HPLC-DAD法测定武当地区马尾松不同部位中儿茶素的含量

目的:建立武当地区马尾松中不同部位(花序、松针、嫩松枝)儿茶素含量测定方法,为马尾松资源合理开发利用提供参考。方法:采用高效液相色谱-二极管阵列检测器法。色谱柱为Phenomenex C18柱(250mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B),进行梯度洗脱;检测波长为280 nm;柱温为30℃;进样量为20μL。结果:儿茶素的质量浓度在15.55~155.5μg·m L-1范围内与其峰面积呈良好的线性关系(r=0.9995);精密度、重现性、稳定性试验的RSD%均小于2%;平均加样回收率为99.4%,RSD%=1.99%(n=6)。马尾松不同部位中儿茶素的含量依次为花序﹥松针﹥嫩松枝。结论:马尾松的花序、松针、嫩松枝中均含有儿茶素,但含量差异较大,以马尾松花序含量最高,高达6.53 mg·g-1,具有较高开发价值。     

丝素蛋白/磷酸钙骨水泥体外强化骨缺损椎体

背景:目前常用的椎体强化剂筛选方法是将尸体标本制成骨折模型,然后进行材料的灌注,这种模型很难进一步应用于体内实验.目的:制备一种椎体骨缺损模型,评价骨水泥增强后的力学性能.方法:将48个新鲜成年绵羊腰椎单椎体标本随机分为8组.取4组标本,利用直径分别为2.0,4.0,6.0,8.0 mm的钻头钻入椎体10.0 mm制备骨缺损椎体模型,测量单椎体的抗压强度和刚度,与正常椎体组进行比较.根据生物力学测试结果选择一固定直径,将剩下的3组制成骨缺损模型,然后分别注入磷酸钙骨水泥、丝素蛋白/磷酸钙骨水泥及聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥,模拟体液环境固化24 h后进行生物力学测试.结果与结论:不同直径的椎体骨缺损模型中,随着缺损直径增大,其抗压强度与刚度呈逐渐下降趋势,直径为6.0 mm下降明显.选择直径为6.0 mm钻头制备骨缺损椎体模型,丝素蛋白/磷酸钙骨水泥组及聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥组的抗压强度和刚度与正常椎体组相比无明显差别(P > 0.05),而磷酸钙骨水泥组的抗压强度及刚度均明显低于正常椎体组(P < 0.05).说明缺损直径为6 mm,深度为10 mm绵羊椎体骨缺损是一种合适的椎体骨缺损模型,保持了椎体外形的完整,可用来判断椎体强化剂的体外性能,进一步用于体内实验.丝素蛋白/磷酸钙骨水泥能有效即时强化骨缺损椎体.     

组织工程化脂肪基质细胞诱导脊柱融合的实验研究

目的 探讨组织工程化脂肪基质细胞诱导脊柱融合的能力.方法 从成年大鼠腹股沟处无菌获取脂肪组织,消化分离培养出脂肪基质细胞.在大鼠脊柱融合模型中将32只大鼠随机分为4组,每组8只,分别植入骨形态发生蛋白-2(BMP-2)基因重组的腺病毒载体转染的脂肪细胞(A组)、LacZ基因重组的腺病毒载体转染的脂肪细胞(B组)、未转染脂肪细胞(C组)、胶原海绵对照(D组).测定A组和B组的BMP-2的定量表达.比较4组术后4、6、8周X线片评分.8周后处死大鼠,进行MicroCT扫描分析和组织学观察.结果 ELISA法结果显示A组BMP-2表达水平为3.46 ng/mL,而B组无BMP-2表达.A组4、6、8周X线片评分分别为(4.56±1.01)分、(4.72±0.24)分、(4.92±0.13)分,均明显高于其他组,差异有统计学意义(P＜0.05).Micro CT和组织学切片均显示A组全部获骨性融合,而其他组均未融合.结论 组织工程化的脂肪基质细胞能够很好地诱导脊柱融合,有望成为一种新颖、有效的治疗方法.

Abstract：

Objective To assess the capability of inducing spinal fusion by adipose derived stromal cells in a rat model. Methods Adipose derived stromal cells were isolated from inguinal fat pads in rats.In the rat model of spinal fusion,32 rats were randomized into 4 groups.In group A,the cells infected with AdBMP-2 were implanted.In group B,cells infected with AdLacZ were implanted.In group C,uninfected cells were implanted.In group D,only collagen sponges were implanted.Expressions of BMP-2 were quantified in groups A and B.The radiographic scores were compared at weeks 4,6 and 8 among the 4 groups.After sacrifice at week 8,the spine samples were assessed by radiographs,MicroCT,and histological analysis. Results ELISA revealed a 3.46 ng/mL expression of BMP-2 in group A but no expression in group B.The mean radiographic scores for group A at weeks 4,6 and 8 were 4.56 ± 1.01,4.72 ± 0.24,4.92 ±0.13,significantly higher than those for the other groups ( P ＜ 0.05) .MicroCT and histological analysis revealed spinal fusion in all the rats in group A.None of the rats in the control groups developed fusion.Conclusion Because tissue engineered adipose derived stromal cells can induce spinal fusion,they may be a promising strategy for spinal fusion in the future.     

