贵阳市妇幼保健院120例住院患者抗菌药物使用情况调查

目的:了解我院抗菌药物的使用情况,为抗菌药物的合理使用和科学管理提供依据.方法:从不同科室随机抽取出院患者病历120份进行综合分析.结果:我院120例住院患者使用抗菌药物以青霉素类、头孢菌素类和喹诺酮类为主,大多数抗菌药物用药剂量相对合理,抗茵药物应用率较高(83.33％),联合用药普遍,抗菌药物治疗病例微生物标本送检率合格(58.82％),围术期抗菌药物使用率为100％,对预防性使用抗菌药物的依赖性过大.结论:我院住院患者抗菌药物使用仍存在一些不合理现象,对存在的问题应制定相应的措施.     

根除幽门螺杆菌治疗慢性胃炎的疗效观察

目的探讨幽门螺杆菌(Hp)根除治疗在慢性胃炎治疗过程中的临床疗效。方法经胃镜、组织病理学检查和幽门螺杆菌检测确诊为幽门螺杆菌相关性胃炎患者99例分为研究组49例和观察组50例,并以同期53例非幽门螺杆菌相关性胃炎患者作为阴性对照组。研究组给予正规的根除幽门螺杆菌三联治疗,其他各组的基本治疗相同。分析每个组治疗前和治疗后4周、1年～1年6个月随访结束时的症状体征、胃镜检查和组织病理学检查结果。结果治疗结束后4周研究组的炎症严重程度和活动度都比观察组的轻(P<0.05)。研究组的炎症严重程度比治疗前明显好转(P<0.05),观察组则无显著性差异(P>0.05)。研究组的复发率比观察组和阴性对照组的都低(P<0.05)。结论对幽门螺杆菌相关性胃炎患者进行正规的根除幽门螺杆菌治疗可以提高慢性胃炎的临床治疗效果,具有非常重要的临床意义。     

控温毯用于中枢性高热患者物理降温

目的 探讨控温毯用于中枢性高热患者的降温效果.方法 将100例中枢性高热患者随机分为观察组与对照组各50例,观察组采用控温毯降温,对照组采用传统的橡胶冰袋行物理降温.结果 观察组持续降温不同时间点的直肠温度下降幅度显著高于对照组(P＜0.05).结论 控温毯用于中枢性高热降温效果显著,较传统物理降温持续时间长,且患者体温能按设定的温度值平稳下降.     

龙试验——大型临床随机对照研究的设计、实施和质量监控

经拜耳医药保健公司完成的一项临床RCT研究--龙试验,旨在评价第四代氟喹诺酮类抗菌药物莫西沙星单药治疗复杂腹腔感染的有效性及安全性.结果显示"莫西沙星单药治疗复杂腹腔感染临床和细菌学疗效不劣于头孢曲松+甲硝唑的联合治疗方案"得到中国食品药品监督管理局(SFDA)的认可.现将一些体会和经验总结如下.     

兔抗人APE1多克隆抗体的制备及鉴定

目的:制备兔抗人脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶多克隆抗体并进行鉴定.方法:以纯化的全长APE1蛋白为抗原, 采用改良的快速免疫法制备兔抗人APE1多克隆抗体并进行特异性亲和纯化, ELISA、Western blot和免疫组化检测制备抗体的效价和特异性.结果:ELISA检测显示该抗体的效价达到1:128 000, 相对亲和力常数为8.96×10-6 mol/L.Western blot显示该抗体能与APE1蛋白特异性结合, 免疫组化检测显示阳性反应产物主要定位于细胞核.此外, 该抗体还可用于小鼠和大鼠组织APE1蛋白的检测.结论:制备的多克隆抗体特异性和效价良好, 不仅为今后深入研究人APE1蛋白的性质与功能提供了有用的实验工具, 还可用于检测小鼠和大鼠组织中APE1蛋白的表达.     

流式细胞仪分选非染色S期CHO细胞有助于提高聚乙烯亚胺的转染效率

目的利用流式细胞仪(flow cytometry,FCM)分选获得非染色、同步化的中国仓鼠卵巢(Chinese hamsterovary,CHO)细胞,观察聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)在不同周期CHO细胞的瞬时转染和稳定转染效率。方法悬浮培养CHODG44细胞,应用流式细胞仪的光学参数-前向角和侧向角,在细胞主群中设置12个门,然后进行分选。分选出的各门内细胞经碘化丙啶(PI)染色进行细胞周期检测。以PEI为载体分别向含G0/G1、S、G2/M比例较高的细胞亚群和未经分选的细胞转染含绿荧光蛋白(Green Fluorescence Protein,GFP)质粒,利用流式细胞仪检测瞬时转染、稳定转染效率。结果细胞DNA含量与侧向角相关,各细胞亚群G0/G1期细胞所占比例总体上随着侧向角的增大而减小,G2/M细胞所占比例随着侧向角的增大而增多。低侧向角的细胞亚群P2内G0/G1期细胞比例可达80.49%,中侧向角的细胞亚群P7内S期细胞比例可达61.14%,高侧向角的细胞亚群P13内G2/M期细胞比例可达49.88%。转染48h,GFP阳性细胞在G2/M期细胞比例较高的细胞亚群所占比例最高,但瞬时转染效率,S期细胞比例较高的细胞群大于G2/M期细胞比例较高的细胞群。转染2w,稳定转染效率仍为S期细胞比例较高的细胞亚群大于其它细胞亚群及未分选的混合细胞群。结论应用流式细胞仪的光学参数可以有效分选非诱导、无染色分别含有较高比例各周期时相的CHO细胞;PEI的转染效率与转染时细胞所处的细胞周期时相相关,且S期细胞亚群的瞬时和稳定转染效率均高于其它细胞周期亚群。     

