诱导多能干细胞建系及体外造血祖细胞定向分化体系的建立

背景：目前,大量文献报道了诱导多能性干细胞系的建立,但大规模体外诱导分化造血祖细胞的研究还缺乏深入的探讨。 目的：建立诱导多能性干细胞体外定向诱导形成造血祖细胞的方法。 方法：采用慢病毒感染的方法将含有Oct4、Sox2、Nanog和Lin28全能性基因的慢病毒颗粒转导人皮肤成纤维细胞,获得了诱导多能性干细胞;在诱导分化体系中添加了 Y-27632,克服干细胞扩增中的凋亡现象;运用OP9细胞产生的条件培养液建立诱导多能性干细胞体外定向分化形成造血祖细胞的分化体系。 结果与结论：①前3代细胞克隆传代时,诱导多能性干细胞发生凋亡的现象很多,很难大规模扩增培养。培养基中添加阻断 ROCK活化的抑制剂,能够明显抑制胚胎干细胞的凋亡。②诱导多能性干细胞在 OP9细胞条件培养液作用下,经过体外诱导分化,形成CD34＋造血祖细胞。     

经皮椎体强化术中骨水泥渗漏与否对患者凝血功能变化的影响

目的 利用前瞻性研究探讨骨质疏松性椎体压缩骨折（OVCF）患者行经皮椎体强化术时是否发生骨水泥渗漏对凝血功能变化的影响.方法 本研究选取2009年10月至2010年4月在我科确诊为OVCF并行椎体强化术的45例患者（59个椎体）进行前瞻性研究.测定其注入骨水泥前后不同时间点凝血四项和纤溶组合的值,术中透视及术后行X线和（或）CT检查,将患者分为骨水泥渗漏组与非骨水泥渗漏组,分析两组患者骨水泥注入后凝血功能变化的异同.结果 在所有时间点,渗漏组及非渗漏组患者的APTF、PT、PT-INR、FIB数值、3P值均在参考值范围内,各时间点的数值间无统计学差异（P＞0.05）,两组间亦无统计学差异（P＞0.05）.在注入骨水泥后,两组的D-Dmier值均有逐渐升高的趋势,其中渗漏组在骨水泥注入后不同时间点的D-Dmier值均要比注入前的D-Dmier值显著增高（P＜0.05）,与非渗漏组同一时间点的D-Dmier值相比也有统计学差异（P＜0.05）,在非渗漏组中,骨水泥注入后3 min的D-Dmier值与注入前无统计学差异（P＞0.05）,但在骨水泥注入后1h及3h均显著增高（P＜0.05）.结论 椎体强化术注入骨水泥可引起D-Dmier值升高,骨水泥渗漏可能会加速D-Dmier的升高,并可能加大其升高的幅度,骨水泥渗漏可能会影响患者的凝血功能.     

血浆中非蛋白结合疏基化合物光度法测定研究

用锌粉－－盐酸羟胺将胱氨酸和高胱氨酸还原为半胱氨酸和 胱氨酸，然后在磷酸缓冲介质中与５，５’－二硫双（２－硝基苯甲酸）简称（ＤＴＮＢ）反应，生成黄色化合物，在其最大吸收波长４１０ｎｍ处测瓣的吸光度从而对巯基估合物总浓度进行定量测定。该方法的精密度、稳定性好，准确度和灵敏度高，用于血浆中非蛋白结合巯基化合物总浓度的测定，也获得了满意的结果。     

糖尿病舌下络脉诊与糖尿病肾病相关性的实验研究

目的 探讨糖尿病舌下络脉诊与糖尿病肾病的相关性,为临床早期诊断糖尿病肾病提供辅助手段.方法随机将82只成年SD大鼠分为正常组、模型Ⅰ组、模型Ⅱ组和模型Ⅲ组.模型组采用STZ造模法.分别进行各组大鼠的舌组织病理切片及肾组织超微结构观察.结果 模型组大鼠舌下络脉和肾组织均出现不同程度的病理损害.结论舌下络脉与肾脏病理改变具有相关性,肾脏病理损害的存在,通常伴有舌下络脉瘀阻.观察舌下络脉的变化可以反应糖尿病肾脏的病变,舌下络脉诊可以为早期诊断糖尿病肾病提供辅助手段.     

骨组织恶性肿瘤与癌基因mdm2、c-myc和抗癌基因p53关系的研究

作者采用分子分杂交技术分析了１８例骨组织恶性肿瘤及瘤旁组织中癌基因ｍｄｍ２、ｃｍｙｃ和抗癌基因ｐ５３的变化，使用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术分析了ｐ５３基因第７外显子点突变，结果显示，骨组织恶性肿瘤中ｍｄｍ２、ｃｍｙｃ癌基因有扩增与过表达，抗癌基因ｐ５３有突变、重排、缺失。在１０例骨肉瘤标本中发现ｍｄｍ２扩增仅存在于转移的病例中。这些结果表明：癌基因ｍｄｍ２、ｃｍｙｃ与抗癌基因ｐ５３参与骨组织恶性肿瘤的发生和发展，其中ｍｄｍ２扩增与骨肉瘤转移密切相关。     

