粗叶悬钩子根部提取物对急性肝损伤大鼠血清NO和肝组织SOD、MDA的影响

目的：探讨粗叶悬钩子根部提取物对大鼠急性肝损伤的治疗作用。方法：以化学方法提取总生物碱、总多糖、总黄酮为治疗药物，通过一次性腹腔注射99．5％CCl4建立大鼠急性肝损伤的模型，检测药物对大鼠血清NO及肝组织中SOD、MDA的影响。结果：粗叶悬钩子根部总生物碱能明显降低大鼠血清中异常增高的NO及肝组织中MDA含量（P〈0．01），提高肝组织中SOD活性，减轻大鼠肝细胞坏死程度。总多糖、总黄酮对大鼠血清NO及肝组织中SOD、MDA有一定影响但没有统计学意义。结论：粗叶悬钩子根部总生物碱具有减轻CCl4所致肝细胞损伤的作用，其作用机理可能与减轻脂质过氧化反应有关。     

海南耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的耐药基因分析

目的 检测海南省5家综合医院临床送检微生物标本中的耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌,了解其耐药基因及流行现 状。方法 收集2014年6月—2016年6月期间住院患者各种培养标本中耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌菌株,对其进行菌种鉴定和药 敏分析试验;然后对筛选出的菌株进行blaKPC-2 、blaNDM-1 和blaIMP 耐药基因PCR特异性扩增,扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳和测 序分析,经BLAST比对,确定耐药基因的基因型。结果 从5家医院的临床各种标本中,收集到75株耐碳青霉烯类肠杆菌科细 菌(CRE),主要为肺炎克雷伯菌45株占60.0%,阴沟肠杆菌13株占17.3%;科室分布主要为ICU占43.9%,儿科占10.7%;通过药 敏实验表明75株CRE除对替加环素(10.6%)、阿米卡星(23.3%)、左氧氟沙星(37.3%)、环丙沙星(40.0%)的耐药率较低外,第一到 第三代头孢及氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦的耐药率均为100%;第四代头孢头孢吡肟也达到89.3%,复方磺胺甲噁唑的耐药率 78.7%,哌拉西林/三唑巴坦耐药率也达到64%;75株CRE细菌中11株blaKPC-2 基因阳性占14.6%;25株为blaNDM-1 基因阳性占33.3% 和12株blaIMP 基因阳性占16%。结论 NDM-1型金属酶为海南省CRE菌株的主要耐药基因型,KPC-2型为首次发现占12%。未检 测出目的基因的CRE菌株的耐药机制有待于进一步的研究。     

基于液质联用技术的慢性肾脏病不同阶段患者血浆代谢组学研究

目的对慢性肾脏病(CKD)不同阶段患者血浆差异化合物进行分析,探讨CKD发病机制,为前期诊断提供依据。方法采用液质联用技术的代谢组学方法,绘制CKDⅠ～Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ期患者及健康对照者血浆代谢轮廓谱,利用Agilent MPP 12.1软件进行单因素方差分析、倍数检验及主成分分析等数据模式识别,寻找各组中血浆差异化合物,并对差异化合物进行结构鉴定与代谢通路分析。结果多变量统计分析结果显示,不同阶段CKD患者血浆标本存在明显差异,在血浆中找到鞘氨醇、牛磺酸、原卟啉Ⅸ等27个差异化合物。结论不同阶段CKD患者血浆中胆红素循环、鞘脂类代谢、类固醇类代谢等通路出现紊乱,该研究为CKD的临床诊断与治疗提供参考。     

海南发现4株产NDM-1多重耐药的肺炎克雷伯菌

目的分离和鉴定海南地区临床上发现的耐碳青霉烯类药物的肺炎克雷伯菌携带新德里金属β-内酰胺酶-1（NDM-1）基因的细菌。方法使用法国梅里埃API20E生化鉴定条和VITEK2全自动细菌鉴定仪及其配套的GNS试剂,鉴定出临床上耐亚胺培南和美洛培南的肺炎克雷伯菌;并经改良Hodge试验和亚胺培南,亚胺培南＋EDTA纸片法协同试验检测产金属酶类碳青霉烯酶,对目的菌株进行NDM-1耐药基因PCR特异性扩增,扩增后产物进行琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定;同时将目的菌株进行质粒接合转移试验分析其耐药机制,并对接合前后的药敏结果进行比较分析。结果从13株耐亚胺培南或美洛培南的肺炎克雷伯菌中,经亚胺培南,亚胺培南＋EDTA纸片法协同试验检出4株阳性,确定为产金属酶类碳青霉烯酶细菌。该4株产金属酶的肺炎克雷伯菌的改良Hodge试验均为阴性,NDM-1基因PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳和测序分析,确认此4株目标菌株均为携带NDM-1的耐药基因的耐药菌株;这4株接合子E．coli J53（NDM-1）对所有β-内酰胺类药物的MIC值较受体菌E．coli J53耐药性均有很大提高,经PCR扩增其接合子NDM-1基因片段分析证实4株接合子均接合成功。结论海南发现的4株耐碳青霉烯酶类的肺炎克雷伯菌为携带blaNDM-1基因,且其NDM-1耐药基因可通过质粒在不同菌株之间传递。     

