应用基于LC-TOF-MS分析的质量亏损过滤方法筛选黄芪注射液中的皂苷类成分

采用液相色谱与四极杆飞行时间质谱(LC-TOF-MS)联用技术分析黄芪注射液(HI)样品,获取正负离子模式下HI中化学成分的LC-TOF-MS分析数据。根据前期相关文献报道,建立黄芪皂苷类化合物的质量亏损过滤(MDF)方法,用于系统筛选HI中所含有的皂苷类成分。每个筛选化合物的存在需由不少于2个准分子离子进行确认。最后依据其母离子和子离子信息对所筛选的化合物进行初步鉴定。最终共从HI中筛选并初步鉴定出62个皂苷类化合物,其中15个为新发现的皂苷类化合物。鉴定结果提示,乙酰化、氢化、去氢化、甲氧基化和水化可能为HI中皂苷所涉及的主要转化反应。该研究丰富了黄芪化学物质基础研究内容,同时也表明基于LC-TOF-MS分析的MDF方法,是一种可行且有效的中药成分系统筛选工具。     

基于定量蛋白质组学技术探讨交泰丸抗抑郁的作用机制

该研究旨在应用定量蛋白质组学技术探讨交泰丸对慢性不可预知温和刺激(chronic unpredictable mild stress, CUMS)抑郁模型大鼠海马区蛋白表达的影响,进而研究其抗抑郁机制。将SD大鼠随机分为对照组、模型组、交泰丸组及氟西汀组,每组8只。除对照组外,其余3组大鼠进行4周CUMS造模,以建立抑郁模型。连续给药4周后,分析各组大鼠行为学及海马组织病理形态变化。提取海马组织蛋白,运用定量蛋白质组学技术比较各组间差异表达蛋白(differentially expressed proteins, DEPs),并进行生物信息学分析。采用蛋白免疫印迹(Western blot)法验证关键DEPs。结果显示,交泰丸可显著改善CUMS抑郁模型大鼠的抑郁样行为及海马组织病理形态。从大鼠海马组织中共鉴定出5 412个蛋白,其中对照组与模型组间有65个DEPs,交泰丸组与模型组间有35个DEPs。交泰丸组与对照组变化趋势相一致的DEPs共有16个,上述DEPs主要涉及鞘脂信号通路、AMPK信号通路及多巴胺能突触等信号通路。此外,Western blot检测各组大鼠海马区Ppp2r2...     

液相串联质谱同时测定艾迪注射液中9种成分

目的 建立LC-MS法,同时测定艾迪注射液中斑蝥素,人参皂苷Rg1、Re、Rb1,异秦皮啶,紫丁香苷,芒柄花素,黄芪甲苷及绿原酸9种成分.方法 使用Waters Quattro Micro液质联用仪,色谱柱为Agilent Zorbax SB C18(100 mm×3.0 mm,3.5 μm);流动相为乙腈-0.1％甲酸,梯度洗脱;柱温23℃;体积流量0.22 mL/min.结果 4个批次艾迪注射液中各成分平均质量浓度分别为(1.88±0.03)、(0.73±0.12)、(0.66±0.28)、(3.13±0.66)、(7.77±0.56)、(21.71±0.64)、(0.46±0.07)、(17.44±1.00)、(108.76±5.86) μg/mL.结论 建立的LC-MS方法,操作简单、快速、灵敏度高,可用于艾迪注射液的质量控制.     

柠檬苦素乳膏的制备与质量控制

目的: 制备柠檬苦素乳膏并考察其质量稳定性。方法: 以柠檬苦素为主药制备乳膏剂,采用HPLC测定主药含量及有关物质,色谱条件为Zorbax SB-C₁₈色谱柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),Zorbax SB-C₁₈保护柱(4.6 mm×12.5 mm,5 μm),流动相水-乙腈(42:58),检测波长207 nm,流速1.0 mL·min^-1,柱温室温,进样量20 μL,考察3批样品的初步稳定性。结果: 柠檬苦素乳膏呈乳白色,鉴别、检查项均符合相关规定,线性范围20.26~101.3 mg·L^-1,平均回收率99.6%(RSD 0.68%)。3批样品中柠檬苦素质量分数100.4%~101.6%,除了在高湿或高温条件下体积会略有增大或减小,其他检测在不同环境中均稳定。结论: 该制剂工艺简单、质量可控,应置于阴凉干燥处保存。     

LC-MS/MS法同时测定CUMS大鼠血浆中3种单胺类神经递质

目的建立测定大鼠血浆中五羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)的LC-MS/MS方法,观察慢性不可预见性温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)抑郁大鼠血浆单胺类神经递质DA、5-HT、NE的变化情况。方法♂SD大鼠22只,分为对照组(n=10)和模型组(n=12),模型组每天给予9种慢性不可预见性温和刺激因子,造模21 d后,分别于造模前后进行行为学测定及眼眶采血;采用苯甲酰氯作为柱前衍生化试剂,将3种待测物及内标衍生化后进入LC-MS/MS检测,测定造模前后血浆中5-HT、NE、DA 3种神经递质浓度。结果造模21d后,与对照组相比,模型组大鼠体重明显降低(P<0.05),水平得分、垂直得分均明显降低(P<0.01),同时糖水消耗量明显降低(P<0.01)。血浆中5-HT、NE、DA的浓度在1.47~752、1.75~898、2.05~1053μg·L-1范围内线性关系良好,最低定量限分别为1.47、1.75、2.05μg·L-1,以质控样品计算,在各浓度水平下,此法的回收率均大于70%,日内和日间精密度小于15%,符合生物样品分析要求。造模21 d后,模型组血浆中5-HT、NE、DA的浓度分别为(3.99±1.21)、(6.24±1.94)、(6.07±1.98)μg·L-1,与对照组相比均明显降低(P<0.01)。结论 CUMS造模成功后,血浆中的3种神经递质分别呈下降趋势。     

