不同方案沙利度胺治疗多发性骨髓瘤的临床效果及其与TNF-α水平的关系

本研究探讨不同方案沙利度胺（thalidomide）治疗多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）的临床疗效和不良反应，寻求沙利度胺一线治疗多发性骨髓瘤的最佳方案，并分析临床疗效与血清TNF-α水平的关系。分别应用高剂量沙利度胺（HD—T）、沙利度胺＋VAD化疗（T—VAD）、沙利度胺＋MP化疗（T—MP）、沙利度胺＋地塞米松（TD）及低剂量沙利度胺（LD—T）等方案治疗85例多发性骨髓瘤，以常规VAD化疗组为对照，观察临床疗效、不良反应、治疗相关死亡率；同时应用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测30例沙利度胺治疗的多发性骨髓瘤（15例有效，15例无效）患者治疗前后血清TNF-α水平并与临床疗效比较。结果表明：HD—T、T—VAD、T—MP、TD、LD-T5个组的治疗有效率分别为25．0％、80．0％、71．4％、33．3％、27．3％，其中T-VAD、T-MP组治疗有效率较其他组及常规VAD化疗组显著增高（P〈0．05）。显著不良反应（外周神经病变、乏力、腹胀、便秘、皮疹、水肿、白细胞和血小板减少）5个组的发生率为75．0％、30．0％、28．6％、14．3％、9．1％。没有出现Ⅳ级毒性，没有患者出现深静脉血栓，治疗相关死亡率为0％。同时发现，沙利度胺治疗无效组治疗前后血清TNF-α水平分别是（44．7±5．7）pg／ml和（46．3±5．7）pg／ml，两者无显著差异（P〉0．05）；沙利度胺治疗有效组的治疗后血清TNF-α水平（27．3±6．4）pg／ml，较治疗前（49．2±7．3）pg／ml显著降低（P〈0．05）。结论：与常规化疗比较，沙利度胺是治疗多发性骨髓瘤的有效药物，其联合化疗（T—VAD，T—MP）效率高，副作用小，可认为是优选方案。患者血清TNF-α水平是判断沙利度胺治疗多发性骨髓瘤疗效的指标之一，它在多发性骨髓瘤发病中可能具有一定作用。     

人髓性白血病细胞系U937定向克隆cDNA表达文库的构建及其意义

本研究的目的是构建髓性白血病U937细胞系表达型cDNA文库 ,为肿瘤抗原的筛选奠定工作基础。提取U937细胞总RNA ,分离mRNA ,反转录合成双链cDNA ,消平cDNA末端 ,连接EcoRⅠ适配子 ,磷酸化EcoRⅠ适配子 5′端 ;XhoⅠ酶切后 ,丙烯葡聚糖凝胶 S4 0 0柱除去小于 4 0 0bpcDNA片段 ,与λZAP表达载体连接 ,包装蛋白包装后建成cDNA文库 ;取出 1μl倍比稀释感染大肠杆菌XL1 Blue MRF′ ,测定文库大小、重组率 ;随机挑取 10个噬斑 ,在ExAssist辅助性噬菌体的作用下 ,释放出PBK CMV噬菌粒 ;感染大肠杆菌XLOLR ,铺于卡那霉素抗性的LB平板 ;挑取克隆 ,37℃震摇过夜 ;抽提质粒 ,经EcoRI和XhoI酶切后 ,初步确定片段的大小及多样性。结果 :构建成含 2 .87× 10 6重组子的U937细胞cDNA文库 ,重组子平均插入外源片段长约 1.7kb。结论 :所建文库合格 ,适合用于筛选目的cDNA克隆。     

CD4^＋CD25^highT细胞在特发性血小板减少性紫癜发病机制中的作用

本研究探讨特发性血小板减少性紫癜（ITP）治疗前后患者外周血中CD4^＋CD25^highT细胞（CD25-PE染色阳性〉10^2为CD4^＋CD25^highT细胞）的表达情况及其可能的作用机制。应用免疫荧光标记和流式细胞术检测20例治疗前ITP患者、20例治疗后患者及14名正常人外周血中CD4^＋CD25^highT细胞的表达。结果表明：ITP患者治疗前外周血T细胞表面CD4^＋CD25^highT细胞表达水平明显低于治疗后组及正常对照组（P均〈0．01）；ITP治疗后患者组与正常对照组相比无显著性差异（P〉0．05）。结论：ITP治疗前患者外周血中CD4^＋CD25^highT细胞水平较正常对照组明显降低，而在治疗有效后有所升高。外周血CD4^＋CD25^highT细胞表达率与血小板数量呈正相关。CD4^＋CD25^highT细胞水平的检测可作为对ITP患者预后判断的一个有效指标，并可以作为免疫治疗的靶点进行进一步研究。     