去分化表皮干细胞的来源鉴定和分析

目的：利用染色体特异性分析方法鉴定去分化表皮干细胞的来源。方法：包皮皮片去除皮下脂肪后,中性蛋白酶消化过夜,分离表皮和真皮。分离的表皮片用Ⅳ型胶原反复粘贴并冲洗去除表皮干细胞。处理后的表皮片经免疫组化鉴定无表皮干细胞后移植到雌性BALB／c裸鼠背部全层皮肤缺损创面,5d后用免疫组化法检测皮片内角蛋白10（CK10）、CK19和β1整合素的表达,然后用Ⅳ型胶原粘贴法分离皮片内去分化来源的表皮干细胞,并采用PCR的方法检测去分化细胞内的Y染色体。结果：未经处理的表皮片基底部细胞呈CK10染色阴性,CK19和β1整合素染色阳性;Ⅳ型胶原处理后的表皮片内细胞全呈CK10染色阳性。而去基底皮片移植后5d,在皮片的基底侧重新出现CK10染色阴性、CK19和β1整合素染色阳性的细胞。Ⅳ型胶原粘贴分离去分化来源的表皮干细胞,结果表明,移植皮片组在10min内约有4．56％的贴壁细胞出现,而未移植皮片组3h内无贴壁细胞出现。PCR分析结果显示在上述贴壁细胞内能检测到Y染色体的特异序列,而宿主来源的组织检测不到。结论：去分化表皮干细胞来源于移植皮片内成熟表皮细胞的去分化,而非宿主体内的干细胞。     

坐标定位划痕法在研究“细胞创面”愈合率中的应用

目的：改良传统“细胞创面”模型的制备方法,提高对“细胞创面”愈合率的统计的精确性。方法：在6孔板每一孔外底面用刀尖划上横纵坐标轴,用绿色记号笔在横轴的上、下方平行于横轴各画5条等距离的绿带。接种目的细胞,待其长满内表面时用1000μl微量移液器的吸头在纵轴的左、右平行于纵轴各划2条等距离的细胞缺损带。在观察时间点观察绿带与细胞缺损带重叠形成的“矩形区域”的宽度或面积,计算愈合率。结果：可以特定追踪观察每个“矩形区域”内“细胞创面”愈合率情况,且“矩形区域”的例数可以符合统计学要求。结论：坐标划痕法是一种较精确统计“细胞创面”愈合率可行的方法。     

拓扑替康联合白介素-2治疗恶性浆膜腔积液的近期疗效观察

目的观察拓扑替康联合白介素-2治疗恶性浆膜腔积液近期疗效及耐受性。方法经病理组织学及细胞学检查证实的32例恶性浆膜腔积液病例,均采用经皮中心静脉导管浆膜腔内置入引流,引流干净后腔内灌注拓扑替康及白介素-2。结果浆膜腔积液控制率约84.4%,毒副作用轻。结论拓扑替康联合白介素-2治疗恶性浆膜腔积液近期疗效好,毒副作用轻,耐受性好。     

四项生化指标检查对肾功能损伤的应用评价

目的：探讨四项生化指标[尿素（UN）、尿酸（UA）、肌酐（Cr）、胱抑素C（CC）]在肾功能损伤中的应用价值。方法：对100例疑有肾脏损害的住院患者以及100例健康体检者分别测定血清UN、UA、Cr、CC。结果：UN、UA、Cr、CC的异常率分别为45％、29．5％、13％、73．5％,其中CC的异常率显著高于其它三者（P〈0．01）;UN、UA、Cr、CC的特异性分别为58．33％、69．79％、96．88％、53．13％,灵敏度分别为48．08％、28．85％、22．12％、97．12％,其中Cr的特异性显著高于其它三者（P〈0．01）,CC的检测灵敏度显著高于其它三者（P〈0．01）。结论：胱抑素C是一个对肾功能损害敏感且诊断价值较大的指标,但其特异性较低,可与特异性较高的肌酐联合检测以提高检测的灵敏度和特异性。