如意珍宝片含药血清对大鼠软骨细胞增殖及分化的影响

目的探讨如意珍宝片含药血清对大鼠软骨细胞增殖及分化的影响。方法以如意珍宝片给大鼠灌胃1周后的含药血清干预软骨细胞,观察不同时间点的细胞形态,用蛋白印迹法检测细胞增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白表达情况。进一步采用10ng／ml浓度的白细胞介素（IL）-1β诱导软骨细胞分化,分为空白血清组,IL-1β诱导＋空白血清组,IL-1β诱导＋含药血清组共3组培养,采用实时定量聚合酶链反应（RT—PCR）检测各组细胞的Sox-9和基质金属蛋白酶13（MMP-13）基因的表达,用蛋白印迹法检测各组细胞的B—catenin蛋白表达情况。结果如意珍宝片含药血清能促进软骨细胞的增殖,提高软骨细胞PCNA蛋白及Sox。9基因表达（P〈0．05）,但对MMP-13基因和β—catenin蛋白表达无明显影响（P〉0．05）。结论如意珍宝片含药血清具有一定的促进软骨细胞增殖,抑制细胞分化的作用。     

软骨退变与骨关节炎临床表现的回归分析

骨关节炎是全球范围内的常见病与多发病,其病理过程的关键在于关节软骨的退变,本分析是在骨关节炎临床治疗的基础上,运用统计学手段来分析软骨退变与其临床表现的相关性,旨在进一步探讨骨关节炎的临床发病特点.     

骨关节炎的中药治疗现状

目的：通过证、法、方、药的写作顺序简述中医药治疗骨关节炎的近况。资料来源：应用计算机检索PUBMED 1966-10／20HD5-10期间的相关文章，检索词为osteoarthritis,degenerative arthritis,traditional chinesemedicine,chinese medicine,chinese botanical medicine,chinese phytotherapy”，并限定文章语言种类为English。同时计算机检索万方数据库1979-10／2005-10期间的相关文章，检索词为“骨关节炎，退行性骨关节炎，中医，中国植物药，中国植物药疗法”，并限定文章语言种类为中文。资料选择：对资料进行初审，并查看每篇文献后的引文。纳入标准：文章所述内容应与中医药治疗骨关节炎的研究相关。排除标准：重复研究或Meta分析类文章。资料提炼：共收集到284篇相关文献，98篇文献符合纳入标准，排除的186篇文献为内容陈旧或重复。符合纳入标准的98篇文献中，69篇涉及痹证类的病因病机、治法或方药近况，29篇涉及痿类的病因病机、治法或方药近况。本文选用其中的31篇作为参考文献。资料综合：有学者将骨关节炎归为痹证范畴，相关治法有补肾法；健脾法；祛邪法（包括有祛风除湿法、散寒止痛法、活血祛瘀法、化痰软坚法、解毒散结法）。另有学者将骨关节炎归为痿证范畴，治法有养血软坚法、养筋柔肝。大多数文献报道为自拟诊疗标准，缺乏统一公认的疗效评价标准；相对缺少按照循证医学要求进行的前瞻设计的随机、对照临床试验。在用药上，骨关节炎的治疗药物十分广泛，从常用药材至虫毒类药都有。从剂型和药物上对骨关节炎的治疗进行改革和筛选将是中医现代化的有益探索。结论：中医多从痹证或痿证的角度治疗骨关节炎，运用相应的祛邪、补肾、健脾、柔肝药及虫毒类药。目前相对缺少按照循证医学原则要求设计的随机、对照临床试验。     

补肾中药对自然衰老雄性大鼠骨髓微环境中Smadl基因表达的影响

目的：研究补肾中药对自然衰老雄性大鼠骨髓微环境中Smadl基因表达的影响。方法：以12月龄自然衰老雄性大鼠60只为模型，随机分为两组，每组30只。自鼠龄12月龄始，分别给予生理盐水、补肾方（密骨胶囊）灌胃，在给药8、16、24w末三个时间点，各时间点每组各取10只大鼠，取股骨骨髓，Trizol法抽提总RNA，RT—PCR技术半定量检测Smadl基因表达，采用天能GIS凝胶图像处理系统分析各组表达灰度值。结果：补肾方组大鼠骨髓微环境中Smadl基因表达明显优于生理盐水组。在8、16、24w末，补肾方组与生理盐水组的基因表达灰度值分别为0．61（95％CI=0．41，0．83）VS0．76（95％CI=0．56，0．98）、0．97（95％CI=0．81，1．13）VS0．61（95％CI=0．45，0．78）、1．75（95％CI=1．59，1．92）Vs0．56（95％CI=0．40，0．73）。两组间差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：补肾中药（密骨胶囊）可以上调骨髓微环境中Smadl基因表达水平，可能是其促骨形成、修复骨损伤作用的分子机制之一。     

补阳还五汤对骨折模兔血液成份和血清生化的影响

为探讨补阳还五汤促进骨折愈合的机制,选新西兰大白兔60只,随机分为对照组及实验组。实验组人工折骨造模,并分别于造模后第7、14、2、35、49天进行成份及血清生化含量测定。结果显示实验组血液成份与对照组相比,在各观察时间段内均无统计学差异;而血清生化指标比较,实验组血清钙浓度于术后7、14、21、49天高于对照组,碱性磷酸酶浓度在术后第7、14、2、35天高于对照组（P＜0．05或P＜0．01）。表明补阳还五汤可能是通过提高血清钙及碱性磷酸酶的含量,促进骨折愈合的。     

