微小RNA-548c-3p通过靶向调控PCNA基因表达对喉癌细胞增殖及凋亡影响的研究[论著]

目的　探讨微小RNA-548c-3p（miR-548c-3p）对喉癌细胞增殖及凋亡的影响及其作用机制。方法　用miR-548c-3p mimic、增殖细胞核抗原（PCNA）-siRNA及其阴性对照分别或同时转染喉癌TU686和M4e细胞,用qRT-PCR与Western blot法检测miR-548c-3p和PCNA的表达;MTT法和流式细胞术分别检测转染细胞的增殖和凋亡;双荧光素酶报告基因实验观察miR-548c-3p和PCNA的靶向关系。Western blot法检测PCNA、细胞周期蛋白1（CyclinD1）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白（Bax）的表达。结果　miR-548c-3p的表达量在癌旁组织（0.74±0.10）、喉癌组织（1.94±0.16）,TU686细胞（0.35±0.07）和M4e细胞（0.41±0.03）中均呈低表达,而PCNA mRNA和蛋白均呈高表达,差异有统计学意义（P 均＜0.05）。证实PCNA上存在miR-548c-3p的结合位点。上调miR-548c-3p可抑制细胞增殖及CyclinD1、Bcl-2的表达,并可促进细胞凋亡及Bax的表达,差异有统计学意义（P 均＜0.05）;上调miR-548c-3与抑制PCNA对细胞增殖及凋亡的作用相似。pcDNA-PCNA显著减弱miR-548c-3p mimic对细胞增殖和凋亡的作用。结论　miR-548c-3p通过抑制PCNA表达而降低喉癌细胞增殖能力并诱导细胞凋亡。     

不同生长年限及不同采集时间对北细辛根挥发油的影响

目的：根据挥发油的含量和油中主成分，确定细辛根的最佳采收期。方法：用药典规定的方法测定北细辛根及根茎的不同样品中挥发油的总含量，用气相色谱-质谱-计算机联用技术分析其挥发油的成分。结果：测定不同生长年限及不同采集时间的上述植物根及根茎的样品，得到这些根及根茎样品的总挥发油含量和油中9种主成分的相对含量。结论：4年生以上的北细辛报及根茎可作药用。最佳采收期为4月、5月和9月。     

中药细辛的本草考证

目的：阐明古代细辛的基源及使用状况等。方法：查考本草中细辛的记文及附图，比较相关植物的形态及分布。结果；历代以华细辛为正品细辛，仅梁代本草和部分明清代本草亦以北细辛和汉城细辛为正品，宋代主要本草将杜衡、青城细辛之日误作细辛的图收载。细辛历代药用根部，各本草言其无毒或有毒。结论：历史上华细辛始终被认为是正品细辛，细辛品种混乱与古本草错载附图有关，应研究来源于不同植物和药用部分的细辛的疗效及毒性。     

给予原发性急性闭角型青光眼伴白内障患者超声乳化白内障摘除合并房角分离术的临床研究

目的:评析给予原发性急性闭角型青光眼伴白内障患者超声乳化白内障摘除合并房角分离术治疗的临床效果。方法:依据前瞻性研究方式将92例(92只眼)原发性急性闭角型青光眼伴白内障患者分为对照组和观察组,每组各46例。对照组患者行超声乳化白内障摘除合并小梁切除术治疗;观察组患者则行超声乳化白内障摘除合并房角分离术治疗。术毕统计比较两组患者手术治疗效果、术后并发症等方面的差异。结果:对比两组患者手术前后视力、眼压、中央前房深度与房角宽度等指标均有所改善(P<0.05),观察组患者的改善更为明显(P<0.05);观察组患者的术后并发症率为8.7%,与对照组的28.3%相比显著更低(P<0.05)。结论:给予原发性急性闭角型青光眼伴白内障患者超声乳化白内障摘除合并房角分离术治疗,有助于患者眼压降低以及中央前房深度、房角宽度的增大,且术后患者并发症少,不失为一种合理的手术方案。     

