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头孢拉定胶囊的人体生物等效性研究 总被引:6,自引:0,他引:6
目的研究国产头孢拉定胶囊的相对生物利用度,评价其生物等效性.方法18名健康受试者单剂量口服受试制剂(A)和参比制剂(B)500mg后,采用HPLC法测定血浆中的药物浓度.结果A和B的Cmax分别为16.32±2.30和14.70±3.98mg·L-1;tmax分别为0.86±0.21和1.04±0.33h;AUC0-,ξ分别为22.75±3.11和22.84±3.92mg·h·L-1;AUC0∞分别为23.88±3.44和24.02±4.16mg·h·L-1.经统计学分析,A和B两药的制剂间和周期间均无显著性差异(P>0.05),A的相对生物利用度为100.43%±10.02%.结论两种头孢拉定胶囊具有生物等效性. 相似文献
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应用转BMP7基因软骨细胞构建组织工程软骨 总被引:5,自引:0,他引:5
目的:利用转BMP7基因软骨细胞构建组织工程软骨,测定BMP7基因在构建的组织工程软骨中的表达,探讨与未转BMP7基因软骨细胞构建的组织工程软骨的生物学差异。
方法:实验于2004—06/2005-01在哈尔滨医科大学附属第二医院临床药学药物研究所完成。应用转染重组pcDNA3.1-BMP7真核表达载体质粒并用G418筛选14d的阳性克隆软骨细胞,以胶原-纤维蛋白凝胶为支架,构建转BMP7基因组织工程软骨。以未转BMP7基因组织工程软骨作为对照,软骨细胞的接种密度为5&;#215;10^9L^-1。用甲苯胺蓝、苏木精-伊红染色对组织工程软骨培养物组织学分析;原位杂交法检测Ⅱ型胶原mRNA的表达;透射电镜观察组织工程软骨培养物的超微结构;原位杂交和免疫组化法测定体外培养物BMP7mRNA和蛋白的表达。
结果:①BMP7基因转染软骨细胞情况:G418筛选7d时大量细胞死亡,约30%的细胞存活,且贴壁生长。G418连续筛选14,28d均有阳性克隆细胞生成,贴壁生长率100%,存活的阳性克隆细胞为转染成功的软骨细胞。②组织工程软骨培养物大体形态及显微镜观察结果:构建的组织工程软骨培养物呈浅粉红色胶冻样圆盘状,透明,体积约为16mm&;#215;16mm&;#215;3mm。显微镜下只能观察到呈圆形的浅层细胞。③组织工程软骨培养物组织学分析结果:组织工程软骨培养物体外培养7,14,28d,细胞周围有丰富的细胞外基质,转BMP7基因组织工程软骨培养物细胞基质较多,体外培养14d软骨细胞合成和分泌最为活跃。④组织工程软骨培养物Ⅱ型胶原表达mRNA原位杂交检测结果:软骨细胞核周围呈棕黄色,有mRNA表达。⑤不同培养时间下组织工程软骨培养物DNA含量的测定情况:DNA含量随着培养时间的推移逐渐增加,21d时达到高峰,转BMP7基因比未转染BMP7基因的组织工程软骨培养物DNA含量高(P〈0.05)。⑥不同培养时间下组织工程软骨培养物糖胺多糖含量的测定情况:转BMP7基因组织工程软骨培养物体外培养34d时糖胺多糖含量最高,且各时间点糖胺多糖含量均高于未转BMP7基因组织软骨培养物(P〈0.05)。⑦组织工程软骨培养物的超微结构观察:与未转BMP7基因组织工程软骨培养物比较,体外培养7d,转BMP7基因组软骨培养物内软骨细胞细胞器发达,内质网、线粒体和高尔基体相对较丰富,细胞基质合成较旺盛;体外培养21d,转BMP7基因组织工程软骨培养物中软骨细胞粗面内质网仍较发达,线粒体和高尔基体相对减少,细胞基质合成能力减弱。⑧BMP7 mRNA表达原位杂交测定结果:体外培养7,14,21d,转BMP7基因组织工程软骨培养物软骨细胞中均有BMP7 mRNA表达,而未转BMP7基因组织工程软骨培养物未见软骨细胞表达BMP7 mRNA。⑨BMP7蛋白表达免疫组化测定结果:体外培养7,14,21d,转BMP7基因组织工程软骨培养物软骨细胞中均有BMP7蛋白表达,而未转BMP7基因组织工程软骨培养物未见软骨细胞表达BMP7蛋白。
