流行性出血热患者唾液中特异IgG抗体检测初探

流行性出血热患者唾液中特异ＩｇＧ抗体检测初探徐冰凌,李世清,佘家辉目前国内外流行性出血热（ＥＨＦ）的实验诊断多以血清为标本,应用免疫荧光法（ＩＦＡＴ）、血凝抑制实验（ＨＩ）、酶联吸附实验（ＥＬＩＳＡ）等方法。由于该病患者病情重、血管脆性增加,采血较为...     

从蚤体内分离流行性出血热病毒的研究

本研究从流行性出血热(EHF)病毒抗原阳性的褐家鼠体表收集缓慢细蚤(Leptop-sylla segnis)、开皇客蚤(Xenopsylla cheopis),经反复冲洗后制备悬液,并接种小白鼠乳鼠,分别经3、4代观察,乳鼠表现特异的病状,有的死亡。其脑、肺组织应用IFAT检查EHF病毒抗原阳性。阳性鼠脑悬液再接种Vero E_6细胞亦呈阳性。因而首次证实缓慢细蚤、开皇客蚤能自然感染EHF病毒,其在流行病学中的意义应进一步研究。     

窦汇区影像解剖的虚拟现实技术研究

目的　探讨虚拟现实（Virtual reality, VR）技术观察颅内窦汇（Torcular herophili, TH）区解剖及变异的价值。 方法　对45例未累及TH区结构的颅内脑膜瘤患者,以及21例三叉神经痛或面肌痉挛患者,行3D CE-MRV检查,再在VR工作站重建TH,观察其构成及引流特点。 结果　根据上矢状窦（Superior sagittal sinus,SSS）、直窦（Straight sinus,StS）和双侧横窦(Transverse sinus,TS)的吻合关系,TH区VR解剖形态分为3型：Ⅰ型18例,Ⅱ型15例,Ⅲ型33例。根据SSS汇入TS的方式分为4型：Ⅰ型18例,Ⅱ型26例,Ⅲ型17例,Ⅳ型5例。根据StS汇入TS的方式分为4型：Ⅰ型18例,Ⅱ型23例,Ⅲ型7例,Ⅳ型18例。TS引流优势表现为右侧为主25例,左侧为主9例,基本相等32例。 结论　TH区解剖变异性较大,VR技术是观察TH区解剖的有效方法,有助于了解TH区的解剖和引流特点,对临床诊断及TH区手术有指导意义。     

福建省沿海地区钩端螺旋体病流行特征分析

钩端螺旋体病（钩体病）是我省主要的传染病和人兽共患病。在５０年代后期、６０年代初期曾发生多起钩体病的暴发或流行，７０年代后期至８０年代初疫情下降，８０年代末至９０年代初疫情有所回升，近几年疫情又有下降且渐趋平稳。特别是５０、６０年代多次暴发或流行钩体病的沿海平原地区，７０年代已基本控制，从８０年代至今未出现钩体病的流行和暴发。对其流行趋势变化的特点，近年进行了流行病学调查，结合历史调查资料综合分析如下。１　发病人数及流行形式　我省沿海地区在５０、６０年代曾发生多起钩体病的暴发流行，７０年代又出现…     

登革病毒Ⅰ～Ⅳ型外膜基因的表达及重组抗原的血清学应用

目的选取登革病毒Ⅰ～Ⅳ外膜蛋白DⅢ区基因进行克隆、表达和纯化，以获得能应用于血清学诊断的纯化重组蛋白。方法用RT—PCR法扩增登革病毒Ⅰ～Ⅳ毒株外膜蛋白DⅢ区基因，与表达载体pET-30a连接，构建重组表达载体，在大肠杆菌B121（DE3）中表达，重组蛋白用电洗脱法进行纯化。纯化的重组蛋白用间接ELISA法、捕获ELISA法和夹心ELISA应用于血清学检测，检测结果与间接免疫荧光法进行比较。结果重组表达质粒在大肠杆菌中表达高产量的重组蛋白，纯化的重组蛋白对登革热病毒感染者具有很高的检出率，与间接免疫荧光法检测结果基本相符。结论登革病毒Ⅰ～Ⅳ外膜蛋白DⅢ区基因在大肠杆菌中成功表达，重组蛋白可应用于血清学检测。     

