耐辐射球菌pprI基因真核表达载体的构建及其抗辐射作用

目的 研究耐辐射球菌pprI原核基因的真核表达载体的构建及其转染对离体真核细胞急性放射损伤的防护作用。方法 应用DNA重组技术构建pEGFP-c1-pprI质粒;采用脂质体转染技术分别将空载体质粒pEGFP-c1和重组质粒pEGFP-c1-pprI转入人肺上皮细胞系Beas-2B细胞,筛选稳定转染细胞系;应用集落形成实验检测受照转染细胞的生存能力;流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率的变化;荧光显微镜观察受照细胞ROS荧光强度;免疫荧光实验观察受照细胞不同时间γ-H₂AX焦点数目。结果 成功地构建了pprI原核基因的真核表达载体,并在Beas-2B细胞中表达了PprI融合蛋白,建立了稳定转染细胞系。与空白对照组和空载体组相比,细胞克隆生存曲线显示转染了pprI基因的Beas-2B细胞经不同剂量辐射,其存活分数SF增加,该曲线参数D₀、D_q、N增高;转染了pprI基因的Beas-2B细胞受照后的ROS的荧光强度和不同时间（1、2、4 h）γ-H₂AX的焦点数均显著减低（F=16.73、19.47、6.94,P<0.05）;此外,该细胞G₂期阻滞（F=139.73、237.92,P<0.05）和凋亡率显著减低（F=626.02、2 052,P<0.05）。结论 耐辐射球菌pprI原核基因可在离体真核细胞中稳定表达,并且显著提高受照真核细胞的辐射抗性。     

siRNA干扰Chk1抑制人胃癌BGC823细胞增殖的实验研究

背景与目的：细胞周期检测点激酶1（checkpoint kinase1,Chk1）与肿瘤的关系及其在肿瘤发生、发展及治疗中的作用是目前研究的热点。为探索Chk1在人类肿瘤细胞中对生长增殖活性和细胞周期的调控作用,本研究旨在观察siRNA干扰Chk1基因对人胃癌BGC823细胞生长及周期的影响。方法：采用RNAi技术抑制BGC823细胞中Chk1表达,采用Western blot检测转染前后Chk1蛋白表达情况,实验分为未转染组、脂质体组和Chk1siRNA转染组三组。然后采用MTT法和流式细胞术分析Chk1基因沉默对人胃癌BGC823细胞生长及周期的影响。结果：Western blot检测结果显示,Chk1siRNA转染24h后,BGC823细胞中Chk1蛋白相对灰度值为0.11&#177;0.08,明显弱于未转染对照组的0.66&#177;0.21和脂质体转染组的0.70&#177;0.25（P〈0.05）,而未转染对照组和脂质体转染组之间比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。转染Chk1siRNA的BGC823细胞其Chk1蛋白表达量下降了83.1%。MTT法检测结果显示,Chk1蛋白表达缺失可导致BGC823细胞增殖活性下降,其增殖抑制率为48.1%（P〈0.05）。FCM法检测结果显示,Chk1基因沉默后细胞周期在G0/G1期发生停滞,未转染组24和48h后细胞在G0/G1期为48.3%和50.2%,转染Chk1siRNA组细胞在转染24和48h后G0/G1期增加至63.9%和66.1%,增殖指数（PI）由51.7%（24h）和49.8%（48h）减少至36.2%（24h）和34.4%（48h）。结论：Chk1siRNA转染可明显抑制人胃癌细胞增殖,且其抑制增殖作用与诱导G0/G1期阻滞有关。     

经导管封堵治疗动脉导管未闭伴重度肺动脉高压

目的评价经导管封堵术治疗动脉导管未闭伴重度肺动脉高压病人的临床疗效与安全性。方法选择在我院接受经导管封堵术治疗且肺动脉收缩压在80mmHg或以上,肺动脉平均压在60mmHg或以上的动脉导管未闭病人31例,回顾性分析病人术中及术后随访资料。结果31例病人术前肺动脉收缩压80～183（112±28）mmHg,肺动脉平均压63～130（82±22）mmHg。其中30例经导管封堵成功（成功率97％）,1例巨大型动脉导管未闭因无合适封堵器而行手术治疗。封堵后10min,26例肺动脉收缩压下降30mmHg以上,2例肺动脉收缩压下降20％以上,另2例肺动脉收缩压无明显改变。1例用房间隔缺损封堵器封堵巨大型动脉导管未闭,在术后3d复查心脏超声时发现封堵器脱人肺动脉而转入外科手术治疗;在5例双向分流者中,1例于术后2个月因重度肺部感染死亡,1例于封堵后血氧饱和度明显增加,但肺动脉压无明显下降,术后2年出现右心功能不全表现。结论动脉导管未闭伴重度肺动脉高压病人,若心脏超声检查示左向右分流,可用经导管封堵术进行根治;但若为双向分流时,经导管封堵治疗应慎重。     

脉冲染料激光在色素痣患者中的应用

目的：探讨改进脉冲染料激光治疗方法对色素痣的治疗效果。方法：对100例色素痣患者在治疗期间分为对照组和治疗组，对照组采用脉冲染料激光治疗至色素变色为发白为止，治疗组采用脉冲激光治疗至色素痣渗血为止。结果：与对照组比较，治疗组的色素痣疗程明显缩短，总有效率明显增高。结论：改进应用脉冲染料激光治疗色素痣的方法，从而提高色素痣患者的疗效及相应减少了治疗性开支。     

