重组BMP7真核表达载体的构建及其对关节软骨细胞的转染

目的：构建pcDNA3.1-BMP7真核表达载体,并探讨转染关节软骨细胞的脂质体和DNA的最佳比例及BMP7基因表达。方法：构建pcDNA3.1-BMP7真核表达载体。用脂质体将pcDNA3.1-BMP7包裹形成DNA脂质体复合物,转染家兔关节软骨细胞,G₄₁₈筛选。转染过程中确定脂质体浓度、脂质体与pcDNA3.1-BMP7质粒的比例。原位杂交、PCR、Western blotting测定BMP7表达。结果：构建了pcDNA3.1-BMP7真核表达载体,脂质体与 pcDNA3.1-BMP7质粒最佳转染浓度为3 mL培养液中加10 μL脂质体和4 μg pcDNA3.1-BMP7质粒(2.5∶1);以400 mg·L^-1 G₄₁₈的正常培养液筛选28 d,BMP7为阳性表达。结论：在脂质体介导下,pcDNA3.1-BMP7转染家兔关节软骨细胞获得成功,且BMP7在该细胞中稳定表达。     

格列吡嗪缓释胶囊人体相对生物利用度研究

 目的 研究格列吡嗪缓释胶囊在正常人体内相对生物利用度。方法 采用反相高效液相色谱法测定16名健康男性志愿者单剂量 po 10 mg和多剂量 po 格列吡嗪缓释胶囊及控释片后的血浆药物浓度,计算两制剂的药代动力学参数及相对生物利用度,以c_max,AUCo～₄₈等指标,利用方差分析、双单侧t检验及(1-2α)置信区间分析判定两制剂生物等效性。结果 两制剂药-时曲线有双峰,连续服药4 d达稳态,单剂量与多剂量给药主要药代动力学参数经统计分析无显著差异(P＞0.05)。结论 格列吡嗪缓释胶囊与控释片生物等效。     

双黄连注射液与注射用头孢唑啉钠等体外配伍稳定性研究

目的研究双黄连注射液与注射用头孢唑啉钠等药物体外配伍的稳定性。方法考察双黄连注射液与注射用头孢唑林钠、地塞米松磷酸钠注射液、利巴韦林注射液在室温下配伍后物理外观、pH值、微粒的变化。结果双黄连注射液与注射用头孢唑林钠、地塞米松磷酸钠注射液、利巴韦林注射液溶液两药或多药配伍后外观澄明、pH值无明显变化,但双黄连注射液与注射用头孢唑啉钠及地塞米松磷酸钠注射液配伍后0.5 h出现少量絮状悬浮物,且直径≥25μm 微粒数量显著增加。结论双黄连注射液可以与注射用头孢唑啉钠、地塞米松磷酸钠注射液、利巴韦林注射液二联应用,不宜多联应用。     

骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠脑缺血的实验研究

目的 研究经静脉移植的骨髓间充质干细胞(MSCs)在缺血大鼠脑组织的分布、改善神经功能的情况及对凋亡相关蛋白Bcl-2表达的影响.方法 体外培养扩增MSCs后,用绿色荧光染料羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)标记,静脉途径移植给大脑中动脉缺血2 h再灌注的SD大鼠,观察各组的神经功能,观察MSCs在脑内的分布,...     

RP-HPLC法测定甲磺酸帕珠沙星原料含量及其有关物质

目的:反相高效液相色谱法测定甲磺酸帕珠沙星原料含量及其有关物质。方法:采用HypersilC18(5μm,4.6mm×250mm)色谱柱,以0.1%磷酸(加0.0805g磷酸氢二钾):乙腈(85:15)为流动相,流速1.0mL.min,柱温30℃,于243nm波长处测定甲磺酸帕珠沙星含量及有关物质。40±2℃放置6个月、25±2℃放置12个月考察质量稳定性。结果:1.0-500μg/mL内峰面积与浓度线性关系良好。样品溶液室温放置24小时稳定,RSD<1.0%。甲磺酸帕珠沙星保留时间为7.012分钟,与有关物质分离度>1.5。3批原料含量平均值为99.8%,有关物质含量<1.0%。加速试验及长期放置质量稳定。结论乏RP-HPLC法测定甲磺酸帕珠沙星原料含量及其有关物质简便,结果可靠,可用于甲磺酸帕珠沙星原料及其制剂的质量控制。     