结论:成功构建转BMP7基因组织工程软骨,其生物学特性优于未转BMP7基因软骨细胞构建的组织工程软骨,作为移植物修复软骨组织缺损具有一定的可行性和优越性。 相似文献
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摘要目的建立浓缩乳腺丸中有效成分吉马酮、芍药苷、柴胡皂苷(d)及阿魏酸的高效液相色谱(HPLC)测定方法。方法醇提并水提法制备浓缩乳腺丸。Diamonsil C18(4.6 mm×200 mm,5 μm)色谱柱,4种有效成分流动相分别为,吉马酮:乙腈:磷酸水溶液(50:50,pH 3.23);芍药苷:甲醇:水(25:75);柴胡皂苷(d):甲醇:乙腈:水(20:35:45);阿魏酸:甲醇:水:冰醋酸(32:68:0.5)。流速均为1.0 mL8226;min-1,检测波长(λ)分别为210,230,201,323 nm。进样体积均为20 μL,柱温分别为35,25,25,25 ℃。结果4种有效成分在其对应线性范围内与峰面积呈良好的线性关系,r依次为0.999 9,0.999 8,0.999 5,0.999 5;平均提取回收率分别为75.91%,82.38%,75.04%,67.67%。结论该实验所建立的HPLC法可用于浓缩乳腺丸中相关有效成分的含量测定,方法灵敏,操作简便,测定结果准确可靠,可用于浓缩乳腺丸的质量控制。 相似文献
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目的:考察替米沙坦对体外培养的人脐带动脉血管平滑肌细胞(HUASMCs)表达细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和内皮素-1(ET-1)影响,为临床应用替米沙坦治疗高血压等疾病提供参考。方法:采用组织块贴壁法培养HUASMCs。取传3代的细胞进行α-actin肌动蛋白免疫组化染色法鉴定。取传3代细胞,分别加入1,10,100 μg·mL-1 3种质量浓度替米沙坦细胞培养液,于加药后48 h进行试验。分别采用RT-PCR法和ELISA法,检测替米沙坦对HUASMCs表达ICAM-1和ET-1 mRNA和蛋白的影响。结果:组织块贴壁法成功培养出HUASMCs,传第3代细胞呈现明显的HUASMCs特性。低、中、高3种作用浓度的替米沙坦均可抑制HUASMCs表达ICAM-1和ET-1 mRNA(P<0.05),也均可抑制HUASMCs表达ICAM-1和ET-1蛋白(P<0.05),且抑制作用均呈浓度依赖性(P<0.05)。结论:替米沙坦可使体外培养的HUASMCs表达ICAM-1和ET-1下调。 相似文献
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目的:探讨脉炎消口服液在体外对人脐动脉平滑肌细胞(HUASMCs)增殖的影响及其作用机制。方法:体外组织贴块培养HUASMCs,并传23代,免疫组化法进行鉴定;采用MTT法观察不同体积分数脉炎消口服液(0.4%、4%、40%)对HUASMCs细胞增殖的抑制作用;采用RT-PCR法检测不同体积分数脉炎消口服液(0.4%、4%、40%)对HUASMCs细胞IL-6 mRNA表达水平的影响。结果:组织块贴壁法原代培养HUASMCs,传3代后,阳性细胞率为90%;脉炎消口服液对HUASMCs的增殖具有明显的抑制作用,且体积分数在一定范围内(0.4%3代,免疫组化法进行鉴定;采用MTT法观察不同体积分数脉炎消口服液(0.4%、4%、40%)对HUASMCs细胞增殖的抑制作用;采用RT-PCR法检测不同体积分数脉炎消口服液(0.4%、4%、40%)对HUASMCs细胞IL-6 mRNA表达水平的影响。结果:组织块贴壁法原代培养HUASMCs,传3代后,阳性细胞率为90%;脉炎消口服液对HUASMCs的增殖具有明显的抑制作用,且体积分数在一定范围内(0.4%40%)呈浓度依赖性。结论:脉炎消口服液抑制HUASMCs增殖的作用是通过下调细胞IL-6mRNA的表达水平而实现的。 相似文献