中药构效组学——以气滞胃痛颗粒抗炎镇痛作用为例

中药的化学成分复杂、研究思路局限,导致其发挥药效的物质基础与作用机制尚不清楚,这也是我国传统中医药现代化发展面临的共性问题。计算机虚拟技术的引入为中医药研究提供了新的角度。该研究建立了构效组学的研究方法,在中药成分化学结构的基础上,运用计算机虚拟筛选技术,研究中药中不同种类化合物结构与药效之间的多组多效,组效对应关系,分析和预测中药及中药复方的物质基础及多靶点协同的作用机制,并以气滞胃痛颗粒的抗炎镇痛作用为例开展构效组学研究,为药效组分筛选、有效成分解析提供了支撑,为复方疗效的物质基础和作用机制研究及中药先导化合物的开发提供思路和方向,推动中药的现代研究和中医药的创新发展。     

基于微流控芯片的复方木鸡颗粒药效组分诱导肝癌HepG2细胞凋亡配伍规律研究＊

目的 探究复方木鸡颗粒中药效组分组成的各配伍组诱导肝癌HepG2细胞凋亡的药效学研究，筛选出药效组分最佳配伍比例，并将形成的新配伍复方与原复方进行药效差异性对比，从而较全面分析复方木鸡颗粒中药效组分诱导肝癌HepG2细胞凋亡的配伍规律，阐明其抗肝癌作用的药效物质基础。方法 以复方木鸡颗粒6种药效组分为研究对象，设计并制作该微流控芯片，并结合均匀设计方法，以细胞凋亡坏死率为评价指标，开展药效组分最佳配伍比例研究，进而形成新的组分配伍复方。结果 经灌注给药48 h后，复方木鸡颗粒各药效组分配伍组的细胞凋亡坏死率与空白组相比，均有显著性差异（P < 0.05），且药效组分核桃楸皮黄酮，菟丝子黄酮，山豆根生物碱，山豆根多糖，菟丝子多糖，云芝多糖最佳配伍比例是4.35：5.80：15.03：10.73：1.36：1.20，并通过药效差异性对比试验，证明两者在相同剂量时，药效结果无显著性差异。结论 本研究通过与微流控芯片技术的结合，初步揭示了复方木鸡颗粒药效组分抗肝肿瘤的组分组成规律，遵循中药组方理念，为抗肝肿瘤类新药的开发及临床联合用药奠定前期实验基础。     

甘石青黛膏对大鼠亚急性湿疹模型皮损淋巴细胞和角质形成细胞Bcl-2与Bax蛋白表达变化的影响

目的观察甘石青黛膏对大鼠亚急性湿疹模型皮损淋巴细胞和角质形成细胞B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)蛋白与Bax蛋白表达变化的影响,探究中药外治湿疹的分子生物学依据。方法造模前取大鼠正常皮肤组织,制作成石蜡切片备用,造模成功后分为治疗组和模型组,治疗组采用中药甘石青黛膏干预,模型组无干预,检测三组大鼠Bcl-2与Bax蛋白表达情况。结果造模前大鼠Bcl-2与Bax蛋白表达均呈阳性,且Bcl-2/Bax比率接近于1;治疗组Bcl-2蛋白表达呈弱阳性,模型组Bcl-2蛋白表达呈强阳性,两者相比具有显著统计学差异(P0.001);治疗组Bax蛋白表达呈阳性,模型组Bax蛋白表达呈弱阳性,两者相比具有显著统计学差异(P0.001);治疗组与模型组Bcl-2/Bax比率相比具有显著统计学差异(P0.001),后者明显高于前者;治疗组与健康组Bcl-2/Bax比率相比无统计学差(P0.05)。结论甘石青黛膏具有抑制Bcl-2蛋白表达,促进Bax蛋白表达,使细胞凋亡调控系统趋于平衡的作用。     

