滋补脾阴方药对脾阴虚痴呆大鼠海马蛋白质组影响的研究

目的:从蛋白质组水平探索脾阴虚痴呆的本质以及滋补脾阴的方药(ZBPYR)作用靶点.方法:采用饮食不节、劳倦过度、耗伤阴液的复合因素综合考虑的方法建立脾阴虚的大鼠模型.并于双侧海马定位注射聚合态β-淀粉样蛋白1-40,应用ZBPYR干预.通过双向凝胶电泳比较各组大鼠海马蛋白质组表达图谱的不同;由MALDI-TOF-MS鉴定表达差异的蛋白.结果:与空白对照组相比,脾阴虚痴呆组有9个蛋白表达差异点;脾阴虚痴呆+ZBPYR组有2个差异点.经质谱鉴定显示脾阴虚痴呆组大鼠海马蛋白中Annexin Ⅲ表达上调,Tubulin beta chain 15、Dihydropyrimidinase-like 2和Guanine nucleotide-binding protein beta-1 subunit表达下降,ZBPYR干预后这些蛋白点的表达与空白对照组比较无明显差异.结论:脾阴虚痴呆大鼠海马的病变是一个多种蛋白质参与的复杂过程,AnnexinⅢ、Tubulin beta chain 15等分子参与了脾阴虚痴呆大鼠的海马病变;ZBPYR可能通过对海马的差异表达蛋白的调控而达到治疗目的.     

大黄附子汤对大鼠失血性休克复苏后肠黏膜屏障的保护作用

目的探讨大黄附子汤对大鼠失血性休克(hemorrhagic shock,HS)复苏后小肠黏膜屏障功能保护作用的机理。 方法健康清洁级雄性SD大鼠,72只,随机数字表法分为对照组、模型组、治疗(大黄附子汤)组,各组再按HS模型制备成功复苏后0、6、12 h分为3个亚组,每组8只。模型组、治疗组采用Wiggers改良法制备HS大鼠模型,模型组以0.9%等渗盐水保留灌肠,治疗组予以大黄附子汤保留灌肠。分别于上述三个时段测定血清中肠脂肪酸蛋白(IFABP)水平及内毒素(LPS)含量;光镜观察大鼠肠黏膜病理改变;Western blot与免疫组化法测定黏膜闭锁小带蛋白-1(zonula occludens-1,ZO-1)、磷酸化血管扩张刺激磷蛋白(phospho-VASP,p-VASP)蛋白表达。 结果治疗组与模型组比较,随时间推移肠道血流增加[ (119.28±6.50) bpu vs (99.99±0.81) bpu,P<0.01],血清内毒素(LPS)、脂肪酸结合蛋白(IFABP)含量逐渐减低[(21.23±3.33) ng/mL vs (27.09±3.55) ng/mL,P<0.01;(0.420±0.059) ng/mL vs (0.645±0.058) ng/mL,P<0.01],肠道黏膜损伤程度逐渐减轻[(1.78±0.24) vs (3.64±0.25),P<0.01],p-VASP蛋白表达下调[(0.106±0.030) vs (0.297±0.045),P<0.01],ZO-1表达上调[(0.82±0.047) ng/mL vs (0.61±0.041) ng/mL,P<0.01]。 结论大黄附子汤可减轻失血性休克复苏后肠道粘膜屏障损伤,可能与调控p-VASP、ZO-1蛋白表达有关。     

基于中药整合药理学平台探究大黄附子汤治疗重症急性胰腺炎的物质基础与作用机制

目的：采用整合药理学的方法探究大黄附子汤治疗重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis,SAP） 的物质基础与作用机制。方法：利用中药整合药理学计算平台检索查询大黄附子汤三味中药的活性成分、药物 靶标,以及SAP的疾病靶标,建立药效成分-靶标-信号通路网络图并分析网络拓扑结构,探究大黄附子汤治疗 SAP的物质基础与作用机制。结果：平台筛选出大黄附子汤158种药效成分,主要为糖类和苷类,及659个靶 标,包括CGK、JUN、ATP1A1和KRAS等,作用的信号通路涉及炎症?内分泌?细胞?肿瘤?免疫?信号传导等 多条代谢通路。结论：大黄附子汤可能通过调节多种炎性因子和细胞因子的释放、抑制氨基端激酶磷酸化,并 调节内分泌系统和免疫活性发挥治疗SAP的作用,提示这些可能是该方治疗SAP的潜在机制和物质基础。     

