人参皂苷Rgl诱导大鼠海马神经干细胞分化的实验研究

为探讨人参皂苷Rgl诱导新生大鼠海马神经干细胞(NSCs)分化的作用,本实验采用无血清和单克隆培养方法进行细胞培养,应用免疫荧光染色法观察NSCs的形态及其分化而来的神经元、胶质细胞的形态,并经图像扫描分析仪分析海马NSCs分化的细胞数量.实验分4组:5%胎牛血清组、5%胎牛血清+30 ms/kg人参皂苷Rgl组、5%胎牛血清+15 ms/kg人参皂苷Rgl组和5%胎牛血清+10mg/kg人参皂苷Rgl组.结果显示:海马NSCs在无血清培养下,可形成巢蛋白(nestin)和5-溴脱氧尿苷(BrdU)阳性细胞球;在诱导分化后,免疫荧光染色可见B-Ⅲ型微管蛋白(Tuj-1)与波形蛋白(vimentin)阳性细胞;图像扫描分析结果显示15 mg/kg人参皂苷Rgl干预组海马NSCs向神经元的分化比例最高.此结果提示在一定浓度人参皂苷Rgl的作用下,海马NSCs向神经元分化的数量增多,为进一步研究人参皂苷Rgl对NSCs分化的影响提供了实验依据.     

三七总皂苷对脑出血大鼠前脑兴奋性氨基酸受体NR1表达的作用

目的:研究三七总皂苷对脑出血大鼠前脑兴奋性氨基酸受体NR1的作用。方法:用免疫组化法观察胶原酶诱导的脑出血大鼠前脑内NR1在给药组和对照组的表达变化。结果:脑出血后大鼠前脑NR1在病灶内部少量表达,病灶周围、大脑皮质、海马等部位均有不同程度的高表达,给药组在皮层、病灶周围阳性细胞明显减少,反应强度减弱。结论:三七总皂苷明显降低NR1在病灶周围、皮层海马神经元的阳性表达,从而发挥对受损神经元的保护作用。     

聪圣胶囊对去皮层血管大鼠前脑BDNF及其受体trkB作用的实验研究

本研究采用WISTAR成年大鼠 ,去除大鼠脑皮层血管建立模型 ,免疫组化采用ABC法 ,研究发现模型组大鼠大脑皮质、海马、大细胞基底核中的BDNF(脑源性神经营养因子 )阳性细胞数量显著减少 ,有的BDNF阳性细胞呈空泡状 ,有的呈萎缩状 ,胞体明显缩小 ,扣带皮质、海马CA1区最明显。结果说明去皮层血管后 ,聪圣胶囊可能激活大鼠皮质、海马等处神经元BDNF、trkB及其mRNA的表达 ,通过其旁分泌和自分泌方式作用自身或邻近神经元 ,也可能通过靶源性的方式作用于大细胞基底核的胆碱能神经元 ,以保护皮质、海马、大细胞基底核神经元免遭变性坏死。     

去大脑皮层血管成年大鼠前脑bFGF和PCNA的表达及三七总皂甙作用研究

目的：研究去皮层血管后前脑内bFGF和PCNA的农达，以及三七总皂成对其表达的影响。方法：通过免疫组织化学的方法检测去除大脑左侧皮层血管成年大鼠前脑内bFGF和PCNA的农达，以及给予三七总皂成后其表达的变化。结果：去大脑皮层血管后bFGF和PCNA在病灶及病灶周围、大脑皮质、海马、纹状体、侧脑室室管膜下层和室管膜层等均有表达，给予三七总皂成后阳性细胞数量显著增加，反应增强、细胞着色加深，经图象分析阳性细胞的面密度和光密度及细胞记数，并统计处理，作用明显，P＜0、001，具有统计学意义。结论：三七总皂成促进去大脑皮层血管后成年大鼠前脑内bFGF和PCNA的表达，bFGF可能通过多种分泌方式及转运途径促进神经元存活、损伤神经组织的修复、血管增生以及脑内细胞的增殖，其中包括促进脑内胶质细胞和神经干细胞的增殖。     

三七总皂甙对去大脑皮层血管后成年大鼠前脑侧脑室室管膜下层Nestin和bFGF表达的作用

目的　探讨中药三七是否能够促进脑损伤后神经干细胞丝裂原bFGF的合成、分泌以及神经干细胞的增殖。方法　通过免疫组织化学的方法检测去大脑皮层血管后以及给予三七总皂甙后成年大鼠前脑室管膜下层 (SVZ)神经前体细胞标记Nestin和神经营养因子bFGF的表达。结果　给予三七总皂甙后去大脑皮层血管成年大鼠前脑侧脑室SVZ中Nestin标记细胞的数目明显增多 ,bFGF的表达明显增强。结论　三七总皂甙能促进脑内bFGF合成及分泌 ,刺激SVZ神经干细胞的增殖     

醒脑健神胶囊对急性脑出血大鼠脑内β-内啡肽(β-EP)影响的实验研究

醒脑健神胶囊对急性脑出血大鼠脑内β－内啡肽（β－ＥＰ）影响的实验研究孙红梅白丽敏朱培纯庞鹤吴海霞许红（北京中医药大学解剖教研室）许多资料表明：内源性阿片肽参与了缺血性脑血管疾病的病理过程，但对脑出血时，脑内β－ＥＰ的变化及作用机理研究较少。本实验选用...     

