基于全二维液相色谱的牛黄上清丸指纹图谱研究

目的研究牛黄上清丸全二维液相色谱指纹图谱的评价方法,并建立三维指纹图谱,为牛黄上清丸的质量控制提供新方法。方法第一维采用Acquity UPLC HSS CYANO(100 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱,柱温40℃,流动相为0.1%甲酸水溶液-甲醇,体积流量0.1 mL/min;第二维采用Kinetex Phenyl-Hexyl(50 mm×3 mm,2.6μm)色谱柱,流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈,体积流量1.5 mL/min,柱温40℃,检测波长254 nm,样品采集速率为12.5 Hz;连接第一维与第二维色谱柱的定量环体积为100μL。建立牛黄上清丸的全二维液相色谱指纹图谱,采用欧氏距离、夹角余弦和相关系数法,分别以各共有峰峰体积的中位数、平均数的计算结果为标准对照指纹图谱,对21批市售牛黄上清丸样品进行相似度评价。结果建立了21批市售牛黄上清丸的三维指纹图谱,标定了共有峰18个,并指认了其中的5个共有峰:栀子苷(1号峰)、胡薄荷酮(8号峰)、黄芩苷(9号峰)、欧前胡素(15号峰)、汉黄芩素(16号峰)。结论首次建立了基于全二维液相色谱的牛黄上清丸的指纹图谱及其相似度的评价方法,说明该法可用于中药色谱指纹图谱的建立,该方法也是对传统液相色谱指纹图谱的补充和提高。     

延龄草根及根茎的化学成分研究

目的 研究延龄草Trillium tschonoskii根及根茎中的化学成分。方法 采用硅胶、聚酰胺、反相硅胶C₁₈和Sephadex LH-20柱色谱对延龄草70%乙醇提取物进行了分离纯化。用质谱、一维及二维核磁等波谱学方法确定了化合物结构。结果 从延龄草醋酸乙酯和正丁醇部位分离鉴定得到8个化合物,分别鉴定为偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-葡萄糖苷（1）、偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)]-β-D-葡萄糖苷（2）、偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)]-β-D-葡萄糖苷（3）、偏诺皂苷元（4）、薯蓣皂苷元（5）、7, 11-dimethyl-3-methylene-1, 6-dodecadien-10, 11-dihdroxyl-10-O-β-D-glucopyranosyl-(1→4)-O-β-D-glucopyranoside（6）、7, 11-dimethyl-3-methylene-1, 6-dodecadien-10, 11-dihdroxyl-10-O-β-D-glucopyranoside（7）、紫云英苷（8）。结论 所有化合物均为首次从该种植物中分离得到。     

HPLC法同时测定延龄草根及根茎中延龄草皂苷B2、B1、B3的含量

目的:建立HPLC法同时测定延龄草Trillium tschonoskiiMaxim.根及根茎中延龄草皂苷B2、B1、B3的含量。方法:采用UItimate RXB-C18(4.6 mm×150 mm,3μm)色谱柱,流动相为乙腈-水(10%-100%梯度),检测波长为203 nm,流速1.0mL/min,柱温30℃。结果:在该色谱条件下,三种延龄草皂苷的分离度良好,延龄草皂苷B2、B1、B3浓度在0.05-0.5 mg/mL范围内峰面积与进样量呈良好的线性关系,平均加样回收率为98.2%、102.5%、101.4%。结论:该方法简便、准确、重现性好,适用于同时测定延龄草皂苷B2、B1、B3的含量,可作为延龄草质量标准制定的依据。     

藏药臭蚤草不同提取部位对CIA大鼠的影响北大核心CSCD

目的明确藏药臭蚤草抗类风湿性关节炎的作用,筛选其抗类风湿性关节炎的活性部位,初步探讨其抗类风湿性关节炎作用机制。方法以牛Ⅱ型胶原与弗氏不完全佐剂建立大鼠类风湿性关节炎(CIA)模型。观察臭蚤草总提物、大孔树脂不同浓度乙醇洗脱部位及雷公藤多苷(GTW)对类风湿性关节炎模型大鼠的足肿胀度的影响,检测大鼠血清中的肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和类风湿性因子(RF)的含量,借助滑膜组织病理学验证臭蚤草对类风湿性关节炎的治疗作用,利用Western blot法探究臭蚤草对类风湿性关节炎大鼠滑膜组织中MAPK/p38/NF-κB、TLR4/NF-κB炎症通路蛋白表达的影响,探讨臭蚤草抗类风湿性关节炎的作用机制。结果与模型组相比,臭蚤草总提取物和大孔树脂60%乙醇洗脱部位能够明显降低CIA大鼠关节肿胀度;有效改善大鼠滑膜的病理变化,并明显降低血清中炎症因子中大鼠肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和类风湿性因子(RF)水平;明显降低滑膜组织中(TLR4、NF-κB、Myd88、p-p38、p-IκBα、iNOS等)相关炎症蛋白的表达。结论(1)臭蚤草可以缓解类风湿性关节炎大鼠的关节炎症症状,且臭蚤草60%乙醇洗脱部位为臭蚤草抗类风湿性关节炎的有效活性部位;(2)臭蚤草总提物及不同极性提取物能抑制MAPK/p38/NF-κB、TLR4/NF-κB信号通路缓解CIA大鼠的关节炎症状。     

北沙参不同部位提取物镇咳祛痰作用研究＊

目的 研究北沙参不同部位提取物的镇咳、祛痰作用与其高效液相色谱法（HPLC）指纹图谱之间的相互关系，揭示北沙参镇咳和祛痰的作用。方法 采用浓氨水喷雾致小鼠咳嗽实验和小鼠气管酚红排泄实验，考察北沙参总提取物（BSS总）、石油醚萃取部位（BSS-A）、乙酸乙酯萃取部位（BSS-B）、正丁醇萃取部位（BSS-C）和水取部位（BSS-D）对小鼠的咳嗽次数和气管排泄酚红量的影响，并建立相应的HPLC指纹图谱。结果 BSS总、BSS-A和BSS-B可明显降低小鼠的咳嗽频率（P＜0.01），而BSS-B和BSS-C可明显提高小鼠气管中的酚红排泄量（P＜0.01）。此外，结合HPLC分析对上述有效部位进行了谱-效关联性分析。结论 北沙参乙醇提取物具有显著的镇咳、祛痰作用，并初步探讨了北沙参不同部位提取物镇咳祛痰作用的谱-效关系。