精索内静脉旋髂浅、腹壁浅、旋股外静脉分流术治疗精索静脉曲张

近年来许多学者注意到精索静脉曲张与男性不育症有密切关系。本院于1983年9月至1985年12月先后为15例重度精索静脉曲张症患者行精索内静脉高位结扎,同时分别与旋髂浅、腹壁浅、旋股外静脉作分流术获得临床满意疗效。现报告如下: 临床资料本组15例,年龄18—36岁,平均21岁。已婚11例。病程3月至5年,其中7例因患男性不育症来门诊检查时发现。15例均属重度精索静脉曲张症。7例合并男性不育症中,除1例伴有慢性前列腺炎及不同程度性功能紊乱外,余6例术前性生活均正常。精液检查4例无精子,另3例精子计数分别为     

氧化型极低密度脂蛋白诱导小鼠腹腔巨噬细胞凋亡

探讨氧化型极低密度脂蛋白诱导小鼠腹腔巨噬细胞凋亡的作用。应用低温超速离心法分离健康人血浆极低密度脂蛋白，用CuCl2氧化得到氧化型极低密度脂蛋白。琼脂糖凝胶电泳观察巨噬细胞凋亡DNA断裂“梯状”图谱；流式细胞仪和二苯胺法分别测定凋亡巨噬细胞百分率和：DNA片断百分率；光镜观察凋亡巨噬细胞形态变化。结果发现：①氧化型极低密度脂蛋白能诱导巨噬细胞发生凋亡及DNA断裂；②抗氧化剂二甲基硫脲能部分抑制氧化型极低密度脂蛋白诱导的：DNA断裂；③核转录因子核因子kB抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐可完全抑制氧化型极低密度脂蛋白诱导的DNA断裂。提示氧化型极低密度脂蛋白诱导巨噬细胞凋亡可能是动脉粥样硬化形成机制之一；氧化型极低密度脂蛋白诱导巨噬细胞凋亡的作用可能与自由基和激活核因子kB有关。     

热盐水所致大鼠萎缩性胃炎胃黏膜组织细胞p53和ras表达的实验研究

慢性萎缩性胃炎属于癌前状态 ,它是胃癌发生的重要环节。我们以人类饮食中不可缺少的两大因素———食物的热度与咸度 ,创建了快速建立慢性萎缩性胃炎动物模型的方法 ,并从分子水平探索从正常胃黏膜到萎缩性胃炎到胃癌的演变过程。一、材料与方法1.实验动物和主要试剂 :10 0只 7周龄的雄性SD大鼠 ,体重 2 0 0～ 2 5 0g ,由第四军医大学实验动物中心提供。SABC即用型试剂盒 ,p5 3和ras一抗 ,生物素化的二抗均购自武汉博士德公司。余化学试剂均购自第四军医大学。2 .大鼠萎缩性胃炎模型的制作 :采用 5 5℃、15 %的盐水连续灌胃 12周 ,制成…     

高血压病人动脉顺应性与家庭偶测血压及动态血压关系

目的　探讨原发性高血压病人家庭测量血压、动态血压与动脉顺应性的关系。方法　共入选 164例受试者 ,其中原发性高血压组 74例 [男 42例 ,女 3 2例 ,平均年龄 ( 4 7 0 5± 10 0 8)岁 ] ;对照组 90例 [男 41例 ,女 49例 ,平均年龄 ( 3 3 81±12 3 5 )岁 ]。对入选者间隔 1～ 3周进行二次家访 ,每次家访由经过专门训练的护士采用汞柱血压计连续测量受试者坐位、左上臂血压 5次 ,每人的家庭测量血压是二次家访、共 10个血压读数的平均值。同时采用SpaceLabs 90 2 0 7动态血压监测仪记录 2 4小时动态血压 ,有效数据应达到 80 %以上。动脉顺应性检查采用动脉脉搏波分析 (PWA)仪。反映大动脉硬化的参数为反射波增强指数 (AIx)。结果　高血压组家庭测量血压及 2 4小时平均收缩压、舒张压、白昼及夜间血压显著高于对照组。与对照组相比 ,高血压组AIx显著升高 ( 2 4 4%± 12 8%vs 12 7%± 18 3 % ,P =0 0 0 0 ) ,经年龄、性别调整后 ,二组间仍有显著性差异 ,提示高血压患者动脉顺应性下降、动脉硬化。将AIx作为因变量 ,年龄、身高、家庭测量血压及动态血压中 2 4小时平均血压、白昼血压、夜间血压、血糖、血酯等作为自变量进行多元回归分析 ,AIx与年龄、家庭血压中的收缩压呈显著的正相关 ,与身高呈负相关     

甘肃省党参种植生产现状的调查分析

目的:为甘肃省大宗药材合理种植、生产提供依据。方法:通过对甘肃省党参的种质资源现状、田间管理、采收加工、养护贮藏和市场销售等生产现状进行实地考察和农户走访,对调查信息进行整理和分析。结果与结论:调查结果表明,党参资源存在种质、品质参差不齐,种子、种苗的前期投入成本逐年攀高,田间管理措施少,养护贮存措施粗放,党参市场价格波动大,种植面积盲目扩大等问题。建议做好党参适宜性生产区划,规范党参种质来源和质量,进一步对农户进行规范化栽培的田间管理、采收、加工和运输的培训和监督;充分利用已建成的国家中药资源野外动态监测站对党参进行及时的动态监测分析,对党参的种植和生产做出市场预判和决策依据;积极探索新型发展模式,形成规范化的党参种植生产链条。