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目的:测定盐酸塞利洛尔在人体内药代动力学特性及其3种不同剂量的药代动力学参数变化规律?方法:健康志愿者9名,3×3拉丁方设计,单剂量po 100,200,400mg盐酸塞利洛尔片,采用反相高效液相色谱法测定不同时间的血药浓度,在计算机上以MCPKP程序拟合,求算药代动力学参数?结果:100,200,400mg国产盐酸塞利洛尔片的t1/2K,K,tmax,cmax,AUC0~∞分别为3.37,3.45和3.56h,0.24,0.21和0.20h-1,3.64,3.38和3.87h,177.55,501.4和1188.58ng·ml-1,1615.41,4508.38和10828.55μg·h-1。结论:经方差分析,三剂量组的t1/2k,K,tmax等参数无显著差异(P>0.05),cmax,AUC0~∞均不呈倍数变化? 相似文献
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用RP-HPLC法测定人血浆中丙泊酚浓度 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:建立测定人血浆中丙泊酚浓度的RP-HPLC法.方法:以麝香草酚(thymol)为内标,血浆中加入缓冲液(0.1 mol/L NaH2PO4)混匀后经环己烷萃取,吸取有机相,加入四甲基氢氧化铵-异丙醇稀释液,氮气吹干,以流动相甲醇-水(80∶20)溶解.色谱柱:Diamonsil C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm);流速:1 ml/min;检测波长:270 nm;柱温:30℃.结果:丙泊酚血药浓度在0.20~~ 10.00 μg/ml范围内线性关系良好(r=0.9997),最低定量限为0.20 μg/ml.低、中、高3种浓度的方法回收率为98.37%~100.26%,提取回收率为83.47%~92.11%.日内RSD为4.72%~9.70%,日间RSD为4.27%~6.41%.结论:该方法适用于丙泊酚的人体药动学研究和血药浓度检测. 相似文献
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目的研究格列吡嗪胶囊人体药物代谢动力学及相对生物利用度.方法用HPLC法测定10名受试者单剂量交叉口服5mg格列吡嗪胶囊和片剂后的血药浓度,MC-PKP药动学程序拟合,得药动学参数,计算胶囊剂的相对生物利用度(F).结果胶囊剂的Cmax为(456±60)ng/ml、Tmax为(2.9 5±0.6)h、AUC为(2335±180)h*ng/ml.以上参数经双单侧t检验等统计分析,与片剂比无显著差异.F值为(103±4)%.结论格列吡嗪(2.95±0.6)h血药浓度达高峰,峰浓度为(456±60 )ng/ml.且胶囊与片剂为生物等效制剂. 相似文献
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目的:克隆骨形态发生蛋白BMP7基因并检测其在体外培养的兔关节软骨细胞中的表达。方法:从体外培养的幼兔膝关节软骨细胞中提取总RNA;按GenBank BMP7基因序列化学合成2条引物,采用RT-PCR方法得到BMP7基因;将BMP7基因片段插入到真核表达载体pcDNA 3.1中,构建pcDNA3.1-BMP7真核表达载体质粒;利用双酶切、PCR及核苷酸序列分析鉴定BMP7目的基因;将重组pcDNA3.1-BMP7真核表达载体质粒转染家兔关节软骨细胞,分别采用原位杂交、PCR、Western blotting法测定BMP-7表达。结果:克隆得到的BMP7基因核苷酸序列长约1 300 bp,构建的重组pcDNA 3.1-BMP7真核表达载体质粒目的基因BMP-7序列与GenBank报道的BMP-7基因(No. BC008584)一致,转染了BMP7基因的体外培养的成年家兔膝关节软骨细胞表达了BMP7蛋白。结论:成功构建表达BMP7蛋白的转基因关节软骨细胞,其可用于细胞移植治疗或作为种子细胞构建组织工程软骨修复关节软骨缺损。 相似文献