白藜芦醇对活化小鼠T淋巴细胞IL-2和CD25表达的影响

目的：研究白藜芦醇(RSV)对活化的小鼠T淋巴细胞分泌IL-2和CD25的影响，并探讨其免疫抑制机制。方法：无菌分离小鼠淋巴结细胞，与不同浓度的白藜芦醇共同孵育1小时后，用多克隆刺激剂佛波醇酯和离子霉素刺激T细胞活化，继续培养6小时后收获细胞，进行胞内细胞因子染色，流式细胞仪检测IL-2的分泌情况，RT-PCR检测IL-2 mRNA的表达：24小时后检测CD25表达。结果：RSV对IL-2的分泌具有抑制作用，并呈剂量依赖性，同时RSV也能抑制T细胞表面活化分子CD25。结论：RSV对活化T细胞分泌的细胞因子IL-2及IL-2α链CD25的表达可能是RSV对T细胞具有免疫抑制作用的机制之一，并可能与T细胞活化通路的PKC-NF-κB信号传导途径相关。     

氧化苦参碱抑制二硝基氟苯所致小鼠接触性皮炎及淋巴细胞增殖

目的：探讨氧化苦参碱(OMT)对二硝基氟苯(DNFB)所致小鼠变应性接触性皮炎(ACD)的抑制作用及小鼠淋巴细胞增殖的影响。 方法： ①建立DNFB所致小鼠ACD模型，以不同剂量的OMT、PBS、氢化可的松(HCT)进行腹腔注射，检测小鼠耳廓肿胀度变化。②利用羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA-SE)染色，流式细胞术检测OMT对小鼠淋巴细胞增殖的影响。 结果： ①OMT对DNFB所致小鼠ACD呈剂量依赖性抑制作用,且与同等剂量HCT作用效果相似,但副作用明显减小。②体外实验证明，在500、125和31 mg/L组，OMT对小鼠淋巴细胞增殖呈剂量依赖性抑制。 结论: OMT对DNFB所致小鼠ACD有显著的抑制作用，而且抑制小鼠淋巴细胞增殖；OMT是一种免疫抑制剂。     

成纤维细胞生长因子和胰岛素对小鼠软骨细胞增殖的影响

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和胰岛素对小鼠原代软骨细胞的影响。方法: 在低血清培养基培养条件下进行小鼠原代软骨细胞培养, 采用WST1比色法和荧光染色法观察bFGF和胰岛素对软骨细胞增殖的影响。结果:原代软骨细胞在0.4%胎牛血清培养基培养条件下, 不同浓度的bFGF和胰岛素对软骨细胞的增殖有剂量相关性。形态学观察表明, bFGF和胰岛素不仅促进细胞增殖, 而且可使细胞分泌基质增多。结论:bFGF和胰岛素均能促进软骨细胞的增殖。     

淫羊藿甙对小鼠T淋巴细胞体外活化和增殖的影响

目的研究淫羊藿甙(ICA)对刀豆蛋白A(ConA)刺激的小鼠T淋巴细胞体外早期活化和增殖的影响。方法以MTT法检测T细胞药物毒性;利用流式细胞术(FCM)结合双色荧光抗体染色技术检测早期活化标志CD69分子的表达;运用流式细胞术结合活体染料羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA-SE)染色技术和荧光抗体染色技术检测T细胞增殖。结果ICA在终浓度0.3、1.5、3.0μmol·L-1时对于CD69的表达以及淋巴细胞48和72h增殖,均有明显的抑制作用(P<0.01)。结论ICA能抑制ConA刺激的小鼠T淋巴细胞的早期活化和增殖,并呈剂量依赖性,即在最高浓度3.0μmol·L-1时抑制率最强。     

地塞米松影响小鼠胸腺细胞线粒体膜电势变化研究

目的：研究地塞米松刺激小鼠胸腺细胞过程中线粒体膜电势（△Ψm）的变化。 方法： 以终浓度1×10－6mol/L地塞米松（DEX）刺激小鼠胸腺细胞，通过JC-1染色流式细胞术，在0、1、3、5、7、9、11、24和27 h时点分别检测小鼠胸腺细胞平均J-aggregate（FL2）和平均J-monomer （FL1）含量，并计算线粒体膜电势（FL2/FL1）。 结果： 本研究中，小鼠胸腺细胞离体后FL1所反映的线粒体质量迅速下降，至5 h对照组达到平台期（913.38±70.11），然后缓慢下降到27 h的（622.80±22.81）。DEX组FL1在1 h和3 h与对照组没有显著差异（P>0.05），而从5 h（660.91±72.95）开始显著低于对照组（P<0.01），并且随培养时间延长呈下降趋势，至27 h的（309.70±53.35）。对照组和DEX组FL2随培养时间延长而降低。1-9 h，对照组和DEX的△Ψm没有显著差异（P>0.05）。而在11、24和27 h，对照组△Ψm分别为（256.41±21.59）、（214.14±23.21）和（146.14±17.97），而DEX组△Ψm显著低于对照组（P<0.01），分别为（138.28±20.59）、（111.61±29.67）和（72.92±17.86）。 结论： DEX诱导小鼠胸腺细胞凋亡过程中，线粒体质量降低和△Ψm下降是早期事件，而细胞内现存线粒体△Ψm下降则是较晚期的事件。在本研究中，线粒体质量下降与现存线粒体膜电势的变化之间关系不紧密。     

