ALEX1基因过表达慢病毒载体的构建和鉴定

目的:探讨构建Arm重复蛋白1(ALEX1)基因过表达慢病毒表达载体,感染乳腺癌细胞系SK-BR3后观察ALEX1的表达,为研究ALEX1在乳腺癌中的作用及机制奠定基础。方法:利用DNA重组技术将ALEX1基因插入到慢病毒穿梭质粒LV5中,获得重组慢病毒质粒V-ALEX1,经酶切鉴定及DNA测序鉴定后,用Lipofectamine 2000将重组质粒和慢病毒包装质粒系统(p Gag/Pol、pRev、p VSV-G)转染293T细胞中包装成重组慢病毒颗粒,经流式细胞术测定重组慢病毒滴度。将成功包装的ALEX1过表达慢病毒载体(LV5-ALEX1)和阴性对照载体(LV5-NC),感染SK-BR3细胞(MOI为10)48~72 h,Realtime PCR和Western blot法分析ALEX1表达情况。结果:酶切鉴定结果显示:产生约1 500 bp的片段,片段大小与ALEX1基因cDNA大小一致。DNA测序比对说明测序结果与预期ALEX1基因序列完全一致,证实ALEX1基因正确插入载体中,成功构建ALEX1基因过表达载体。经293T细胞包装后,成功获得病毒滴度为4.25×10~8TU/ml的重组慢病毒LV5-ALEX1。Realtime PCR和western blot结果显示:与感染LV5-NC的SK-BR3细胞相比,LV5-ALEX1感染可明显增加ALEX1 mRNA及蛋白的表达水平。结论:成功构建ALEX1基因过表达慢病毒载体,ALEX1基因过表达慢病毒能够感染乳腺癌SK-BR3细胞,可使外源基因获得稳定过表达。     

532nm掺钕钇铝石榴石皮秒激光照射离体牙对髓腔温度的影响

目的 通过用532 nm掺钕钇铝石榴石（Nd∶YAG）皮秒激光器在不同光照时间和功率下照射离体牙,以初步筛选出激光对于不同形态牙齿的安全参数.方法 采用皮秒激光照射离体牙（前牙、前磨牙、磨牙）;用热电偶电子测温仪对髓腔内不同时间和功率下的温度进行重复测量,以得出髓腔温度变化（△T）.结果 前牙组在0.6W、30s,0.8W、20 s、30s,1.0W、10s、20 s、30 s,前磨牙组在1.0W、30s时,△T＞5.6℃.磨牙组在1.0W、30s内,△T＜5.6℃.在皮秒激光功率一定下,髓腔温度随照射时间延长而升高,其差异均有统计学意义（P＜0.05）;一定时间下,随着功率增加而升高,其差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 用0.8 W、10s,0.6W、20s,0.4W、30s以内的参数照射前牙;0.8W、30s,1.0W、20 s以内的参数照射前磨牙;1.0W、30s以内的参数照射磨牙是相对安全的.且在应用皮秒激光进行牙体治疗时,需同时控制功率和照射时间.     

三七皂苷联合骨髓间充质干细胞移植促进急性脑损伤的恢复

BACKGROUND:Studies have shown that Panax notoginseng saponins (PNS) has extensive pharmacological basis for the treatment of cerebral ischemic injury, and animal experiments for treatment of brain injury by bone marrow mesenchymal stem cell transplantation are ongoing. However, little is reported about the combined use of PNS and bone marrow mesenchymal stem cell transplantation. OBJECTIVE:To investigate the effect of PNS combined with bone marrow mesenchymal stem cell transplantation on traumatic brain injury in rats. METHODS:Traumatic brain injury models were made in 60 Sprague-Dawley rats by hydraulic shock method. Then, model rats were randomized into model group, cell transplantation group receiving bone marrow mesenchymal stem cell transplantation and combined treatment group undergoing PNS combined with bone marrow mesenchymal stem cell transplantation. Nerve function recovery of the rats and protein expression of nerve growth factor in the brain tissue were evaluated and detected by Bederson scoring and western blot methods, respectively. Morphological changes of the brain tissue and apoptosis in cortical neurons were observed and detected by hematoxylin-eosin staining and TUNEL, respectively. RESULTS AND CONCLUSION:Highest Bederson score was found in the model group, followed by the cell transplantation group and combined treatment group (P < 0.05), while the protein expression of nerve growth factor was ranked as follows: the combined treatment group > the cell transplantation group > the model group (P < 0.05). Inflammatory infiltration and brain edema in the brain were relieved markedly in the combined treatment group compared with the other two groups, and the number of apoptotic neurons was significantly reduced as well. Our findings suggest that PNS combined with bone marrow mesenchymal stem cell transplantation can promote neurological recovery from traumatic brain injury by increasing the expression of nerve growth factor and reducing neuronal apoptosis.     