周慎斋从脾胃辨治虚损理论探析

对明代医家周慎斋辨治虚损的特色进行探析。周氏认为脾胃虚衰是虚损之关键,提出虚损“纵有变证,只从脾胃论治”;将创立的“二十六字元机”融入具体治法之中,以理、补为主,兼用固、从、责、清、兼等虚损治法;并以脾胃脉象预测虚损转归。      

中性粒细胞弹性蛋白酶在重症胰腺炎急性肺损伤中的表达及大黄附子汤的干预作用

目的 观察中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)在重症急性胰腺炎并急性肺损伤(SAP-ALI)中的表达及大黄附子汤的干预作用.方法 健康SD大鼠80只,按体质量随机分成4组:假手术组(n=19)、SAP-ALI组(n=21)、NE处理组(n=20)及大黄附子汤治疗组(治疗组,n=20).假手术组开腹后行空肠造瘘,翻动胰腺数次后关腹;SAP-ALI组在假手术组基础上经胰胆管逆行注入4%牛磺胆酸钠(1 ml/kg),建立SAP-ALI模型;NE处理组造模后静脉输注NE 0.5 U/100 g,其他同SAP-ALI组;治疗组在NE处理组基础上经空肠造瘘管注入大黄附子汤10 ml.酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测肺泡灌洗液和血清的NE含量及血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β含量.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western b1ot法分别检测肺组织NE mRNA和蛋白表达,同时观察胰腺和肺组织湿/干重比和病理形态学变化.结果 NE处理组BALF和血清NE含量及血清TNF-α、IL-1β含量均较SAP-ALI组大鼠明显增加(P<0.05).NE处理组肺组织NE mRNA表达较SAP-ALI组显著升高.经大黄附子汤治疗后BALF和血清NE含量、血清TNF-α、IL-1β含量及肺组织中NE mRNA表达均较NE处理组明显降低(P<0.05).结论 NE的过度释放参与了SAP-ALI的发病过程,大黄附子汤可通过抑制NE的释放,降低血清TNF-α、IL-1β含量,减轻肺损伤程度.     

脾阴虚痴呆证病结合模型建立及滋补脾阴方药干预的实验研究

目的:为有效模拟临床,建立脾阴虚痴呆证病结合大鼠模型,并观察滋补脾阴(Zi-Bu-Pi-Yin,ZBPY)方药对其影响。方法:采用经典方法建立脾阴虚模型,随后将凝集态β-淀粉样蛋白1-40(β-Amyloid1-40,Aβ1-40)定位注射到双侧海马,应用ZBPY方药干预,观察各组体征变化。通过跳台仪和Morris水迷宫进行行为学测试,比较各组学习记忆能力的改变。结果:脾阴虚组和脾阴虚痴呆组表现出饮水量增加(P<0.01),肛温升高(P<0.01)等阴虚内热征象;痴呆组和脾阴虚痴呆组学习记忆力降低(P<0.05);脾阴虚痴呆 ZBPY组阴虚表现和学习记忆力均有所改善(P<0.05)。结论:本研究在完善阿尔茨海默病的证病结合模型方面作了尝试,观察了证、病、证病结合模型在体征和行为学方面的变化;ZBPY方药对脾阴虚痴呆大鼠的阴虚表现及学习记忆能力均有一定改善作用。     

滋补脾阴方药对脾阴虚糖尿病大鼠大脑皮质内质网应激的影响

目的观察脾阴虚糖尿病大鼠大脑皮质磷酸化(p)RNA依赖的蛋白激酶样内质网激酶(PERK)、真核起始因子2α-亚单位(eIF2α)、p-eIF2α、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的变化,探讨脾阴虚糖尿病相关认知下降发病机制及滋补脾阴方药的作用机制。方法将大鼠随机分为对照组、糖尿病组、脾阴虚组、脾阴虚糖尿病组(病证组)、脾阴虚糖尿病+滋补脾阴方药组(治疗组)。采用高脂喂养4周联合小剂量链脲佐菌素注射方法建立2型糖尿病模型。在此基础上采用饮食不节、劳倦过度及灌服伤阴药方法建立脾阴虚糖尿病模型。治疗组给予滋补脾阴方药灌胃,其余各组给予等体积生理盐水灌胃,连续15 d,取大脑皮质。采用Western Blot、RT-PCR方法观察PERK、eIF2α、p-eIF2α、GRP78表达变化。结果糖尿病组、脾阴虚组、病证组PERK、p-eIF2α蛋白表达及GRP78 mRNA表达较对照组增强(P0.05),糖尿病组、病证组GRP78蛋白表达较对照组增强(P0.05),治疗组上述分子表达较糖尿病组、病证组均减弱(P0.05)。结论内质网应激参与脾阴虚糖尿病相关认知下降的发病,滋补脾阴方药通过减轻内质网应激改善学习记忆障碍。     