反相高效液相色谱法测定口腔溃疡涂剂中甲硝唑和盐酸丁卡因的含量

目的：建立以反相高效液相色谱法测定口腔溃疡涂剂中甲硝唑和盐酸丁卡因含量的方法。方法：色谱柱为Thermo ODS hypersilC18（50mm&#215;4．6mm，5μm）；流动相为甲醇-水-乙腈-三乙胺（35：50：15：0．7）（用冰醋酸调pH=6．8）；流速1．0ml&#183;min^-1；检测波长为310nm；柱温20℃。结果：甲硝唑和盐酸丁卡因分别在20．2～161．6μg&#183;ml^-1（r=0．9994）和6．68～53．44μg&#183;ml^-1（r=0．9993）范围内线性关系良好，平均回收率分别为99．89％（RSD0．62％）和99．84％（RSD0．67％）。结论：本法简便、快速、重复性好，可用于口腔溃疡涂剂的质量控制。     

川芎挥发油脂质体制备工艺研究

目的:研究川芎挥发油脂质体最佳制备工艺及处方.方法:采用薄膜分散法制备川芎挥发油脂质体,以包封率为评价指标,以正交设计优化处方和制备工艺,以紫外-可见分光光度法测定其包封率.结果:最佳工艺处方为:卵磷脂与挥发油的比例为1:1,卵磷脂与胆固醇的质量比为3:1,PBS缓冲溶液pH为6.8.结论:经优化得到的川芎挥发油脂质体处方合理,工艺可行,包封率较高.     

低频脉冲磁场对兔膝关节软骨细胞白介素-1β、肿瘤坏死因子-α表达与分泌的影响

目的：测定在低频脉冲磁场（Low frequency pulsed electromagnetic field,LFPEMF）刺激的情况下,兔膝关节软骨细胞白介素-1β（Interleukin-1β,IL-1β）与肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α,TNF-α）表达与分泌的变化。方法：分离培养由兔骨髓干细胞（Marrow stem cells,MSCs）诱导分化形成的软骨细胞,分别使用不同强度的LFPEMF进行电磁辐射刺激,用免疫印迹法测细胞中IL-1β与TNF-α的表达状况,并用ELISA检测细胞培养液中IL-1β与TNF-α的水平。结果：施加LFPEMF的兔膝关节软骨细胞中IL-1β与TNF-α的表达无明显差异,但其培养液中IL-1β与TNF-α的水平有明显降低,并且随着施加脉冲磁场刺激强度的增加,IL-1β与TNF-α的降低程度增强。结论：LFPEMF可以抑制体外兔膝关节软骨细胞IL-1β与TNF-α的分泌。     

武当地区马尾松松针中原花青素含量测定研究

目的 探讨武当地区马尾松松针中原花青素的含量测定方法。方法 采用高效液相色谱法测定松针中原花青素的含量。色谱柱为Sum Fortis C₁₈(4.6 mm×150 mm,5 μm),流动相为乙腈∶水(15∶85),流速为0.6 mL·min-1,柱温30℃,检测波长为280 nm。结果 经方法学考察,原花青素在0.258～2.58 g·L-1范围内,峰面积与所试浓度线性关系良好,准确度高,精密度好。武当地区松针样品中原花青素含量为44.65 mg·g-1。结论 该方法操作简便,有效成分原花青素的含量较高,开发前景广阔,旨在其进一步研究提供依据。     

“武当松针茶”中莽草酸的提取工艺优选及含量测定

目的：优选“武当松针茶”中莽草酸的提取工艺,并建立其含量测定方法。方法：采用反相高效液相色谱法-二极管阵列检测器测定“武当松针茶”中莽草酸的含量。通过正交设计试验,分别以水和不同浓度的甲醇为提取溶剂考察料液比、超声功率和超声时间对莽草酸含量的影响。结果：莽草酸在10.01～101.1 μg /ml(r=0.9995)范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率为99.5%,RSD=1.93%(n=6)。以水为提取溶剂,正交试验较佳提取条件为料液比1：50,超声功率200W,提取45min;以甲醇为提取溶剂,正交试验结果为料液比1:40,甲醇浓度40%,超声功率500W,超声时间45min。莽草酸的平均含量分别为36.33mg/g、38.62mg/g。结论：选取最佳提取工艺为40%甲醇为提取溶剂,料液比1:40,超声功率500W,超声时间45min,同时建立的含量测定方法稳定可靠,可用于提取和测定“武当松针茶”中莽草酸的含量。     

129例药疹病例回顾性分析

目的:研究药物使用与药疹之间的关系,探讨药疹的防治方法。方法:收集近5年发生的药疹不良反应和住院药疹病例129例,对其临床资料进行回顾性分析。结果:主要致敏药物依次为抗菌药物(77例,占59.69%)、中药类(18例,占13.95%)、解热镇痛药(16例,占12.40%);主要药疹类型为发疹型(40例,占36.03%),其次为荨麻疹型(36例,占32.43%)、固定药疹型(15例,占13.51%);静脉给药是引起药疹的主要途径(91例,占70.54%)。结论:诱发药疹的主要致敏药物是抗菌药物及解热镇痛药,中药引起药疹的发生率上升较快,加强用药管理和患者安全用药意识是防治药疹的有效措施之一。