HPLC法测定藏药榜嘎中阿替新、异叶乌头碱的含量

目的：测定四批藏药榜嘎中的阿替新、异叶乌头碱含量。方法：采用HPLC法,用DiamonsilC18柱（5μm,150mm×4.6mm）,以甲醇-水-氯仿-三乙胺（70：30：2：0.1）洗脱,流速1ml/min,柱温30℃,检测波长230nm。结果：在1μg～5μg间,阿替新与异叶乌头碱均呈良好的线性关系,平均回收率为99.238%,RSD值1.477%。结论：该方法简便、准确、重复性好,可用于藏药榜嘎中阿替新、异叶乌头碱的含量测定。     

Role of protein kinase C in advanced glycation end products-induced epithelial-mesenchymal transition in renal proximal tubular epithelial cells

The role of protein kinase C （PKC） activation in advanced glycation end products （AGEs）-induced epithelial-mesenchymal transition in renal proximal tubular epithelial cells was investigated. HKC cells were divided into three groups： normal group, AGE-BSA group （100 mg/L AGE-BSA） and AGE-BSA＋PKC inhibitor （10 μmol/L chelerythrine chloride） group. PKC activity was measured by PKC assay kit. The expression of Vimentin, and phosphorylated β-catenin was detected by using Western blotting, and the content of TGF-β1 was examined by ELISA method. The intracellular disposition of Vimentin was observed by fluorescence microscopy. As compared with normal group, PKC activity was increased significantly in AGE-BSA group. The expression of Vimentin, phosphorylated β-catenin, and TGF-β1 was enhanced significantly in AGE-BSA group. The expression of Vimentin, phosphorylated β-catenin, and TGF-β1 was significantly blocked by chelerythrine chloride. High expression of Vimentin, phosphorylated β-catenin, and TGF-β1 induced by AGE-BSA may be mediated via the activation of PKC signal transduction pathway.     

Erbin在肾间质纤维化中的表达和作用

目的 探讨Erbin在肾脏间质纤维化中表达量的变化及上调Erbin对转化生长因子β1（TGF-β1）诱导大鼠近端肾小管上皮细胞（NRK52E）转分化的影响。 方法 体内实验采用SD大鼠5/6肾切除法建立肾纤维化动物模型,收集并检测各组血清中Scr、BUN水平;Masson染色观察肾间质纤维化程度;免疫组化及Western印迹检测Erbin的分布与表达。 体外实验采用TGF-β1（10 μg/L）刺激NRK52E细胞72 h建立上皮细胞-间充质转分化（EMT）细胞模型;免疫荧光及Western印迹法检测E钙黏蛋白（E-cadherin）和α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达变化;RT-PCR及Western 印迹法检测Erbin的表达变化。用脂质体2000将质粒 Prk5-myc-Erbin瞬时转染至NRK52E细胞,Western印迹法观察上调Erbin表达后对上述各种指标的影响。 结果 （1）假手术组大鼠肾功能正常[Scr（33.96±7.28） μmol/L、BUN（8.11±2.55） mmol/L],Masson染色未见肾间质纤维化,Erbin在肾小管表达较少;模型组大鼠Scr [（140.52±61.11） μmol/L]、BUN[（34.23±7.66） mmol/L] 均显著高于假手术组（均P < 0.05）,肾间质可见明显纤维化,Erbin 在肾小管表达也明显增加,是假手术组的2.9倍（P < 0.01）。（2）正常NRK52E 细胞表达E-cadherin,少量表达Erbin和α-SMA。TGF-β1刺激后,NRK52E细胞E-cadherin表达显著减少,Erbin和α-SMA则表达增加（均P < 0.05）;而转染质粒Prk5-myc-Erbin可逆转TGF-β1诱导的NRK52E细胞E-cadherin表达下调,并可抑制α-SMA表达上调（均P < 0.05）。 结论 Erbin在肾间质纤维化中表达增加,上调Erbin表达可抑制TGF-β1诱导NRK52E发生EMT, 提示Erbin在肾脏纤维化中可发挥保护作用。     

