似度均大于0.90；规定了甘草药材特征峰化学成分相对含量下限。结论 该方法不依赖多种对照品，能清晰、快速地判断药材的真伪优劣，为甘草的质量控制方法提供参考。     

基于“质-量”双标的侧柏叶质量分析方法研究

目的 建立以对照药材为基准物质的定性和不依赖多种对照品定量的侧柏Platycladus orientalis叶药材“质-量”双标控制方法。方法 采用HPLC技术，以对照药材为基准物质建立侧柏叶特征图谱，通过Q-TOF-MS技术，鉴定共有峰的化学成分，以对照药材和供试药材特征峰的相似度，明确药材真伪，即“质”；对内标成分“柚皮苷”进行准确定量，以内标成分计，计算不同批次供试品中各特征峰的相对含量，取“平均数－标准差”作为特征峰化学成分相对于内标物质化学成分的相对含量下限，依据特征峰相对含量下限明确侧柏叶药材优劣，即“量”。结果 建立的特征图谱及含量测定方法符合方法学考察要求；确定了11个共有色谱峰，鉴定出了4个化学成分，分别为杨梅苷、槲皮苷、穗花杉双黄酮、扁柏双黄酮，各侧柏叶供试药材与侧柏叶对照药材的相似度均大于0.90；规定了侧柏叶药材特征峰化学成分相对含量下限。结论 该方法不依赖多种对照品，能清晰、快速地判断药材的真伪优劣，为侧柏叶的质量控制方法提供参考。     

基于多个特征成分“质-量”双标的荆芥穗质量分析方法研究

目的 建立以对照药材为基准物质定性和不依赖多种对照品定量的荆芥穗药材“质-量”分析方法。方法 采用HPLC技术,以对照药材为基准物质建立荆芥穗特征图谱,通过Q-TOF-MS技术,鉴定共有峰的化学成分,以对照药材和供试药材特征峰的相似度,明确药材真伪,即“质”;对内标成分“胡薄荷酮”进行准确定量,以内标成分计,计算不同批次供试品中各特征峰的相对含量,取“平均数-标准差”作为特征峰化学成分相对于内标物质化学成分的相对含量下限,依据特征峰相对含量下限明确荆芥穗药材优劣,即“量”。采用HPLC技术建立荆芥穗对照药材的特征图谱,将其与供试药材图谱进行比对来辨别药材的真伪,即“质”;采用内标物质对特征峰化学成分进行相对定量来区分药材的优劣,即“量”。结果 建立的特征图谱及含量测定方法符合方法学考察要求;确定了11个共有色谱峰,鉴定出了6个化学成分,分别为木犀草苷、橙皮苷、木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷、木犀草素、香叶木素、胡薄荷酮,各荆芥穗供试药材与荆芥穗对照药材的相似度均大于0.90;规定了荆芥穗药材特征峰化学成分相对含量下限。结论 该方法不依赖多种对照品,能清晰、快速地判断药材的真伪优劣,为荆...