120例光子嫩肤治疗疗效观察

我科应用最新光子嫩肤设备，治疗120例由光损害导致的各种皮肤表现，取得了一定的效果。主观评价患在3次治疗后，毛细血管扩张明显减轻，但次数越多效果越明显。对于皮肤质地改善，许多患在进行过2—3次治疗后即感到皮肤弹性和细腻度改善，特别是面颊部改善明显，对于皱纹改善满意程度差异较大，光子嫩肤治疗的机理是靶组织选择性的光热作用，必须达到一定的次数才能有明显的效果。     

膜周部室间隔缺损介入治疗相关心律失常的发生与转归

目的 探讨室间隔缺损(VSD)介入治疗相关心律失常的发生与转归。 方法 以2002年10月～2019年5月在陆军军医大学第一附属医院住院并成功行VSD介入封堵术治疗的患者为研究对象,要求随访资料完整,分别统计患者术前及术后随访期间的心电图及动态心电图资料,随访方法为（1、3、6、12）个月各随访1次,以后每年随访1次。对VSD介入治疗相关性心律失常的发生及转归情况进行统计分析。 结果 共筛选在我院行介入治疗VSD患者1125例,最终纳入794例（男,424例）膜周部VSD患者。所有患者均完成1年以上随访,随访时间(12.45 ± 4.70)年。结果显示:①VSD介入封堵术前心电图显示13例有心律失常（1.64%）,包括频发房性早搏伴短阵房性心动过速3例、室性早搏4例、完全性右束支传导阻滞（CRBBB）6例。②VSD介入封堵术中及术后随访期间新发心律失常86例（10.83%）,其中CRBBB 17例（2.14%）、不完全性右束支传导阻滞(IRBBB)20例（2.52%）、完全性左束支传导阻滞(CLBBB)17例（2.14%）、一度房室传导阻滞（AVB）4例（0.5%）、三度AVB12例（1.51%）、室性心律失常10例（1.26%）、室上性心律失常6例（0.76%）。③VSD介入治疗术中及术后住院期间新发心律失常84例,经治疗出院时74例完全恢复正常（88.10%）;至术后1个月随访时92.90%的患者完全恢复正常。④术后远期随访期间发生CLBBB及三度AVB各1例,其中三度AVB患者植入了永久性心脏起搏器。 结论 ①膜周部VSD介入治疗相关性心律失常发生率较高,但经积极治疗绝大多数可完全恢复正常。②VSD介入治疗后远期仍可发生严重心律失常,需引起临床重视。     

原核pprI基因活体转染对BALB/c小鼠急性放射损伤保护作用的研究

目的 研究耐辐射奇球菌pprI基因活体转染对小鼠急性放射损伤的防护作用.方法 采用SPF级纯品系BALB/c雄性小鼠,应用活体电转染技术,将pEGFP-c1空载质粒及pEGFP-c1-pprI基因重组质粒转入小鼠股前肌肉.应用60Coγ射线进行全身照射,死亡率观察组吸收剂量为6 Gy,观察照后30 d内小鼠死亡率的变化;放射效应观察组吸收剂量为4 Gy,于照后1、7、14、28和35 d观察小鼠外周血象、胸腺、脾脏和骨髓细胞的凋亡率,并于照后第7和28天观察小鼠肺脏和睾丸组织的病理变化.结果 质粒注射剂量为50 μg/50μl,电场强度为200 V/cm时转染肌细胞的效率最高.pEGFP-c1-pprI基因重组质粒转染组小鼠急性辐射死亡率为30％,显著低于单纯照射组(60.0％)和空载体组(63.3％)(x2=4.90、6.24,P＜0.05).与单纯照射组、空载体组比较,pEGFP-c1-pprI基因重组质粒转染组小鼠的外周血白细胞计数在照后1、7、14和28 d显著增高(F=16.26、8.10、6.37、10.74,P＜0.05),血小板计数在照后第7和14天显著增高(F=7.36、5.71,P＜0.05),淋巴细胞百分率在照后7d显著增高(F=18.43,P＜0.05);胸腺和骨髓细胞凋亡率均在照后第1、7、14、28和35天显著降低(F=3.88、14.91、14.14、39.86、5.65,P＜0.05;F=53.70、11.75、21.78、41.40、4.54,P＜0.05);脾脏细胞凋亡率在照后第1、7、14和28天显著降低(F=97.95、56.61、33.55、14.71,P＜0.05).pEGFP-c1-pprI基因重组质粒转染组小鼠肺脏和睾丸的放射病理损伤较轻并且恢复较快.结论 耐辐射奇球菌pprI基因活体电转染对BALB/c小鼠急性放射损伤具有显著的保护作用,为进一步临床应用奠定了实验基础.     

基于证素辨证理论探讨骨转移癌痛的中医辨证分型

骨转移癌痛是由恶性肿瘤转移到骨引起的顽固性疼痛,目前本病中医缺乏统一的、客观的、规范的辨证分型,临床上分型繁杂多样,治疗也具有很大的差异。证素辨证理论为朱文锋教授在传统辨证论治的基础上所创立,具有客观、准确、规范等多种优势,本文通过运用证素辨证理论对骨转移癌痛的中医辨证分型进行初步的探讨,为规范骨转移癌痛的中医辨证分型提供参考依据,以期进一步提高中医诊治骨转移癌痛的临床疗效。     

室内也需防PM2．5危害

近日,北京大学公共卫生学院和国际环保组织绿色和平在京联合发布《PM2．5的健康危害和经济损失评估研究》报告,估算出2012年北京、上海、广州、西安4个城市因PM2．5污染造成的早死人数总计达8572人。