富血小板纤维蛋白对根尖牙乳头干细胞生物学性能的作用研究

目的　研究富血小板纤维蛋白（platelet rich fibrin，PRF）对根尖牙乳头干细胞（stem cells from apical papilla，SCAP）生物学性能的作用，探讨其应用于牙髓再生治疗（regenerative endodontic treatment，RET）、促进年轻恒牙牙根继续发育的机制。方法　原代分离培养SCAP，抽取静脉血获取PRF。实验按所用PRF的体积不同分为4组：1/8PRF组、1/2PRF组、1PRF组、0PRF组（对照组）。分别收集各组PRF上清液，制备条件培养基。通过MTT法检测PRF对SCAP增殖的影响；对经不同PRF条件培养基预处理的SCAP进行成骨诱导，应用Western Blot检测牙本质涎磷蛋白（dentin sialophosphoprotein，DSPP）、牙本质基质蛋白1（dentin matrix protein 1，DMP1）、骨钙素（osteocalcin，OCN）的表达水平，检测PRF对SCAP成牙本质或成骨分化的影响。结果　在条件培养基培养3 d和5 d时，与对照组相比，实验组PRF均显著促进SCAP的增殖（P < 0.05），3 d和5 d时，1/2PRF组促进SCAP增殖作用最强（P < 0.05）。PRF条件培养基预处理的SCAP经成骨诱导后，高表达DSPP和DMP1（P < 0.05）。结论　PRF可显著促进SCAP增殖和向成牙本质细胞分化，为PRF应用于RET奠定了生物学基础。     

甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移规律及影响因素分析

目的：探讨甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移规律及其相关影响因素,为甲状腺乳头状癌颈部淋巴结清扫术提供一定的临床依据。方法：回顾性分析314例甲状腺乳头状癌患者的临床资料。314例患者中,行甲状腺腺叶峡部切除、中央区淋巴结清扫术79例,甲状腺全切、中央区淋巴结清扫术173例,甲状腺全切、中央区淋巴结清扫术、侧颈部改良根治性颈部淋巴结清扫术62例。手术中清扫出淋巴结1～55个,其中阳性淋巴结0～14个。结果：314例患者中经病理证实共有168例（53．50％）患者有淋巴结转移,其中中央区淋巴结转移159例（50．64％）,中央区＋侧颈转移淋巴结55例（17．52％）,单纯侧颈淋巴结转移9例（2．87％）。患者年龄、肿瘤直径、甲状腺被膜受侵犯、临床分期是甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移的影响因素（P〈0．05）。结论：甲状腺乳头状癌患者最常发生中央区淋巴结转移,应常规进行中央区淋巴结清扫术。     

46,XX男性综合征的遗传学诊断和临床分析

46,XX男性综合征,亦称46,XX男性性反转综合征。性反转综合征是一类罕见的性分化异常疾病,分为46,XX男性和46,XY女性（Swyer综合征）两型。     

医学研究生专业认同与时间管理及人格的关系

医学是处理人类健康问题的一门科学,医学的发展依赖于医学研究人员,而医学研究人员对专业的认同在很大程度上影     

论历代本草著作之中药分类方法

中药分类是学习、应用和研究药物的一种手段,合理的分类方法有助于促进中药教学、临床应用和科研的发展。自我国现存第一部本草专著《神农本草经》记载的三品分类法始,如何对中药进行合理的分类就成为历代本草著作中的一项重要内容。随着对中药理论认识的逐渐深入,古代医家对中药分类进行了不断的研究和探索,促使中药分类更加全面合理。文章通过梳理历代代表性本草著作中记载的中药分类方法,试图分析各种方法的优点和不足之处,为进一步研究中药理论奠定基础。     

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症患者基因突变32例分析

目的探讨采用突变特异性扩增系统(amplification refractory mutation system,ARMS)技术检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD)缺乏症患者基因突变的可行性。方法采用突变特异性扩增系统技术对2007至2010年3月在本院遗传诊断中心门诊就诊的云南省本地人群中,既往有葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症生育史,或孕前筛查、新生儿筛查发现葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症患者和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症高风险胎儿,共计32例(男性为15例,女性为17例)进行葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症患者三种常见基因突变检测(本研究遵循的程序符合本院人体试验委员会制定的伦理学标准,征得受试者本人或其监护人的知情同意)。结果 32例确诊为葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症高风险患者中,23例检出三种常见基因突变,其中1388(G→A)突变为12例,1376(G→T)突变为9例,95(A→G)突变为2例,这三种突变占本组患者的71.9%(23/32)。结论突变特异性扩增系统技术可作为葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症患者常规基因诊断和产前诊断方法。突变特异性扩增系统技术对胎儿,既可检出男性患者,又可检出女性杂合子,但对少数患者仍需采用其他技术检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症患者基因突变。