加强临床实验室分析前质量控制的重要性和紧迫性

在临床实验室全面质量管理体系中,质量控制是质量管理的核心部分,是保证检验结果可靠的重要手段[1].而分析前质量控制是当前实验室质量管理中最重要和最薄弱的环节.所谓分析前质量控制,在国际标准化组织颁布的<医学实验室质量和能力专用要求>(即ISO/IEC15189)文件中明确定义为按照时间的顺序,从临床医生开出医嘱开始,到分析检验程序时终止的步骤,包括检验申请、患者的准备、原始样品的采集、运送到实验室并在实验室进行传输.     

49,XX,+8,+14,+22嵌合体M5a型白血病一例

患者女,26岁。因皮下瘀斑,牙龈渗血,头晕乏力,发热1月余就诊。查体:重度贫血貌,四肢有散在的瘀斑,脾脏肋下约4cm,质软。血常规:Hb54g/L,RBC2.5×1012/L,WBC162×109/L,BPC64×109/L,涂片原单和幼单核细胞占35%。骨髓检查:骨髓增生极度活跃,粒红比2∶1,单核细胞占有核细胞97·5%,以原单和幼单核细胞为主,过氧化酶(弱阳性),非特异性脂酶(强阳性),氟化钠抑制试验(阳性)。诊断为急性单核细胞白血病M5a型。细胞遗传学检查:抽取患者骨髓,用肝素抗凝,常规24小时骨髓染色体培养方法,胰酶G显带分析100个分裂相核型,核型为46,XX/49,XX,+8,+14,…     

Exosomes致敏的树突状细胞在中晚期大肠癌的临床应用研究

目的 评估Exosomes致敏的树突状细胞对中晚期大肠癌的临床疗效.方法 105例中晚期大肠癌患者随机分为免疫联合化疗组(n=65)和单纯化疗组(n=50),观察两组患者的外周血T淋巴细胞亚群含量、有效率、1年生存率、中位生存时间及毒副反应.结果 治疗前两组T淋巴细胞亚群含量比较无显著性差异,免疫联合化疗组治疗后与治疗前比较,CD3+、CD4+及CD8+明显增高(P＜0.05),且优于单纯化疔组(P＜0.05);联合治疗组与单纯化疗组有效率分别为56.9%和38.0%(P＜0.05),1年生存率分别为66.7%和52.1%(P＜0.05),中位生存时间分别为15.6个月和12.3个月(P＜0.05),两组毒副反应无统计学意义(P＞0.05).结论 Exosomes致敏的树突状细胞回输联合化疗对中晚期大肠癌有较好的疗效,可提高免疫功能,延长生存期.     

抗原冲击致敏树突状细胞诱导特异性CTL杀伤Lovo细胞实验研究

目的：本研究以健康人外周血单核细胞为前体细胞,体外诱导其为树突状细胞（DC）,负载直肠癌细胞株Lovo细胞冻融抗原,产生特异性细胞毒性T淋巴细胞（cytotoxic Tlymphocytes,CTLs）,探讨其对Lovo细胞的杀伤作用。方法：联合应用rhGM-CSF、rhIL-4、rhTNF-a及rhsCD40L等细胞因子,密度梯度离心法、贴壁法从外周血获取单核细胞并进行诱导扩增,培养出DC,用冻融抗原冲击致敏DC。实验分3组：冻融抗原致敏DC组（Ⅲ组）,未致敏DC组（Ⅱ组）,T细胞组（Ⅱ组）,观察CTL对Lovo细胞的杀伤作用。结果：冻融抗原致敏DC激活CTL的能力显著高于未致敏的DCs组,两组CTLs对Lovo细胞的杀伤率差异有统计学意义（50．9％ vs 24．7%,P〈0．05）。结论：冻融细胞抗原致敏树突状细胞后活化CTLs,有抗肿瘤活性。     

加强临床实验室分析前质量控制的重要性和紧迫性

在临床实验室全面质量管理体系中,质量控制是质量管理的核心部分,是保证检验结果可靠的重要手段[1].而分析前质量控制是当前实验室质量管理中最重要和最薄弱的环节.所谓分析前质量控制,在国际标准化组织颁布的<医学实验室质量和能力专用要求>(即ISO/IEC15189)文件中明确定义为按照时间的顺序,从临床医生开出医嘱开始,到分析检验程序时终止的步骤,包括检验申请、患者的准备、原始样品的采集、运送到实验室并在实验室进行传输.     