藏象本质与神经内分泌免疫网络指标相关性研究

目的探讨神经内分泌免疫(NEI)网络与藏象的内在联系。方法以中国学术期刊网络出版总库中的中医学、中药学、中西医结合3个专题数据库为主要来源,检索以NEI网络相关指标为主要方法研究藏象本质的期刊文献,建立相关数据库。采用数据挖掘方法,对病位、证型、治则治法、病证结合与NEI网络指标进行关联规则分析,得到关联规则,绘制关联定向网络图。结果绘制高频病位、证型、治则治法、病证结合与NEI指标关联定向网络图44幅,得到19条关联规则。肾与肝本质研究侧重下丘脑-垂体-性腺轴、下丘脑-垂体-肾上腺轴、下丘脑-垂体-甲状腺轴,脾本质研究侧重脑肠肽相关指标,心本质研究侧重血管内皮功能相关指标,肺本质研究重点集中在体液免疫、内皮素及肿瘤坏死因子-α。结论应用数据挖掘方法探讨NEI网络与藏象的内在联系是可行的,发现了不同藏象系统间NEI网络研究的差异性,对藏象本质研究具有重要意义。     

滋补脾阴方药含药血清对内质网应激致神经元凋亡的影响

目的 运用中药血清药理学方法研究滋补脾阴方药含药血清对内质网应激致神经元凋亡作用及其机制.方法 实验中体内实验于辽宁省SPF动物重点实验室完成,体外实验于辽宁省脑疾病研究重点实验室完成.SPF级健康雄性SD大鼠(220～250 g)12只,随机分为对照组和滋补脾阴方药(ZBPYR)组,每组6只,制备空白及ZBPYR含药血清.以N-糖链抑制剂农霉素(tunicamycin,Tm,5压计μml)刺激小鼠神经瘤母细胞(Neuro2a)建立内质网应激模型,各浓度滋补脾阴方药含药血清(5%,10%,15%)为干预组,空白血清组为对照组,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法观察Neuro2a细胞牛存率;流式细胞技术观察Neuro2a细胞凋亡;蛋白质免疫印迹(Western blotting)法观察葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、凋亡促进因子CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的蛋白表达.统计结果行SNK-q检验.结果 各浓度ZBPYR含药血清预处理组(生存率:5%0.5295±0.0373,10%0.5843±0.0428,15%0.6274±0.0324;凋亡率:5%47.8733±2.8166,10%46.3366±1.2748,15%39.8833±1.0524)与Tm组(牛存率:0.1673±0.0213;凋亡率:62.7050±1.4056)相比,细胞牛存率明显升高(P<0.05);细胞凋亡率显著降低(P<0.05);各浓度ZBPYR含药血清预处理组GRP 78(5%2.1228±0.2251,10%1.3293±0.9443.15%;15%0.0931±0.1168)及CHOP(5%1.1776±0.2927,10%0.7290±0.1708,15%0.6577±0.1883)蛋白表达与Tm组(GRP 78 2.9149±0.5355;CHOP 1.6611±0.2913)相比,表达水平明显下调(P<0.05).结论 ZBPYR能提高Tm刺激后的Neuro2a细胞生存率,抑制细胞凋亡,具有神经保护作用,其机制可能是减轻内质网应激及抑制内质网应激凋亡通路.     

TXA_2—PGI_2平衡与冠心病及其中医药研究

<正> 前列腺素(Prostaglandin)是一类存在于许多组织和体液中的局部激素,其作用极为复杂,对生殖、消化、呼吸、血液、循环、泌尿、神经、内分泌系统及物质代谢等功能,均有调整作用。从1930年美国 Kurzrok 和 Lieb 首次在人的新鲜精液中发现前列腺素(PG)之后,瑞典生化学家 Bergstrom 和 Samulsson、英国药理学家 Vane 在前列腺素研究中,作出了卓越的贡