沙利度胺对人外周血单个核细胞免疫正调控作用

本研究观察沙利度胺对外周血单个核细胞（PBMNC）增殖、淋巴细胞亚群、细胞因子分泌及其杀伤活性的影响，探讨沙利度胺治疗MM的免疫调节机理。用MTT法检测PBMNC的增殖及杀伤活性，用流式细胞术检测淋巴细胞亚群的变化，用ELISA方法检测培养上清中细胞因子的浓度。结果表明：与阴性对照组相比，沙利度胺可明显刺激正常人PBMNC中CD8^＋T、NK细胞的增殖，显著增加IL-6的分泌，减少IFN-γ的分泌，不影响IL-2、IL-10的分泌；在同一效靶比时，5μg/ml的沙利度胺可明显增强PBMNC的杀伤活性（P〈0．01），效靶比为40：1时沙利度胺组杀伤活性最强。结论：沙利度胺主要刺激PHA活化后的正常人PBMNC中CD8^＋T、NK细胞的增殖及IL-6的分泌来增强PBMNC的杀伤活性，通过增强细胞免疫功能发挥抗骨髓瘤作用。     

CHG预激化疗方案治疗难治性急性髓系白血病临床观察

目的 探讨G-CSF联合高三尖杉酯碱和小剂量阿糖胞苷之CHG预激化疗方案治疗难治性急性髓系白血病的临床疗效、不良反应.寻求高效安全、毒副反应小的新型化疗方案.方法 应用CHG标准预激化疗方案治疗68例难治性急性髓系白血病(AML),与常规TA化疗方案比较,观察临床疗效、各种不良反应、毒副作用、治疗相关死亡率.结果 总缓解率63.2%(完全缓解率44.1%,部分缓解率19.1%),较TA方案缓解率显著增高(P<0.05),无严重内脏出血,粒细胞缺乏44.1%,平均持续时间4.5d,无重症感染、严重消化道反应和心、肝、肾功能损害.结论 CHG预激化疗方案治疗难治性急性髓系白血病疗效显著,无严重毒副反应,严重治疗相关死亡率均较低,是高效安全的新型化疗方案.     

MLAA-22在急性单核细胞白血病中的表达及临床意义

目的:检测MLAA-22基因及其编码蛋白在不同状态急性单核细胞白血病（M5）中的表达,探讨MLAA-22是否可作为M5特异性标记应用于临床。方法:收集临床初诊、完全缓解及复发的M5患者骨髓血,应用荧光实时定量PCR（QRT-PCR）及Western blot检测各组MLAA-22 mRNA及蛋白质的表达,比较、分析基因及蛋白在各组中的表达变化,分析MLAA-22与M5疗效及转归的关系。结果:MLAA-22 mRNA在初诊的M5中特异性高表达,与完全缓解组表达差异具有统计学意义（P<0.01）,与复发组差异无统计学意义（P>0.05）。MLAA-22蛋白在初诊的M5中显著高表达,完全缓解组MLAA-22蛋白表达较初诊患者明显下降。结论:MLAA-22 mRNA及蛋白在急性单核细胞白血病中特异性高表达,有望成为急性单核细胞白血病诊断、临床疗效评估、预后判断及微小残留病监测的特异性指标,值得深入研究。     

急性白血病细胞B7-1及MHC分子的表达

目的：探讨共刺激分子B7-1(CD80)及MHC分子在急性白血病(acute leukemia，AL)中的表达，方法：应用一组mAb，采用免疫荧光法对AL52例瘤细胞及34例正常人骨髓单个核细胞（BMMC)表面B7-1及主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex，MHC)分子的表达进行了检测．结果：所有患瘤细胞及正常人BMMC上MHCI类分子表达强阳性，MHCⅡ类分子表达920k，阳性，而B7-1表达差异较大，急性单核细胞白血病(M5)表达阳性率最高(8／11)，而急性粒细胞白血病(M1，M2，M3)均无表达．结论：B7-1缺陷是白血病细胞逃避宿主免疫监视的重要原因，转染B7-1基因的瘤苗可能是免疫基因治疗的有效途径。     

土地戈登菌致血流感染1例

<正>土地戈登菌(Gordonia terrae)是一种需氧、无动力、生长缓慢的革兰阳性杆菌,弱抗酸染色阳性,其广泛存在于自然界及医院环境中[1]。随着检测技术的提高,国内外有关土地戈登菌引起人类感染的报道逐渐增多,可引起脓肿、腹膜炎、血流感染和导管相关性血流感染等疾病[2]。本文报道1例白血病化疗期间发热的患者,其血培养中分离出土地戈登菌。     