HPLC法研究灯盏细辛注射液对水杨酸排泄的影响

<正>近年来,阿司匹林抗血小板聚集活性逐渐成为其临床主要应用领域[1-2],是心血管疾病方面一线药物。临床上,阿司匹林常与灯盏细辛注射液(DI)、脉络宁注射液等中药制剂合用,用于治疗心脑血管疾病,并取得了良好的疗效[3-4]。研究表明,阿司匹林的消除半衰期短,约为7~12 min,难以测到阿司匹林的体内过程,因此常测定其代谢物水杨酸的浓度变化来研究体内阿司匹林的药动学过程[5-6]。水杨酸在大鼠体内的排泄研究及DI对水杨酸排泄的影响未见报道。阿司匹林与DI长期合用可能导致体内水杨酸的蓄积,而体内水杨酸浓度升高将导致不良反应[7-8]。     

LC-MS法同时测定至灵菌丝胶囊中5种成分的含量

目的：建立同时测定至灵菌丝胶囊中腺苷、胞苷、鸟苷、甘露醇、腺嘌呤含量的方法。方法：采用液相色谱串联质谱（LC-MS）法。色谱柱为Agilent Zorbax SB-C₁₈柱,流动相为甲醇-0.1%甲酸溶液,采用电喷雾电离源,多反应离子监测（MRM）,用于定量分析的5种成分检测离子对m/z分别为268.1/136、244.2/112.1、284.1/152.1、183.1/69、136.1/119.1。外标法定量分析。结果：5种成分的质量浓度分别在37.5～1200、20～640、40～1280、77.5～2480、27.5～880 ng·mL^-1范围内与各自的峰面积呈良好的线性关系（r=0.9985、0.9964、0.9991、0.993、0.9924）。加样回收率在95.7%～101.4%范围内,RSD均低于7.3%。结论：该法专属性强、快速灵敏,可用于至灵菌丝胶囊中5种成分的含量测定。     

基于PK-PD模型研究雷公藤治疗类风湿关节炎生物靶标

运用PK-PD模型观察血清样本及雷公藤治疗类风湿关节炎(RA)的抗炎作用,并分别对浓度-时间、效应-时间曲线进行相关分析,采用PCR检测各组大鼠的ROR_γt,IL-17,STAT3,IL-6 mRNA转录水平.甲氨蝶呤、雷公藤红素和高剂量的雷公藤,均可下调AA大鼠淋巴结中ROR_γt,IL-17,STAT3,IL-6 mRNA转录水平.根据PK-PD模型研究表明炎症因子与雷公藤的血药浓度存在一定的相关性.雷公藤及其主要活性成分雷公藤红素可通过抑制IL-17细胞因子实现抗炎作用来治疗RA.     

绿原酸及其同分异构体对人血浆阿司匹林酯酶活性的影响

目的探究绿原酸及其同分异构体对人血浆阿司匹林酯酶活性的影响。方法以高效液相色谱法测定阿司匹林酯酶体外培养体系中水杨酸(SA)和阿司匹林(ASA)的浓度,以CSA/(CASA+CSA)反映阿司匹林酯酶的活性。通过空白对照组和添加单体成分的实验组间阿司匹林酯酶活性的变化来分析各成分对阿司匹林酯酶活性的影响。结果实验组与空白对照组之间差异没有显著性。结论在本实验浓度下,绿原酸及其同分异构体对酯酶影响不明显,为临床同时使用阿司匹林与含有该类化合物的中药或中药制剂提供理论依据。     

基于液相色谱质谱联用氯吡格雷-人参皂苷血浆蛋白结合率协同效应

目的研究大鼠血浆中氯吡格雷-人参皂苷血浆蛋白结合率协同效应。方法选择人参皂苷Rg1、Rb1为指标,首先建立了
Rg1、Rb1在透析内液（大鼠血清RSA）、外液（PBS）含量检定方法,采用平衡透析法揭示了氯吡格雷对人参Rg1、Rb1血清蛋白结
合率协同作用;接下来,采用同源模建方法建构RSA三维构造,并用分子模拟方法揭示氯吡格雷、人参皂苷Rg1、Rb1与大鼠血
清白蛋白RSA间结合效应,揭示氯吡格雷-人参皂苷在血浆蛋白结合率层面协同效应。结果人参皂苷Rg1、Rb1在0.40、1.00、
2.00 mg·L-1三种浓度下与大鼠血清蛋白结合率分别为30.16±2.82、33.42±4.21、34.61±3.42 和50.13±2.34、51.23±3.23、53.11±
3.26,当合并加入氯吡格雷（1.0 mg·L-1）后血浆蛋白结合率分别下降至22.13±2.72、21.42±3.22、25.45±3.52和40.13±3.24、41.25±
4.15、43.11±3.31,分子模拟结果显示氯吡格雷、Rg1、Rb1与RSA存在不同程度的竞争结合效应。结论平衡透析法和分子模拟
实验综合揭示了氯吡格雷-人参皂苷血浆蛋白结合率协同效应。