人基质金属蛋白酶3基因RNA慢病毒载体构建及在人退变髓核细胞中的鉴定

BACKGROUND: Inhibiting the degradation of extracellular matrix in the intervertebral disc can delay the degenerative process of intervertebral disc. Matrix metalloproteinases-3 (MMP3) is considered as a key enzyme for degradation of extracellular matrix components such as type II collagen and aggrecan. OBJECTIVE: To construct the short hairpin RNA lentiviral vector targeting human MMP3 gene and to detect its efficiency of gene silence by infecting human degenerative nucleus pulposus cells. METHODS: According to the human MMP3 mRNA (NM_002422.4) sequence, four groups of the short hairpin RNA gene sequences targeting MMP3 were designed, synthesized and annealed to form double stranded DNA fragments, which were connected with the LV3 vectors digested by BamHI and EcoRI enzymes, and then transfected into the competent cells. The positive clones were identified by PCR, and analyzed by sequencing. The packaging and titer of lentivirus were determined after transfecting 293T cells. Human degenerative nucleus pulposus cells were infected with lentivirus vector, and the transfection efficiency of each group was observed under inverted fluorescence microscope. The interfering efficiency was detected by real time-PCR and western blot at 72 and 96 hours. RESULTS AND CONCLUSION: The ds-oligo DNA was successfully inserted into the lentiviral vector as confirmed by electrophoresis and sequence analysis. The recombinant lentivirus was harvested from 293T cells with a viral titer of 1-5 ×108 TU/mL. RNA interference targeting the GCC AGG CTT TCC CAA GCA AAT sequences with the highest interfering efficiency in MMP3 gene at 72 and 96 hours resulted in suppression of MMP3 mRNA expression by 98% and 72%, respectively; and at 96 hours, the interfering efficiency of protein expression was 57.2%. The recombinant lentivirus vector containing RNA interference targeting MMP3 gene is successfully constructed, which lays a foundation for further studies on the MMP3 function and gene therapy.      

清开灵注射液指标成分的体内样品分析

选取黄芩苷、栀子苷和胆酸三种复方清开灵注射液中的主要活性成分为指标 ,运用高效液相色谱法和紫外分析法 ,测定其在全方和脑脊液、血浆、血清样品中的经时变化浓度 ,进而间接表征整个中药复方在体内的变化情况 ,为中药复方的体内样品研究提供了一定的方法模式。     

红茶及茶色素药理作用研究的动态

 目的：介绍红茶及红茶主要活性成分茶色素在国际间的研究状况。方法：通过多种检索方式,收集、分析了有关研究信息。结果：继绿茶及绿茶多酚药理作用研究取得很大进展的同时,国际间有关红茶及茶色素的药理研究与应用日趋活跃,尤其在癌症的预防、抗突变、口腔常见病的预防与治疗,抗菌、抗病毒,治疗心血管疾病,治疗糖尿病等基础与应用研究方面显示了良好的应用前景。结论：红茶及茶色素对多种疾病有预防及治疗作用,但其机制均有待深入、系统的研究。     

食品模拟物中甲醛含量测定的不确定度分析

摘 要 目的：对食品模拟物中甲醛含量的测定进行不确定度评定。方法: 采用柱前衍生 高效液相色谱法测定食品模拟物中甲醛含量。建立数学模型,分析测量不确定度的来源,量化各个测量不确定度分量,合成不确定度。结果: 甲醛含量测定的合成不确定度为1.7%,扩展不确定度为3.4%,测量结果表示为（1.320±0.044 mg·L-1,k=2）。结论: 建立的不确定度评定方法可为柱前衍生 高效液相色谱法测定食品模拟物中甲醛含量的不确定度分析提供参考。     

犬实验性早期心肌梗塞的组织化学和超微结构研究

结扎21条犬冠状动脉左前降支后18～24小时,于左室前壁缺血或梗塞处取材行组织化学和电镜观察,结果表明心肌内塘原减少或消失,碱性磷酸酶和三磷酸腺苷酶反应阳性的毛细血管数量减步或分布不均,后者显示心肌内微循环障碍。同时表明心肌内琥珀酸脱氢酶的反应颗粒明显减少或消失,是心肌缺血较敏感而可靠的指标。梗塞灶周围心肌出现脂肪变性。电镜观察显示心肌线粒体内出现无定形致密颗粒和心肌内形成断裂凝聚带为心肌早期坏死的主要形态依据。心肌内毛细血管内皮细胞严重受损和微循环障碍既为心肌缺血的后果,又可加重心肌的缺血性损害。     

旅客列车空气品质评价现状及对策思考

目前对旅客列车空气品质方面的研究方法较为单一,如何综合有效地评价我国旅客列车空气质量水平成为亟待解决的问题。作者借鉴国内外室内空气品质评价研究方向,探讨主、客观评价相结合的旅客列车空气品质综合评价方法,希望有助亍更为全面、客观地衡量旅客列车总体空气质量水平,从而为进一步改善旅客列车空气品质提供理论依据。     

经椎弓根椎体椎间隙截骨脊柱短缩术治疗脊柱后凸畸形的临床效果

目的 探讨经椎弓根椎体椎间隙截骨脊柱短缩术(TOS)对脊柱后凸畸形患者的临床应用价值.方法 回顾性分析2019-01—2020-05平顶山市第一人民医院骨一科收治的76例脊柱后凸畸形患者.根据治疗方案分为TOS组和经椎板和小关节突截骨术组(对照组),各38例.比较2组患者的基线资料、疗效、手术时间、术中出血量、术后下床...     

中国饮食环境下餐饮服务物质安全风险管理及其检验

目的 为餐饮服务提供科学合理的监管途径.方法 分析餐饮服务的供应链条和涉及环节的多样性.结果 作为食品供应链条的中下游环节,餐饮服务的食品安全问题一方面来自于种植、加工、运输及零售等环节的危害物质积累;另一方面其本身的环节多样性也为食品安全带来了新的潜在风险.餐饮服务作为具有人文特征的消费提供方式,其食品安全监管必须针对饮食特征、习惯、环境来综合建立管理及检验模式.结论 物质管理、过程管理及链条化管理作为3种可应用于餐饮服务食品安全监管的模式,各有特点,其中链条化管理更能为餐饮服务提供合理的监管途径.     

药品生产过程中的物料平衡检查

对药品生产过程中的输入、输出进行"物料平衡(Reconciliation)"检查,是国际通行的要求,并被规定于各国"药品生产质量管理规范"(GMP)中.我国对此的要求为:企业应对每批产品按产量和数量的物料平衡进行检查.即对产品或物料的理论产(用)量与实际产(用)量进行比较,并允许适当的正常偏差.如有显著差异,必须查明原因,在得出合理解释,确认无潜在质量事故后,可按正常产品处理.所称"理论产量"(theoretical yield),是设输入总量在生产过程中无任何损耗,全数转化为输出产品量.     

中药指纹图谱与全面质量管理

中药指纹图谱一个较大的实用价值就是用于中药生产的全面质量管理。文章从中药指纹图谱在全面质量管理中的具体特性出发,分析了其在质量管理中的三方面实现方式,为中药指纹图谱的实际应用提出了一定思路。