高效液相色谱法测定盐酸曲普利啶血浆浓度及药动学

 目的 对健康受试者进行盐酸曲普利啶的药物动力学研究，以评价胶囊剂的生物等效性。 方法 18名健康志愿受试者，随机分组，自身交叉口服盐酸曲普利啶胶囊和片剂。用反相高效液相色谱法测定盐酸曲普利啶血浆浓度，3P87拟合药动学参数，计算药动学参数，并以AUC_0～∞，t_max,c_max为指标，用方差分析、双单侧t检验及12α置信区间分析片剂与胶囊的生物等效性。结果盐酸曲普利啶胶囊与片剂的主要药动学参数分别为c_max(42.1±6.3)和(40.7±6.4) μg·L^-1,t_max(1.8±0.3)和(1.8±0.3) h，AUC_0～∞(156.5±28.4)和(160.9±26.7) μg·h·L,胶囊剂的相对生物利用度为(98.3±5.4)%。结论两制剂均符合一房室模型，为生物等效制剂。     

阿莫西林舒巴坦酯片人体药代动力学及相对生物利用度研究

目的 :研究阿莫西林舒巴坦酯片中阿莫西林和舒巴坦的药代动力学及相对生物利用度。方法 :将20名健康志愿受试者随机分为两组 ,采用自身交叉设计 ,单剂量口服国产的阿莫西林舒巴坦酯片和进口的泰霸猛LBL500 片各2片 (每片含阿莫西林250mg、舒巴坦250mg) ,采用反相高效液相色谱法同时测定血浆药物浓度。结果 :国产制剂与进口制剂阿莫西林Tmax 分别为(1 04±0 26)h、(1 10±0 28)h ,Cmax 分别为 (5 16±1 30)mg/L、(5 25±1 21)mg/L ,AUC0～∞分别为 (13 30±3 12)mg/(h·L)、(13 33±3 53)mg/ (h·L) ;舒巴坦的Tmax 分别为 (0 80±0 10)h、 (0 81±0 11)h ,Cmax 分别为 (5 73±1 44)mg/L、(5 70±1 46)mg/L;AUC0～∞分别为 (13 25±2 41)mg/(h·L )、(13 28±2 26)mg/(h·L)。结论 :国产阿莫西林舒巴坦酯片与进口的泰霸猛LBL500 片为生物等效制剂。     

盐酸曲普利啶胶囊人体生物利用度研究

目的：研究盐酸曲普利啶胶囊在正常人体的相对生物利用度。方法：采用反相高效液相色谱法测定１０名志愿者单剂量口服５ｍｇ盐酸曲普利啶胶囊和片剂后的血药浓度，计算二者的药动学参数及相对生物利用度。以Ｃｍａｘ、ＡＵＣ０－∞等为指标，用双单侧Ｔ检验法及（１－２α）置信区间法分析两种制剂的生物等效性。结果：二者药时曲线用一室模型拟合，统计结果表明，Ｃｍａｘ等参数无显著性差异（Ｐ〉０．０５）。结论：盐酸曲普利啶胶     

应用转染BMP7基因组织工程软骨修复兔膝关节软骨缺损观察

目的 构建转染骨形态发生蛋白-7(BMP7)基因组织工程软骨,观察对家兔膝关节软骨缺损的修复作用.方法 将转染BMP7基因的软骨细胞(5×109个/L)接种于胶原-纤维蛋白凝胶的支架中,培养14 d后移植于家兔膝关节软骨表面,直径为5.0 mm,深达软骨下骨板的全层软骨缺损部位.移植后4、8、12周处死家兔,通过创面形态观察、组织形态的光镜观察、BMP7基因在移植部位的表达,评价转染BMP7基因组织工程软骨对兔膝关节软骨缺损的修复作用.结果 转染BMP7和未转染BMP7基因组织工程软骨培养物的体积分别为9 mm × 9 mm×2 mm和8 mm×8 mm×2 mm.转染BMP7基因组移植于家兔膝关节软骨后4、8、12周,均有软骨缺损修复作用,且移植部位有红褐色BMP7 mRNA和棕红色BMP7蛋白表达.移植后12周修复效果佳.优于未转染BMP7基因组.结论 转染BMP7和未转染BMP7基因组织工程软骨对兔膝关节软骨缺损均有修复作用,但转染BMP7基因组织工程软骨修复作用更强.     

用反相HPLC法测定盐酸氟桂嗪胶囊在人体中的相对生物利用度

用及相HPLC-紫外法对国产3种盐酸氟桂嗪胶囊进行了人体生物利用度研究。9名健康志愿者采用交叉、平行、对照法口服3种盐酸氟桂毒胶囊，测定85小时内不同时间的血药浓度。结果表明，相对生物利用度为96．18％、94．10％．各项药动学参数均无显著差异（P＞0．05）。