TTV部分基因的克隆及序列测定

为了弄清萍乡地区ＴＴ病毒 (ＴＴＶ)感染情况 ,分析本地区ＴＴＶ株基因结构特点 ,我们对江西省萍乡地区 8例ＴＴ病毒株进行了部分基因的克隆及序列测定。1　材料和方法1 1　材料　血清标本采用本地区流行病学调查和本院的临床阳性标本。Ｔ载体、ＸＬ1 Ｂｌｕｅ菌为美国Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公司产品。Ｔａｑ酶、ｄＮＴＰｓ及Ｔ4ＤＮＡ连接酶购自华美公司。ＰＣＲ试剂由中国军事医学科学院提供。1 2　引物合成　根据Ｏｋａｍｏｔｏ等报道的ＴＴＶ基因序列 ,采用Ｇｏｌｄｋｅｙ软件在ＴＴＶＯＲＦ保守区设计两对套式引物 ,引物序列如下 :外…     

韧带样型纤维瘤病的临床病理分析

目的：探讨韧带样型纤维瘤病（desmoid-type fibromatosis,DTF）的临床病理特征,提高对DTF的认识和诊断水平。方法：分析14例DTF的临床特征,HE及免疫组化观察其病理学特征。结果：14例DTF均为女性,年龄22~81岁,中位数31.5岁,12例发生于腹部,右侧胸壁2例。光镜下以纤细的梭形细胞与胶原纤维交错排列为特征,细胞无异型性,核分裂像罕见;免疫组化Vimentin和β-catenin阳性,部分表达SMA,不表达S-100、CD34、CD117、Dog-1。手术切除随访4~113个月,1例复发。结论：DTF好发于年轻女性,需要与多种良、恶性梭形细胞肿瘤鉴别,细胞核表达β-catenin对DTF诊断和鉴别诊断有重要价值,手术切除是主要治疗手段,切缘残瘤有较高的复发风险。     

消化道平滑肌瘤中存在Cajal间质细胞：警惕误诊为胃肠道间质瘤北大核心CSCD

目的探讨消化道平滑肌瘤的临床病理特征,以及Cajal间质细胞（interstitial cells of Cajal,ICC）在消化道平滑肌瘤中的分布特点。方法收集郑州大学第二附属医院2012年6月至2017年6月147例消化道平滑肌瘤临床及病理资料,光镜下观察HE切片,免疫组织化学及奥辛蓝．沙红染色,Sanger测序检测C—KIT和PDGFRA基因突变状态。结果患者年龄13～82岁,平均年龄52岁。男女比例接近1：2。发生于食管100例,胃20例,小肠12例,结直肠15例。组织学上卵圆形或梭形肿瘤细胞呈条束状或编织状排列。肿瘤细胞弥漫阳性表达平滑肌肌动蛋白、结蛋白及h-caldesmon,CD117与DOG1阳性且奥辛蓝-沙红染色阴性的分支状细胞散在分布于肿瘤内,该类细胞见于100％（100／100）食管平滑肌瘤、80％（16／20）胃平滑肌瘤、3／12的小肠平滑肌瘤,所占比例1％～30％不等,而不存在于结直肠平滑肌瘤中。16例CD117与DOG1阳性且奥辛蓝-沙红染色阴性细胞比例≥20％的平滑肌瘤均未检测到C—KIT及PDGFRA基因突变。结论ICC普遍存在于食管、胃及小肠平滑肌瘤中,不能因为肿瘤细胞表达CD117与DOG1而误诊为胃肠道间质瘤,必要时可借助分子检测进行鉴别。     

套细胞淋巴瘤349例临床病理学特点及预后北大核心CSCD

目的探讨套细胞淋巴瘤（MCL）的临床病理学特点及预后影响因素。方法回顾性分析2004年1月至2016年1月北京友谊医院诊断的349例MCL患者的临床资料,光镜观察肿瘤形态,采用MaxVision^TM－2染色法检测免疫表型,荧光原位杂交技术（FISH）检测IgH/CCND1融合基因,并进行相关统计分析。结果349例MCL患者中,男女比例为2.7∶1.0,中位年龄61岁（范围25～83岁）,其中51～70岁者243例（69.6%）。有B症状者占22.4%（70/313）。大部分患者表现为全身浅表淋巴结肿大,临床分期Ⅲ～Ⅳ期占76.1%（235/309）。结外侵犯者占47.9%（148/309）,其中最多见的是胃肠,占31.8%（47/148）。脾脏受累占15.4%（47/305）。309例（85.5%）经典型和40例（11.5%）侵袭性变异型均由增生的淋巴样细胞构成。所有病例肿瘤细胞表达CD20和cyclin D1,98.6%（344/349）的病例弱阳性或阳性表达CD5。12例CD5阴性/弱阳性或cyclin D1部分细胞阳性的病例FISH检测结果均阳性。243例（69.6%）获得随访,随访中位时间26个月（3～108个月）,患者3年和5年总生存率分别为63.0%和34.8%。单因素分析结果显示年龄〉60岁、脾脏受累、侵袭性变异型、非全网型（依据滤泡树突细胞网与肿瘤细胞的吻合程度≥90%和〈90%将其分为全网型和非全网型）及Ki－67阳性指数〉40%的患者预后差（P〈0.05）。剔除侵袭性变异型后多因素Cox回归模型分析,结果显示年龄、脾脏受累、滤泡树突细胞网与肿瘤细胞吻合度及Ki－67阳性指数是影响MCL患者总生存率的独立预后因素（P〈0.05）。结论MCL以中老年男性多见,患者年龄、脾脏受累、滤泡树突细胞网与肿瘤细胞吻合度及Ki－67阳性指数是MCL预后风险评估的独立预测因子。     