上海市精神卫生机构和床位资源配置公平性的泰尔指数分析

目的:了解上海市精神卫生机构和床位资源配置的公平性,为制定区域精神卫生工作规划提供参考。方法:采用泰尔指数分析精神卫生机构和床位资源在上海市中心城区、近郊区和远郊区各区域之间和区域内部配置的公平程度,同时利用地理信息系统技术呈现上海市精神卫生医疗机构和床位资源的空间分布特征。结果:精神卫生机构和床位按人口配置的总泰尔指数分别为0. 08、0. 09,组间泰尔指数与组内泰尔指数均相差不大,按地理面积配置的总泰尔指数分别为0. 41、0. 40,组间泰尔指数均大于组内泰尔指数,组间泰尔指数的贡献率分别为82. 0%和78. 7%;不论是按地理面积还是按人口数量,机构和床位配置公平性程度最低的均是中心城区。结论:未来应提高精神卫生机构和床位资源按地理面积配置的公平性,同时优化中心城区内部精神卫生机构和床位资源。     

骨桥蛋白对骨髓间充质干细胞核力学特性的影响及相关分子机制

目的研究骨桥蛋白(osteopontin,OPN)对骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)核力学特性的影响及相关分子机制。方法采用Transwell法分析BMSCs迁移能力。利用原子力显微镜(atomic force microscope,AFM)检测细胞核弹性模量,分析OPN作用下BMSCs细胞核硬度的变化。通过Western blot技术检测OPN作用对黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)和胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase 1/2,ERK 1/2)的影响,并利用FAK或ERK1/2抑制剂考察FAK-ERK1/2信号通路在OPN影响BMSCs核力学特性中的作用。通过RT-PCR和Western blot技术检测OPN作用下核纤层蛋白Lamin A/C的表达变化。结果 OPN处理组细胞核弹性模量与对照组相比明显降低。OPN作用显著上调FAK、ERK1/2磷酸化水平,加入FAK或ERK1/2抑制剂在一定程度上回救OPN降低的细胞核弹性模量,并显著抑制BMSCs迁移。OPN处理BMSCs后Lamin A/C mRNA和蛋白水平的表达出现下调,但FAK或ERK1/2抑制剂能够抑制OPN诱导的Lamin A/C表达下调。结论 OPN可能通过FAK-ERK1/2信号通路下调BMSCs核骨架蛋白Lamin A/C表达,降低细胞核硬度,促进BMSCs迁移。该研究结果为深入认识OPN调控BMSCs迁移行为的机制及其临床应用提供了实验依据。     

多囊卵巢综合征患者治疗前后血清IL-6、IL-8和TNF-α检测的临床意义

近期有文献指出,多囊卵巢综合征（PCOS）患者体内许多炎性因子的水平高于正常人。为了探讨炎性因子在PCOS发病中的变化,本文对PCOS患者进行了血清IL-6、IL-8和TNF-α的检测,现将结果报告如下。     