孕妇外周血中胎儿细胞对3种抗体表达的研究

目的：利用流式细胞仪研究孕妇血中胎儿细胞对三种抗体表达的情况。希望能更准确的标记孕妇血中的胎儿细胞。以助提高胎儿细胞的分离纯度。方法：用CD71、CD45、GPA（糖蛋白A）分别标记抗凝的22例孕妇血、28例脐血、30例正常未孕妇女血各100ul。在流式细胞仪上检测。同时对已标记2种抗体的2例20ml母血在流式细胞仪上进行胎儿细胞分离,并经PCR技术鉴定男性SRY基因。结果：1、正常未孕妇女血中几乎无CD71 细胞存在。2、在脐血和孕妇血中CD71 细胞主要有两群。高表达群和低表达群。有核红细胞（表达CD71 GPA /CD45-）主要在高表达群中,脐血是58.73%,孕妇血36.43%。3、无论是高表达群 低表达群,CD45 细胞占多数。在脐血中低表达群是90.86%,高表达群占22.26%。孕妇血CD71 低表达群中CD45 细胞占82.11%。高表达群CD45 细胞占79.29%。4、利用流式细胞仪分离已标记三种抗体的母血中胎儿细胞,经PCR技术鉴定分离后的标本中存在男性SRY基因的胎儿细胞。结论：1、正常未孕妇女血中几乎不存在有核红细胞。2=在脐血和孕妇血中有核红细胞主要有两群。高表达群和低表达群。有核红细胞主要在高表达群中。3、无论高表达群或低表达群。CD45 细胞（增殖的白细胞）仍占多数,说明依然缺乏识别胎儿细胞的特异性标记物。主张多参数标记胎儿细胞有利于提高分防细胞纯度。     

维生素C对大鼠肋骨生长板软骨细胞增殖和胶原合成的影响

探讨不同浓度的维生素C(AscorbicAcid ,Asc)对培养大鼠肋生长板软骨细胞 (ratcostochondralgrowthplatechondrocyte,RGC)增殖和胶原合成的影响。分离、培养RGC ,以组织化学和免疫组织化学的方法鉴定第 2代RGC的表型 ;分别用3 H TdR和3 H Proline掺入法检测 2 5、5 0和 10 0mg/LAsc对第 2代RGC增殖和胶原合成的影响。3种浓度的Asc均能促进RGC胶原合成 (P <0 0 5 ) ,2 5mg/L和 5 0mg/LAsc的促胶原合成作用明显强于 10 0mg/L(P <0 0 5 ) ;2 5mg/L和 5 0mg/L的Asc促进RGC增殖 (P <0 0 5 ) ,10 0mg/L的Asc抑制RGC的增殖 (P <0 0 5 )。因此一定浓度的Asc具有促进RGC增殖和胶原合成的作用 ,2 5mg/L～ 5 0mg/L是较为合适的添加浓度。     

小鼠异基因骨髓移植急性移植物抗宿主病模型的建立

目的：建立稳定可靠的小鼠异基因骨髓移植急性移植物抗宿主病（GVHD）模型，为异基因骨髓移植中GVHD研究提供理想的实验参照。方法：以C57BL/6 (H-2^b) 小鼠为供鼠、BALB/c (H-2^d) 小鼠为受鼠，在移植物中混合不同比例的供鼠外周淋巴细胞以引起不同程度的GVHD。根据临床表现、存活期及病理检查等判断GVHD程度。结果：单纯异基因骨髓组只有部分小鼠出现急性GVHD，20%的小鼠长期存活（超过120 d），无急性GVHD表现；混合不同比例外周淋巴细胞的异基因骨髓移植小鼠出现GVHD的时间和程度均有差异，其中骨髓与外周淋巴细胞1:1混合组小鼠全部在移植后5-14 d出现典型的弓背体位，存活期6-24 d，临床和病理均可在相对集中的时间内观察到典型的急性GVHD改变。结论：以供鼠骨髓与外周淋巴细胞1:1混合进行的异基因骨髓移植，100%引出致死性的急性GVHD。     

妊娠水平孕酮体外对HIV-1感染和复制的影响

目的：研究相当于妊娠后外周血和胎盘局部浓度的孕酮（P4）体外对HIV-1感染及复制的影响。方法：检测终浓度为10^-6mol／L（相当于妊娠妇女外周血水平）和10^-5mol／L（相当于母胎界面局部浓度）的P4对HIV-1介导细胞融合的影响；ELISA法检测感染HIV的MT-2细胞培养上清p24抗原含量来探讨对HIV-1复制的影响；流式细胞术检测对淋巴细胞活化后CD69表达的影响和^1H-TdR掺入法检测对淋巴细胞增殖的影响。结果：10^-5mol／L的P4可以明显抑制HIV-1介导的细胞融合，并且降低感染细胞培养上清中p24抗原含量，两种浓度对淋巴细胞的活化和增殖都有抑制作用。结论：相当于妊娠后母胎界面局部浓度的P4体外可以抑制HIV-1感染和复制，其机制与抑制淋巴细胞活化和增殖有关。     

通痹灵总碱对THl／TH2型细胞因子表达的影响

类风湿性关节炎 (RA)是一种常见的以关节滑膜慢性炎症及系统性血管炎为特征的慢性自身免疫功能障碍性疾病。由于T淋巴细胞尤其是CD4 (TH)细胞是滑膜浸润细胞中的主要细胞亚群 ,因此一直被认为与RA有着密切的关系。一般认为TH1及其细胞因子在RA的发病过程中占优势 ,TH1可诱发或加重疾病 ,而TH2可阻止或缓解病情。因此 ,绕过抗原调节TH1 TH2细胞因子平衡是治疗控制RA自身免疫和炎症反应的有效手段之一。中药复方通痹灵 (TBL)由《金匮要略》中桂枝芍药知母汤加减而成 (组方包括桂枝、知母、白芍、防风、水牛角、制马钱子粉、制川乌…