血管内皮生长因子C参与肾间质纤维化的进程

目的探讨血管内皮生长因子C（VEGF-C）在大鼠。肾小管上皮细胞向间充质细胞转化（EMT）过程中的变化及其作用通路,并利用动物模型研究血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂替米沙坦对VEGF-C的影响,从而探讨VEGF-C在肾间质纤维化中的作用。方法体外培养大鼠肾小管上皮细胞（NRK52E）,用转化生长因子B1（TGF-β1）孵育不同时间,观察其对VEGF-C、上皮型钙黏蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（vimentin）、磷酸化AKT（P-AKT）等表达的影响,并在TGF-131作用同时加入PBK抑制剂Wortmannin,观察上述指标的变化;用单侧输尿管结扎术（UUO）制作SD大鼠肾间质纤维化模型,将21只大鼠随机分为假手术组、模型组和替米沙坦治疗组,每组7只。2周后,用免疫组织化学法检测α平滑肌肌动蛋白（mSMA）及VEGF-C在肾组织的分布,用RT-PCR和Westernblot—ring法检测其mRNA和蛋白表达。结果TGF-β1促进EMT的同时促进VEGF-C的表达增加。加入Wortmannin后EMT被抑制,同时VEGF-C的表达减低。动物模型组α-SMA和VEGF-C表达较假手术组高,替米沙坦治疗组α-SMA和VEGF-C表达较模型组低。结论TGF-β1可通过P13K—AKT通路促进VEGF-C的表达,VEGF-C与α-SMA的变化有同步性,提示VEGF-C可能参与肾间质纤维化的进程。     

高表达PTEN抑制TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞转分化

目的 研究PTEN高表达对TGF-β1诱导肾小管上皮细胞转分化的抑制及其信号传导机制.方法 脂质体介导含人全长PTEN基因或空载体转染人肾小管上皮细胞(HKC细胞)48 h,倒置荧光显微镜检测PTEN转染组及空载体转染组绿色荧光蛋白表达;Western blot检测正常组、PTEN转染组、空载体转染组中PTEN蛋白表达;RT-PCR检测3组中PTEN mRNA表达.然后将实验分为正常组、TGF-β1刺激组(给予TGF-β1刺激)、PTEN+TGF-β1组(PTEN基因转染后给予TGF-β1刺激)、空载体+TGF-β1组(空载体转染后给予TGF-β1刺激),Western blot检测各组细胞E-cad-herin、α-SMA、Akt、p-Akt表达水平.结果 FTEN基因及空载体转染HKC细胞48 h后可见明显绿色荧光蛋白表达;PTEN转染组PTEN蛋白及PTEN mRNA表达较正常组及空载体转染组细胞均显著上升(均P<0.05).在正常组、TGF-β1刺激组、PTEN+TGF-β1组、空载体+TGF-β1组中,TGF-β1刺激组及空载体+TGF-β1组较正常组E-cadherin表达明显下降(均P<0.05),而a-SMA及p-Akt表达显著上升(均P<0.05);PTEN+TGF-β1组较TGF-β1刺激组及空载体+TGF-β1组a-SMA及p-Akt表达明显下降(均P<0.05).而E-cadherin表达上升(均P<0.05);各组细胞Akt表达水平差异不明显(P>0.05).结论 PTEN通过阻止PI3K/Akt通路活化而抑制TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞转分化.     

肺癌术后围术期静脉血栓栓塞症的研究进展

<正>肺癌是全球发病率和病死率最高的恶性肿瘤之一^[1],而围术期静脉血栓栓塞症(VTE)的发生是肺癌术后的严重并发症。VTE可严重致残,甚至导致临床死亡事件发生,在美国是仅次于感冒的引起社会劳动力丢失的第二大疾病^[2],可造成巨大的经济损失。本文就肺癌围术期VTE的预防和治疗进展综述如下。1 VTE1.1 VTE的定义VTE是指血液在静脉中异常凝结造成血管腔完全性或非完全性堵塞,临床上分为肺栓塞(PE)和深静脉血栓(DVT),     