抵抗素在肝脏胰岛素抵抗中的作用及其机制

目的： 探讨抵抗素在肝脏胰岛素抵抗中的作用及其可能的机制。方法： 将载有抵抗素基因的重组腺病毒经尾静脉注射构建高抵抗素血症小鼠模型,同时设正常对照组及病毒对照组,取肝脏组织切片行PAS糖原染色半定量观察肝糖代谢的变化;以Western blotting检测肝腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）的磷酸化,以磷酸化AMPK/总AMPK的比值代表AMPK激活程度;以实时 PCR检测肝组织糖异生关键酶葡萄糖6磷酸酶（G6Pase）和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK）mRNA表达水平的变化。结果： 重组腺病毒注射第5 d,获得血中抵抗素高表达构建了高抵抗素血症动物模型,糖原染色示高抵抗素血症小鼠肝糖原含量较正常对照及病毒对照组降低,分别为0.78±0.06 vs 0.93±0.13、0.89±0.05（P<0.05）;高抵抗素血症组肝AMPK磷酸化水平较正常对照及病毒对照组下降, 磷酸化AMPK/总AMPK比值分别为0.78±0.06 vs 0.93±0.13、 0.89±0.05（P<0.05）。高抵抗素血症小鼠G6Pase和PEPCK 的mRNA表达升高,高抵抗素血症组、对照组及空载病毒组G6Pase分别为2.136±0.857 vs 1.353±0.490、 1.250±0.770 （P<0.05）;高抵抗素血症组、对照组及空载病毒组 PEPCK分别为3.54±0.90 vs 2.75±0.78、 2.63±0.67（P<0.05）。结论： 抵抗素可能通过抑制肝脏AMPK活性,增加肝糖异生关键酶的表达而影响机体肝糖代谢,降低肝糖储量,参与肝脏胰岛素抵抗的形成。     

依普利酮对阿霉素诱导心衰大鼠TNF-α的影响

目的：探讨依普利酮对阿霉素诱导心衰大鼠血清TNF-α的影响及其治疗心衰的可能机制。方法：50只雄性SD大鼠随机挑选40只腹腔注射阿霉素制做心衰模型,其余10只作为正常对照组。6周后将存活的20只模型鼠随机分为2组：心力衰竭＋依普利酮治疗组（n=10）,给予依普利酮200mg/（kg.d）灌胃,心力衰竭组（n=10）与正常对照组大鼠（n=10）给与安慰剂（生理盐水）灌胃,12周后观测一般变化,测定大鼠心功能及血清TNF-α含量。结果：心衰组血流动力学指标与正常组相比有显著性差异（P〈0.05）。治疗组血流动力学指标与心衰组相比有显著性差异（P〈0.05）。心衰组TNF-α水平与正常组相比明显升高（P〈0.05）。治疗组TNF-α水平与心衰组相比明显下降,有显著性差异（P〈0.05）。结论：依普利酮可以降低心衰大鼠血清TNF-α的含量。     

基于先验模板的表面肌电信号渐进分解算法研究

本研究通过将表面肌电信号（sEMG）分解为运动单元动作电位序列（MUAPTs）,来研究神经 肌肉系统中运动单元（MU）的募集与发放模式。针对高收缩力情况下MUAP叠加问题,首先采用FastICA算法和小波包去噪算法对信号进行预处理;然后基于先验知识构建了4种形态的可伸缩MUAP模板;最后,采用“先大后小”的渐进识别方式,逐个对MUAP进行自动提取。在此基础上,还将该算法应用于8名受试者（3组/人）不同手指活动模式下的指浅屈肌多通道（12通道）sEMG分解;单通道分解结果显示,高力量水平下sEMG中的主体MUAPTs能够被有效检测和分类;统计结果证实,随着力量水平的增加,MUAP的数目增加;不同大小MUAP比重的变化与活动手指和力量水平具有显著的相关性。本文的实验结果,初步验证了利用先验模板从sEMG中渐进提取MUAP的可行性,为sEMG分解和进一步研究MU发放规律提供于一种新的思路。     

献血员直接抗球蛋白试验及不规则抗体阳性引起交叉配血不合的分析

目的探讨献血员直接抗球蛋白试验(DAT)及不规则抗体阳性对交叉配血试验的影响。方法对排除受血者原因以外9例交叉配血不合的献血员血标本,采用微柱凝胶抗人球蛋白法进行DAT和不规则抗体筛选,对DAT及抗体筛选阳性的血标本再采用单特异性抗人球蛋白试剂和谱细胞进行免疫球蛋白分型及不规则抗体特异性鉴定。结果在9例交叉配血不合的献血员血标本中检出DAT阳性4例,其中多特异性抗体和IgG同时阳性3例,多特异性抗体和C3d同时阳性1例;不规则抗体阳性5例,其中抗E抗体3例,抗M抗体2例。结论献血员DAT及不规则抗体阳性可引起交叉配血不合或输血不良反应,对其进行检测既可方便再次输血前交叉配血试验又能减少输血不良反应的发生率。