慢性HBV感染孕妇产后肝炎发作预测因素真实世界研究

目的研究慢性HBV感染孕妇在分娩后肝炎发作的预测因素。方法本研究为回顾性研究, 纳入符合标准的患者后, 通过临床医疗系统收集慢性HBV感染孕妇分娩时和48周内的肝功能和乙肝病毒学检查。评价对所得数据进行统计学分析。结果共纳入符合入组标准的孕妇533例, 所有患者平均年龄29.5±3.7, 共有408人为了母婴阻断在怀孕期间服用抗病毒药物, 产后1年内共有231人发生肝炎, 无论用药与否, 发生肝炎与未发生肝炎患者的分娩时丙氨酸氨基转氨酶(alanine transaminase, ALT)、门冬氨酸氨基转氨酶(aspartate transaminase, AST)、孕中乙肝病毒载量(HBV DNA)、分娩时和孕中乙肝e抗原(hepatitis B e antigen, HBeAg)都存在显著性差异。多因素二元logistic回归分析显示HBeAg (OR=0.19, 0.074～0.473;P<0.001), ALT(OR=1.05, 1.021～1.071;P<0.001), 白蛋白(albumin, ALB) (OR=0.91, 0.833～0.995;P=0.038...     

基于数据挖掘技术分析针灸治疗脊髓损伤后神经源性膀胱的取穴规律

文题释义：聚类分析：是一组将研究对象分为相对同质群组的统计分析技术。关联规则分析：从事务数据库、关系数据库和其他信息存储中的大量数据的项集之间发现有趣的、频繁出现的模式、关联和相关性。背景：目前,许多的研究表明针灸治疗脊髓损伤后神经源性膀胱具有显著疗效,但对于此病的治疗尚无统一的针灸处方标准。目的：探究针灸治疗脊髓损伤后神经源性膀胱的取穴规律。方法：检索1989年至2020年1月发表于中国知网、万方数据资源系统、维普数据库和中国生物医学文献数据库中的有关针灸治疗脊髓损伤后神经源性膀胱的相关临床文献,建立数据库对所收集文献的针灸处方进行描述性分析、关联规则分析和聚类分析。结果与结论：①共计纳入文献93篇,经数据汇总、分析显示针灸治疗脊髓损伤后的神经源性膀胱使用频率最高的腧穴和经络分别为中极(CV3)(频次55)、足太阳膀胱经(频次161);②关联规则分析显示支持度最高的穴位组合为关元(CV4)-中极(CV3);③将使用频率≥10的腧穴进行聚类分析,结果显示腧穴可分为2类;④上述数据证实,针灸治疗脊髓损伤后神经源性膀胱时选穴多为循经选穴和局部选穴,临床治疗可利用数据挖掘得出的关联规则分析和聚类分析结果合理取穴配穴并重用特定穴以提高治病效果。ORCID: 0000-0001-6928-314X(刘会敏)中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

云南省100例异常血红蛋白E患者的血液学和基因型分析

目的分析云南省异常血红蛋白E(hemoglobin E,Hb E)杂合子及Hb E合并地中海贫血(简称地贫)病例的血液学表型和基因型特征。方法对100例高效液相色谱分析提示为Hb E异常血红蛋白携带病例进行血细胞分析,并用Gap-PCR和PCR-寡核苷酸探针反向斑点杂交法检测α-和β-珠蛋白基因常见突变类型。结果100例疑似Hb E携带的病例,经基因诊断全部检出β-珠蛋白链CD26突变(HBB:c.79G>A),其中Hb E杂合子90例,Hb E合并αα/-α3.7突变7例,Hb E合并αα/--SEA突变2例,1例为Hb E合并-α3.7/-α3.7。Hb E杂合子血液学表型分析结果:Hb A2(26.02±3.64)%,Hb F(1.35±1.25)%,平均红细胞体积(78.83±4.68)fl,平均红细胞血红蛋白含量(26±1.54)pg,平均血红蛋白浓度(329.65±10.73)g/L,血红蛋白(141.08±16.53)g/L;Hb E复合α地贫时,α地贫基因的突变类型不同,血液学表型结果不同。结论云南省Hb E及Hb E合并α地贫的发生率较高,高效液相色谱能够有效检出Hb E,Hb E合并其它α地贫基因突变时,有较大差异的表型变化;仅依靠血液学结果进行产前筛查会造成Hb E漏诊。