水通道蛋白AQP4基因缺失加重NMDA诱导的小鼠脑损伤

目的:评价水通道蛋白AQP4在兴奋性氨基酸NMDA诱导脑损伤中起的作用。方法:在AQP4基因敲除小鼠,皮层注射NMDA 150 nmol诱导损伤。甲苯胺蓝染色评价损伤面积,Fluro-Jade B染色评价变性神经元,免疫组化法评价血脑屏障通透性增高。结果:与野生型小鼠比较,AQP4基因缺失加重NMDA诱导的皮层损伤,增加损伤区变性神经元密度,加重血脑屏障通透性的增高。结论:AQP4在NMDA诱导的脑损伤中可能起保护作用。     

鱼藤酮诱导BV2小胶质细胞半胱氨酰白三烯受体1表达变化

目的:制备和鉴定半胱氨酰白三烯受体1(CysLT1受体)抗体,以此观察鱼藤酮诱导BV2小胶质细胞损伤过程中CysLT1受体表达变化。方法:以KLH偶联的CysLT1受体多肽(小鼠)免疫家兔制备多克隆抗体,用ELISA法测定抗体效价,以抗原阻断法测定抗体敏感性及特异性。用新制备的抗体以Western blotting检测鱼藤酮(0.01～1μmol/L,作用24 h)损伤BV2细胞过程中,BV2细胞上CysLT1受体的表达变化,并以RT-PCR检测验证CysLT1受体mRNA表达水平,同时以免疫组化观察CysLT1受体的亚细胞分布变化。结果:ELISA测定显示,制备的兔抗小鼠CysLT1受体抗体的效价大于1/32728,对CysLT1受体的特异性强,对CysLT2受体和GPR17基本无交叉反应。Western blotting和RT-PCR显示,鱼藤酮作用BV2细胞24 h剂量依赖性诱导CysLT1受体mRNA及蛋白水平表达升高;免疫组化显示在鱼藤酮诱导BV2细胞损伤过程中,随鱼藤酮剂量增加,CysLT1受体发生核移位。结论:制备的CysLT1受体多克隆抗体具有高效价和高特异性,能满足Western blott...     

内皮细胞培养及其在中药药理研究中的应用

内皮细胞的体外培养是研究内皮细胞生物学与多种疾病关系及阐明相关药物作用机制的重要方法。内皮细胞功能异常与动脉粥样硬化、高血压、类风湿性关节炎、银屑病、肿瘤等众多疾病的发生发展有关。一些中药及提取物能保护内皮细胞损伤，或能抑制内皮细胞增殖和迁移，可有效阻止上述疾病的发生、发展，从而起到治疗作用。现就近年来内皮细胞培养方法及用于中药药理研究作一综述。     

参麦有效部位对血管内皮细胞增殖和迁移的影响

目的：探讨参麦中提取的总皂苷、总多糖对血管内皮细胞增殖和迁移的影响.方法：用MTT法检测不同浓度的总皂苷、总多糖及总皂苷＋总多糖对ECV-304、胃癌SGC-7901细胞增殖及SGC-7901条件培养液诱导ECV-304增殖的影响;用琼脂糖刮除法检测它们对血管内皮细胞迁移的影响.结果：当参麦总多糖浓度为0.18～2.44mg/mL时,对ECV-304、胃癌SGC-7901增殖及SGC-7901诱导ECV-304增殖均无影响;当参麦总皂苷浓度为0.05～0.8mg/mL时,对胃癌SGC-7901增殖无影响,而对ECV-304及SGC-7901条件培养液诱导ECV-304增殖有抑制作用,抑制率为13.16%～62.77%.参麦总多糖对ECV-304迁移没有影响,参麦总皂苷对ECV-304迁移有明显抑制作用,抑制率为42%～80%.总皂苷＋总多糖抑制ECV-304增殖和迁移作用与参麦总皂苷相比差异无显著性.结论：参麦中提取的总皂苷对血管内皮细胞和胃癌细胞条件培养液诱导的血管内皮细胞增殖具有抑制作用,并能抑制血管内皮细胞的迁移,是参麦抗血管生成的有效部位.     

不同治法对老年性痴呆大鼠脑组织海马CA1区椎体细胞的影响

目的:比较补肾填精方、涤痰祛瘀方、补肾涤痰祛瘀方对老年性痴呆大鼠的学习记忆能力及其脑组织海马CA1区椎体细胞的影响,探讨中药治疗老年性痴呆的机理并寻找最佳治疗方案.方法:应用凝聚态Aβ1-42老年大鼠海马内注射建立老年性痴呆大鼠模型.不同组方的3种药物组分别灌胃相应药物,跳台法测试各组大鼠的学习记忆能力,光镜观察海马CA1区椎体细胞的形态及数量的变化.结果:补肾填精方、涤痰祛瘀方、补肾涤痰祛瘀方均可明显改善老年性痴呆大鼠学习记忆能力.3方均有减轻老年性痴呆大鼠海马CA1区椎体细胞损伤的作用,以补肾涤痰祛瘀方最为明显.结论:补肾填精方、涤痰祛瘀方、补肾涤痰祛瘀方为治疗老年性痴呆大鼠的有效方,补肾涤痰祛瘀方的治疗作用较另两组好.其作用机理可能与减轻老年性痴呆大鼠海马CA1区椎体细胞的损伤有关.