3种中药对脑出血大鼠前额皮层局部脑血流的影响

正常的血液供应是大脑维持代谢和功能的首要条件。我们以前的研究建立了胶原酶诱发的大鼠脑出血模型，观察了其病理组织及动物行为的改变，初步认为3种治疗脑出血的系列中成药──醒脑健神胶囊、中风脑得平冲剂、清开灵注射液具有促进血肿吸收与修复的作用。为进一步观察其治疗机理，我们测量了大鼠脑出血后前额皮层局部脑血流（rCBF）的改变，并观察了上述3种药物对rCBF的影响。3种中药对脑出血大鼠前额皮层局部脑血流的影响@许红$北京中医药大学解剖学教研室!北京，100029@陈浩$北京中医药大学解剖学教研室!北京，100029@朱培纯$北京中…     

三七总皂苷对体外培养的大鼠海马神经干细胞增殖分化的作用

目的探讨不同剂量三七总皂苷(PNS)对体外培养的新生大鼠海马神经干细胞(NSCs)增殖和分化的影响。方法无血清原代培养新生SD大鼠海马NSCs,利用巢蛋白(Nestin),5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)和神经元、星形胶质细胞的特异性标记物β-Ⅲ型微管蛋白(Tuj-1)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)对培养的NSCs进行鉴定。将培养的细胞分为对照组、PBS组和PNS组,PNS组包括0.1、0.2、0.4、0.8、1.0 g/L组,观察各组细胞克隆形成率、细胞增殖曲线和细胞分化比例。将培养的细胞分为对照组和0.4 g/L PNS组,利用流式细胞仪检测PNS对海马神经干细胞分化的影响。结果海马神经干细胞呈神经球聚集生长,BrdU染色阳性。加入血清后神经球周围有细胞呈放射状向四周生长,并带有突起。染色呈Tuj-1和GFAP阳性。与对照组相比,中低剂量组(0.1、0.2、0.4 g/L)对大鼠海马NSCs增殖能力无显著影响,而高剂量的三七总皂苷(0.8 g/L及1.0 g/L)干预组则明显抑制了NSCs的增殖,差异有统计学意义(P0.05)。在分化条件下,三七总皂苷0.4 g/L干预组显著提高NSCs向神经元分化的比例,差异有统计学意义(P0.05)。结论三七总皂苷能够调节体外培养的大鼠海马NSCs的增殖和分化水平,在合适的剂量下明显提高了神经元的分化比例。     

去大脑皮质血管对成年大鼠侧脑室室管膜下层神经干细胞增殖的影响

目的:研究去大脑皮质血管对成年大鼠侧脑室室管膜下区(subependymal ventricular zone,SVZ)干细胞增殖的影响。方法:成年大鼠随机分为正常组和模型组,通过免疫组织化学的方法检测去大脑皮质血管后成年大鼠侧脑室前角、中央部、下角室管膜下BrdU标记细胞。结果:去皮质血管后大鼠侧脑室各部SVZ的BrdU阳性细胞的数目明显增多,去大脑皮质血管15d、30d大鼠侧脑室各部外侧壁和前角上壁SVZ的BrdU阳性细胞核计数均明显多于正常组。结论:去大脑皮质血管损伤可诱导大鼠脑内侧脑室室管膜下细胞的增殖。     

聪圣胶囊对去皮层血管大鼠行为学及前脑AchE、ChAT的影响

采用去大鼠脑皮层血管建立模型 ,AchE组化及ChAT免疫组化方法 ,研究聪圣胶囊对此模型皮质、海马以及大细胞基底核胆碱能神经元的影响。发现去脑皮层血管大鼠出现了明显的学习、记忆功能的损害。大鼠皮层损伤侧扣带皮质、海马CA1区AchE阳性纤维的分布明显稀疏 ,着色浅。损伤侧的大细胞基底核的AchE、ChAT阳性胆碱能神经元出现了明显萎缩。聪圣胶囊治疗组大鼠的学习、记忆功能明显改善 ,皮质、海马AchE阳性纤维分布较密集 ,着色加深。大细胞基底核AchE、ChAT阳性神经元的变性、萎缩明显减轻。说明聪圣胶囊对去皮层血管后造成的皮质、海马、大细胞基底核的损害具有明显的保护和治疗作用。通过上调胆碱能系统的功能改善学习、记忆功能。