多学科诊疗模式在不同阶段临床教学中的应用情况调查

目的 评估多学科诊疗模式在不同阶段临床教学中的应用普及程度及学员评价,评估其应用价值,为临床教学模式改革提供建议。方法 随机选取2020年9月—2021年6月期间华中科技大学同济医学院附属同济医院住院医师规范化培训学员30名,临床五年制实习医学生30名,临床五年制见习医学生30名,对其进行问卷调查,包括调查对象基本信息、MDT知晓率、参与度、参加MDT涉及学科、病种、是否对当前阶段学习有帮助、参加多学科诊疗（multidisciplinary treatment,MDT）获益情况等。结果 住培学员对MDT知晓率、参与度明显高于实习组、见习组,实习组仅16.7%参加过MDT,见习组仅1名参加,知晓率亦较低。参加的MDT申请学科以外科为主,其中肝脏外科占到85.7%,其主要病种也以肝脏肿瘤为主。其中参加过MDT讨论的学员中,100%认为MDT对于当前阶段学习有帮助并能提高学习兴趣。结论 住培学员对MDT知晓率、参与率较高,实习、见习同学知晓率很低;参与MDT的学员反馈较为积极,结合文献报道,建议教学医院加强MDT在教学中的推广应用,同时进行教学效果考核,以科学评价教学效果。     

十七种不同品种的酸甜石榴皮及叶中总酚的测定

目的用Folin-Ciocalteu法测定17种不同品种的石榴皮和叶中总多酚的含量,为石榴皮石榴叶的开发利用提供参考。方法采用Folin-Ciocalteu法,以没食子酸为对照品,测定不同品种的石榴皮、石榴叶总多酚含量。结果不同品种的石榴皮总多酚的含量在12.4%~34.2%之间,而不同品种的石榴叶总多酚在5.5%~16.8%之间,相差约3倍。结论同一品种中石榴皮的多酚含量都高于石榴叶中的多酚含量。甜石榴一般食用,酸石榴入药,但文章中两类石榴皮及叶中多酚含量并无明显差异。     

不同栽培模式对粗茎秦艽根际土壤微生物多样性与次生代谢产物含量的影响

目的 探讨不同栽培模式对粗茎秦艽产量及其根际土壤微生物多样性和次生代谢产物含量的影响。方法 以不同栽培模式粗茎秦艽及其根际土壤为研究对象,采用高通量测序技术,分析根际土壤中细菌和真菌群落组成及优势菌群和差异微生物;采用高效液相色谱法测定不同栽培模式粗茎秦艽中环烯醚萜类成分含量。结果 相较于地膜种植,采取无地膜种植与间作牡丹、白芸豆、土豆和玉米等作物后,粗茎秦艽鲜品增产16.11%~17.68%、22.48%~26.34%、29.37%~32.19%、34.82%~36.57%和35.34%~39.71%,干品增产19.75%~23.17%、25.86%~29.32%、30.18%~34.94%、35.22%~39.87%和39.72%~43.73%,龙胆苦苷、马钱苷酸、獐牙菜苷和獐牙菜苦苷4种环烯醚萜类成分总含量分别提高10.17%~37.83%、5.93%~47.44%、9.09%~28.84%和10.71%~28.57%。根际土壤中细菌和真菌群落多样性明显增高（P<0.05）,其中粪壳菌纲（Sordariomycetes）、锤舌菌纲（Leotiomycetes）、银耳菌纲（Tremellomycetes）、散囊菌纲（Eurotiomycetes）、镰刀菌属（Fusarium）和支孢甁霉属（Cladophialophora）等致病菌群相对丰度降低,变形菌门（Proteobacteria）、酸杆菌门（Acidobacteria）和放线菌门（Actinobacteriota）等有益菌群比例增高且逐渐成为优势菌群。结论 粗茎秦艽不同栽培模式可影响其产量和根际土壤微生物群落多样性及环烯醚萜类成分的累积,无地膜种植和间作模式具有一定优势,可为粗茎秦艽种植提供理论参考。     

木香川木香药材UPLC特征指纹图谱建立及鉴别研究

木香与川木香成分相似,难以鉴别。该文采用ACQUITY UPLC色谱仪,乙腈-0.05%磷酸水溶液梯度洗脱,检测波长238 nm,建立了木香、川木香药材的UPLC指纹图谱。聚类分析和主成分分析可以完全将2种药材分开。指纹图谱分析木香药材中标定了8个共有峰;川木香药材中标定了12个共有峰。通过与对照品比对,指认了其中6个共有峰,分别为紫丁香苷、绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、木香烃内酯和去氢木香内酯。川木香中的4个特征成分峰,在木香样品中并不具有。应用UPLC特征指纹图谱对木香和川木香进行鉴别是可行的。