树突状细胞与肿瘤免疫治疗

 到目前为止，人类肿瘤免疫治疗效果相当有限，其原因之一是可利用的肿瘤相关抗原受到限制及其不能有效递呈这些抗原产生免疫反应。然而，近来对作为重要的APC及启动免疫反应的DCs的研究为产生更有效的抗肿瘤免疫反应提供了基础。这种含量极少的、来源骨髓的细胞是唯一能使静息T细胞对蛋白抗原产生致敏。因为DCs具有递呈肿瘤抗原信息给T细胞的能力，DCs在癌症的免疫治疗中发挥着举足轻重的作用。     

东亚钳蝎毒生物提取物对人肝癌细胞体外增殖及凋亡的影响

 目的　探讨东亚钳蝎毒生物提取物 (PBMK)对人肝癌细胞的体外增殖及凋亡影响。方法　用MTT法测定PBMK对人肝癌细胞的体外增殖 ,用Tunel法测定其对人肝癌细胞的调亡影响。结果　PBMK对人肝癌细胞体外生长有明显抑制作用 ,可高度诱导肝癌细胞的凋亡。经PBMK作用的癌细胞在相差显微镜下表现为细胞稀疏、收缩 ,胞质拉长。HE染色可见明显的细胞内空泡和细胞出泡现象。结论　PBMK可作为一种有效的癌细胞毒药物 ,具有开发应用前景。     

ELISA夹心法检测rhGM-CSF/IL-3融合蛋白

以往我们对在大肠杆菌中表达的rhGM-CSF/IL-3融合蛋白进行了中试纯化,同时研究还表明rhGMCSF/IL-3体外能促进造血祖细胞的生长发育(另文发表)。为进一步研究其在体内的药效,测定药代动力学,我们建立了ELISA夹心法定量检测rhGMCSF/IL-3,现报告如下。 材料与方法 1.1 主要试剂 鼠抗rhGM-CSF单克隆抗体(rhGM-CSF McAb)为自制;鼠抗rhGM-CSF多克隆抗体(rhGM-CSF PcAb)、兔抗rhIL-3多克隆抗体(rhIL-3 PcAb)、酶标记羊抗兔IgG(均购自Amersham);LPS、HRP、BSA(SIGMA);G-CSF、rhIL-3、EPO(Amgen);IL-2(Cetus);rhGM-CSF、IFN-α(均购自Schering-Plough公司)。 1.2 ELISA夹心法测定rhGM-CSF/IL-3融合蛋白 用25mmol/L磷酸盐缓冲液(PBS pH8.0)按适当比例稀释的rhGM-CSF McAb 100μl包被微孔板,20℃16小时,将含(A液)0.1％Tween-20的PBS洗板至少3次,200μl 1％BSA-PBS溶液20℃封闭6小时,A液洗板,甩干,-20℃保存备用。使用时解冻,每孔加样150μl,4℃16小时;A液洗板5次,加B液(0.1％Tween-20,0.1％BSA in 50mmol/LPBS, pH7.3)适当稀释的rhIL-3 PcAb 100μl,20℃ 3小时;A液洗板5次,加100μl HRP-羊抗兔IgG,37℃1小时;A液     

rhGM-CSF/IL-3融合蛋白对小鼠造血功能的影响

目的:观察重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子/白细胞介素-3(rhGM-CSF/IL-3)融合蛋白对小鼠造血功能的影响.方法:利用环磷酰胺(CTX)抑制骨髓及辐照致骨髓损伤造模,检测rhGM-CSF/IL-3对CTX所致骨髓抑制小鼠外周血WBC、RBC、血小板、脾重、骨髓有核细胞(BMC)的影响及对脾集落形成单位(CFU-S)的影响和对小鼠生存的保护作用.结果:rhGM-CSF/IL-3对CTX骨髓抑制小鼠外周血WBC、R13C、血小板及BMC均有明显提升作用(P＜0.01),并显著提高生存率(P＜0.05)和CFU-S数(P＜0.01),而对脾重影响差异无显著性(P＞0.05).结论:rhGM-CSF/IL-3有减轻骨髓损伤和促进造血干/祖细胞增殖和分化的作用.