蚯蚓中平喘蛋白组分的提取分离及其作用机制的初探

目的初步研究蚯蚓平喘蛋白组分(Eisenia foetidaprotein,EP₂)及其平喘活性。方法以新鲜赤子爱胜蚓为原料,通过蛋白质的硫酸铵沉淀和离子交换色谱法,分离得到一组平喘活性蛋白成分(EP₂)。采用经典的肺阻力(R_L)和动态肺顺应性(C_dyn)指标评价EP₂对致敏豚鼠抗原攻击前后的肺功能变化;采用体外试验观察EP₂拮抗白三烯D₄引起豚鼠离体气管平滑肌的收缩反应;同时应用双向凝胶电泳-质谱技术对蛋白组分EP₂进行了初步分析鉴定。结果在整体试验中,EP₂16.8mg·kg^-1口含吞服预处理能明显抑制致敏豚鼠抗原攻击后引起的RL增加和C_dyn下降,作用稍弱于阳性对照药孟鲁司特;在离体试验中,EP₂能明显拮抗白三烯D₄收缩气管平滑肌的作用,作用强度与孟鲁司特接近;双向凝胶电泳-质谱技术分析证明蛋白组分EP₂中含有蚯蚓种属中的蛋白F-I-0、F-I-1以及纤溶酶组分A,均为丝氨酸蛋白酶类胰蛋白酶家族成员。结论EP₂具有平喘作用,作用靶点可能通过拮抗白三烯受体,提示EP₂的有效成分可能是白三烯拮抗剂。