地榆活性组分指纹图谱建立及多指标成分含量测定研究

目的 采用超高效液相（UPLC）建立地榆Sanguisorba officinalis L.活性组分指纹图谱及没食子酸、儿茶素、阿魏酸3种成分含量测定方法,为地榆活性组分质量控制方法研究提供参考。方法 采用Agilent Poroshell 120 C₁₈色谱柱（2.7μm, 4.6×100 mm）,以1‰甲酸水-乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速0.8 mL/min,柱温30℃,检测波长210nm,建立不同产地地榆活性组分指纹图谱;采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012.130723版本）进行相似度分析,同时测定了不同产地地榆活性组分中3种成分的含量。结果 地榆活性组分指纹图谱中共标定了15个共有色谱峰,并指认出其中3种色谱峰,相似度评价结果显示8种不同产地地榆活性组分化学成分相似度较好,均在0.94以上;指标性成分含量测定结果显示,3种成分在一定质量浓度范围内线性良好,方法精密度、重现性良好,样品20 h内稳定,加样回收率在95%～105%之间。结论 本研究建立的指纹图谱结合多指标成分含量测定方法,简便、准确、稳定,可为地榆活性成分的质量控制及新药开发提供实...     

基于相关性分析的中药路路通抗肝肿瘤谱效关系研究

目的 基于灰色关联法及偏最小二乘法探讨中药路路通不同极性部位对人肝癌细胞SMMC-7721影响的谱效关系,揭示中药路路通抗肝肿瘤作用的物质基础。方法 采用HPLC法建立路路通不同极性部位的指纹图谱,以人肝癌SMMC-7721细胞作为体外模型进行抗肝肿瘤药效学评价;运用灰色关联度及偏最小二乘法分析法,将指纹图谱共有峰相对峰面积与不同浓度体外药效抑制率进行关联,建立不同极性部位与体外抗肿瘤的谱效关系模型。结果 6个不同极性部位指纹图谱中共标识20个指纹峰,其中采用灰色关联度分析法,路路通药材与抗肝肿瘤相关系数大于0.8的色谱峰共15个,0.5 mg/mL与1 mg/mL给药浓度时筛选相似性100%;其中采用偏最小二乘分析法,路路通药材对抗肝肿瘤药效贡献较大色谱峰共13个,0.5 mg/mL与1 mg/mL给药浓度时筛选相似性100%。结论 经灰色关联度分析法与偏最小二乘法分析法筛选结果进行比对发现,二者共有11个色谱峰相同,相似性为84%;将不同数学方法引入中药活性部位谱效关系相关性评价中,能更加真实、客观地得到中药发挥药效的药效物质单体,该研究为开展基于谱效关系的中药药效物质筛选及预测提...     

支付方式对产品偏好的事件相关电位研究

为了探究消费者使用支付方式如何影响产品购买偏好及其脑神经机制,根据心理账户理论,采用基于事件相关电位(ERP)脑电实验的双因素组内设计分析,即2(产品类型:实用型产品和享乐型产品)×2(支付方式:现金支付和非现金支付)。实验任务需要被试在随机出现的4种不同的购买情景下做出购买选择,并同时记录其选择时的脑神经电生理活动。结果表明,在早期认知阶段,消费者面对不同类型产品刺激时,对享乐型产品较实用型产品自动分配更多注意力且引起较大波幅P2成分((5.809±0.811)μV vs (4.878±0.944)μV,P<0.05);在认知过程阶段,消费者面对不同的支付方式,易产生决策冲突,现金支付较非现金支付会引起较小波幅P3成分((3.267±0.907)μV vs (3.913±0.833)μV,P<0.05);在认知决策阶段,现金支付享乐型产品较实用型产品的支付疼痛与购物内疚产生更大波幅晚期正成分波(LPP)成分((3.825±0.843)μV vs (2.929±0.769)μV,P<0.05),同时非现金支付享乐型产品较实用型产品的支付快感与购物愉悦均诱发强烈情绪唤醒,产生更大波幅晚期正成分波(LPP)成分((3.375±0.887)μV vs (2.03±0.768)μV,P<0.05)。因此,当消费者采用现金支付时,更偏爱实用型产品;当消费者采用非现金支付时,更偏爱享乐型产品。消费过程中的脑神经电生理分析对消费者、商家和支付机构均具有重要意义。