应用刘智斌教授触骨针法治疗肩周炎的临床疗效观察

目的观察触骨针法配合电针治疗急性期肩周炎镇痛的临床疗效。方法将120例患者随机分为触骨针法+电针组(观察组)、普通针刺组(对照1组)、触骨针法组(对照2组)、普通针刺+电针组(对照3组)进行对照研究,四组按1:1:1:1比例分配,每组30例。四组均选取患侧肩前、肩髃、肩髎穴(肩三针)及臂臑、天宗、曲池、合谷穴。隔天治疗1次,7次为一疗程,共治疗2个疗程。观察四组治疗前及治疗后第1、3、7、10、14天活动及疼痛的程度分级法(VRS法)和美国加州大学洛杉矶分校(UCLA)肩关节功能评分对疗效进行判定。结果四组治疗后14天VRS分级降低、UCLA评分增高(均P0.05);观察组治疗后VRS分级降低、UCLA评分增高均比三组对照组变化明显(均P0.05)。结论观察组效果最好,对照3组第二,对照2组第三,对照1组第四,触骨针法配合电针治疗急性期肩周炎较观察组有増效作用。     

GHA及新型联合预激化疗方案治疗难治性急性髓系白血病和骨髓增生异常综合征的队列研究

目的:本文探讨GHA(G-CSF+高三尖杉酯碱+小剂量阿糖胞苷)及GHAA和GHTA等新型联合预激化疗方案治疗难治性急性髓系白血病(AML)和骨髓增生异常综合征(MDS)的临床疗效和不良反应,寻求高效低毒的新型化疗方案,并探索其与共刺激分子B7.1的关系。方法:应用GHA标准预激化疗方案,即G-CSF 100μg/(m2·d)皮下注射,d 0-14;高三尖杉酯碱1.0 mg/(m2·d)静脉点滴,d 1-14;阿糖胞苷(Ara-C)7.5-10 mg/(m2·d)皮下注射,q12h,d 1-14,以及GHAA、GHTA等联合预激化疗(联合阿柔比星20 mg d 1-7或吡柔比星20 mg d 1-7)治疗74例难治性急性髓系白血病和46例骨髓增生异常综合征(RAEB和RAEBT),与常规化疗组(MA、TAE方案)56例比较,分别观察不同方案的临床疗效,不良反应,治疗相关死亡率并随访生存;同时应用免疫荧光法检测各组肿瘤细胞上共刺激分子B7.1的表达并与临床疗效比较。结果:1预激化疗组治疗难治性AML缓解率67.56%(CR率54.05%,PR率13.51%),疗效显著优于常规化疗组(P0.05),其中AML-M2组、AML-M5组CR率(65.51%,61.90%)显著高于其它AML亚型(P0.05),最长持续缓解已4年,2治疗MDS缓解率60.87%(CR率45.65%,PR率15.22%),预激化疗组疗效也显著优于常规化疗组(P0.05)。3与GHA标准预激化疗相比,无论难治性AML还是MDS,新型联合预激化疗缓解率较高,其中AML缓解率为85.18%,MDS缓解率为81.25%,均有显著性差异(P0.05)。4化疗后出现粒细胞缺乏及血小板减少、贫血等,平均持续时间7-14 d,重症感染发生率1%,无严重出血、消化道反应和心、肝、肾功能损害,治疗相关死亡率为零。预激化疗组主要观察指标与常规化疗组相比,Ⅲ/Ⅳ毒副作用明显减轻,安全性好,具有统计学差异(P0.05)。5AML和MDS以及不同类型B7.1表达阳性率差异较大,AML-M2组、AML-M5组明显高于其它AML组(P0.05)。同一病例B7.1表达与预激化疗疗效呈正相关,即化疗有效病例B7.1表达往往阳性,而B7.1表达阴性者的治疗几乎无效。结论:含有高三尖杉酯碱的GHA和GHAA、GHTA等联合预激化疗方案治疗难治性急性髓系白血病和骨髓增生异常综合征的疗效肯定,不良反应较轻,无严重毒副作用和治疗相关死亡率,尤其是新型GHAA和GHTA等新型联合预激化疗较传统GHA更优,是高效低毒的新型化疗方案。肿瘤细胞上的共刺激分子B7.1表达可能与预激化疗疗效有关,其机理尚需进一步研究。