应用纯化重组外膜脂蛋白LipL32检测钩端螺旋体病抗体

目的 建立以纯化重组外膜脂蛋白LipL32为基础的钩端螺旋体(钩体)病抗体的检测方法 .方法 以摹因重组技术获取重组钩体外膜脂蛋白LipL32,以该蛋白为抗原,分别使用间接法和夹心法ELISA应用于不同人和鼠血清的检测,检测结果 与钩体显微镜凝集试验(MAT)进行比较,同时人血清的检测结果 还与进口试剂盒比较.结果 纯化的重组蛋白检测9例钩体确诊病例双份血清标本,三种ELISA法的检出率与MAT无明显差别.检测45份MAT阳性标本,间接法ELISA敏感性为71.11%(32/45),夹心法ELISA为80.00%(36/45),而进口 ELISA阳性13份,占28.89%(13/45),25份可疑占55.56%(25/45).特异性检测,MAT阴性血清69份,间接和夹心法ELISA特异度均为97.10%(67/69),其中检测门诊体检血清43份,间接和夹心法ELISA均为阴性,进口ELISA检测14份,也为阴性.检测非钩体发热病例血清标本16份,间接和夹心法ELISA共检出2份阳性,进口ELISA则是1份阳性,12份可疑.检测梅毒螺旋体质控阳性血清10份,四种方法 均为阴性.重组蛋白检测鼠血清标本274份,夹心法ELISA的敏感性为86.75%(131/151),特异性为99.19%(122/123),符合率为92.34%(253/274),与MAT检测结果 相符.结论 重组LipL32蛋白具有结合活性,可应用于钩体血清抗体的检测,其中夹心法ELISA对鼠血清钩体抗体的检测显示较好的敏感性和特异性,适用于钩体病现场血清流行病学大样本调查.     

炭疽攻击对人类的威胁及防御策略

生物恐怖由来己久，最近美国炭疽事件引发的恐慌己波及世界。本文主要从生物攻击的角度分析了炭疽的生物学特性及其在生物武器中的地位对人类的威胁；简述了炭粗的感染类型及传播机制和防制措施，以及疫苗在抵御炭疽性生物恐怖活动中的作用和局限性，并宏观地指出遏制生物恐怖活动威胁的4个重要策略。     

流行性出血热患者病后血清中特异性抗体持续时间的调查

本文利用我国分离的EHF病毒适应A-549细胞制作的抗原片,应用IFAT法对EHF患者病后血清中特异性抗体持续时间作了调查。共调查了123份血清,阳性64份,阳性率52.03%,其中70%以上病人病后4年之内血清中含有特异性抗体,5年以后明显下降,20~22年尚有31.82%,可检出特异性抗体;病后4年之内阳性血清中有40%滴度在1:40以上,高者大于1:640, 5年之后滴度明显下降,此后维持在较低的水平。     

福州郊区登革热媒介防制措施与效果

目的：1999年夏秋季福州郊区发生登革热暴发流行,白纹伊蚊是当地传播媒介,为迅速控制疫情,在流行区实施以灭蚊为主的防制措施,方法：开展以健康教育,环境治理,清除无用积水和减少媒介滋生环境为主的爱国卫生运动,使用高效氟 氰菊酯和强力克敌等拟除虫菊酯类杀虫剂,以20mg/m2实行滞留喷洒和空间喷洒灭蚊,灭蚊前,后调查白纹伊蚊种群密度,以房屋指数,容器指数,布雷图指数和成蚊刺叮率评价效果,结果：灭蚊前白纹伊蚊房屋指数56．5,容器指数54．5,布雷图指数175．5;灭蚊后分别下降为2．4,11．5和4．0,下降率分别为95．8％,78．9％和97．8％,刺叮率从灭蚊前平均42．3只／人工小时下降为零,从10月12日后未再发现新病例,结果：防制制度得当有效,白纹伊蚊种群密度显著下降,登革热流行迅速得到控制。     

汉坦病毒A_(537)核蛋白基因的分段表达及其产物抗原活性的研究

目的构建汉坦病毒S基因不同截短片段的重组表达质粒,并选择表达高活性的重组抗原应用于血清学诊断。方法从HTN型A537株基因组中扩增出S全长基因,构建TA-A537S克隆;以此为模板扩增出不同长度的截短的S片段,定向插入表达载体pET-30a,获得含不同片段的重组表达载体(pET-1-112,pET-1-119,pET-1-137,pET-1-200,pET-1-292,pET-1-316,pET-1-429,pET-6-119,pET-6-137,pET-6-200,pET-6-292,pET-6-405,pET-16-112,pET-16-137,pET-26-137),并在大肠杆菌BL21(DE3)中分别进行了表达;应用SDS-PAGE观察重组蛋白表达情况,应用Western blot分析重组抗原的活性,采用电洗脱、亲和层析等方法纯化重组蛋白,用间接ELISA法对重组蛋白的抗原性及抗原特异性进行检测。结果成功构建了含HV S全基因的TA-A537S克隆质粒;以截短的S基因片段构建的重组表达质粒中,既有表达又有活性的有pET-1-112,pET-1-119,pET-1-200,pET-1-292,pET-1-429,pET-6-119,pET-6-200,pET-6-292,pET-6-405;其中pET-6-119表达量最高且活性强;经电洗脱或Ni-NTA亲和层析可获得高纯度的重组蛋白e6-119;纯化的e6-119重组蛋白应用于ELISA检测疑似HFRS和不明原因的发热病人血清IgG,与IFAT比较,其敏感性和特异性分别为94.7%,95.6%。结论pET-6-119表达量高,易于纯化,并且具有良好的抗原性,是一种廉价、安全、可靠的诊断抗原。