伤科接骨片对实验型骨折愈合过程中TGF-β1的影响

目的：观察应用伤科接骨片后骨折愈合过程中TGF－β1（转化生长因子－β1）的变化,以进一步探讨其促进骨折愈合的机理。方法：72只日本大耳白兔随机分为实验组和对照组,每组各36只,在兔桡骨处用手术方法制备骨折模型,术后即日起试验组给与伤科接骨片,150mg/kg/d,于术后3天,1周,2周,3周,4周,6周每组分别处死6只兔,取标本,采用免疫组化方法进行染色,光镜下观察,并利用图像分析的方法测定其TGF－β1表达强度。结果：在骨折后的同一时间,实验组和对照组的骨痂组织中TGF－β1的染色有差异,实验组的峰值比对照组约提前一周出现,且比对照组的峰值高,结论：伤科接骨片可以调节骨折愈合过程中TGF－β1的合成和分泌,从而促进骨折的愈合,TGF－β1可能是伤科接骨片对骨折愈合过程影响的一个作用环节。     

蛇床子素对大鼠原代软骨细胞增殖的抑制作用

目的：观察蛇床子素对大鼠软骨细胞增殖的影响。方法：分离出生24h内大鼠的软骨细胞,进行原代培养。细胞扩增至第2代时观察1周内细胞增殖情况,并用细胞免疫荧光法鉴定Ⅱ型前胶原基因（type Ⅱ procollagen gene,Col2a1）的表达。将第2代软骨细胞分为对照组和不同浓度蛇床子素（6．25、12．5、25和50μmol／L）组。药物作用24和48h后,观察细胞增殖情况,蛋白质印迹法和聚合酶链反应法检测增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）和细胞周期素D1（cyclinD1）的表达。结果：第2代原代软骨细胞活力正常,Col2al表达明显。蛇床子素可以抑制软骨细胞的增殖,并随浓度的增加,抑制作用愈明显。蛋白质印迹法和聚合酶链反应法检测发现,随着蛇床子素浓度的增加,软骨细胞中PCNA和cyclinD1的表达下降。结论：蛇床子素可能通过抑制PCNA和cyclinD1的表达发挥抑制软骨细胞增殖的作用。     

全膝关节磁共振成像积分对膝骨关节炎诊断价值的探讨

目的:探讨全膝关节磁共振成像积分(WORMS)对膝骨关节炎(KOA)患者的诊断价值。方法:回顾性分析2009年11月至2011年1月门诊及住院KOA伴膝关节积液患者70例,男12例,女58例;年龄46～75岁,平均(59.66±9.93)岁。用WOMAC量表进行临床症状评估,用K-L分级及全膝关节磁共振成像积分(WORMS)进行放射学评估,同时应用ELISA法检测患者关节液中COMP及CTX-Ⅱ的浓度。并对上述指标进行相关性分析及多重线性回归分析。结果:WOMAC评分及WORMS分别为(57.50±8.20)和(64.54±16.45)分,CTX-Ⅱ及COMP含量分别为2.42ng/ml和4.56ng/ml。选择WORMS四分位数中轻和严重2组,比较2组COMP差异有统计学意义(Z=2.04,P=0.039),而CTX-Ⅱ差异则无统计学意义(Z=0.79,P=0.427)。相关性分析发现WORMS与WOMAC评分、K-L分级呈正相关(r=0.777,P<0.01;r=0.716,P<0.01),K-L分级与WOMAC评分也呈正相关(r=0.692,P<0.01)。WORMS中关节软骨积分、骨赘积分、滑膜炎积分分别与WOMAC评分、K-L分级及COMP亦呈正相关(r=0.771,P<0.01;r=0.509,P<0.01;r=0.917,P<0.01)。以WOMAC评分为应变量,年龄、性别、K-L分级、WORMS、COMP和CTX-Ⅱ为自变量进行逐步回归(F=20.327,P<0.01),KOA病情主要受WORMS、K-L分级影响(P=0.015,P=0.025)。结论:WORMS对膝骨关节炎的诊断有较高的参考价值。WORMS高时,关节液中COMP含量升高。膝骨关节炎的临床症状主要受WORMS、K-L分级影响。     

补肾和柔肝中药对C57黑鼠膝骨关节炎滑膜中COMP基因表达的影响

目的：研究补肾和柔肝中药对C57黑鼠膝骨关节炎滑膜中软骨寡聚基质蛋白（COMP）基因表达的影响。方法：将7周龄C57黑鼠随机分为空白组、模型组、补肾组、柔肝组、芬必得组,雌雄各半。除空白组外,其余各组先进行4周跑步造模,再分别予生理盐水、补肾方（密骨胶囊）、柔肝方（养血软坚胶囊）、芬必得灌胃。给药4周后取材,应用Trizol法抽提总RNA,RT-PCR技术半定量检测膝关节滑膜中COMP基因表达,采用天能GIS凝胶图像处理系统分析各组表达灰度值。结果：模型组与空白组相比,滑膜中COMP基因表达明显升高（P〈0.01）,各药物组与模型组比较,滑膜中COMP基因表达明显降低（P〈0.05）;补肾组与柔肝组比较,滑膜中COMP基因表达明显升高（P〈0.01）,两者有显著性差异。结论：补肾和柔肝中药均可以下调C57黑鼠膝骨关节炎滑膜中COMP基因的表达水平,可以延缓滑膜的增生和纤维化,减少滑膜分泌炎症介质和软骨降解酶,对骨关节炎有明显的防治作用,且柔肝中药明显好于补肾中药。