乙型肝炎病毒表面抗原单链抗体细胞内免疫抗乙型肝炎病毒基因治疗研究

目的 :研究乙型肝炎病毒表面抗原 (HBsAg)人源单链可变区抗体 (ScFv)细胞内免疫抗乙型肝炎病毒(HBV)基因治疗的作用。方法 :用噬菌体表面展示技术筛选特异性的HBsAg人源单链可变区抗体 ,聚合酶链反应(PCR)法扩增HBsAg单链抗体基因 ,并构建表达HBsAgScFv基因的重组逆转录病毒载体pLXSN HBsAgScFv,转染PA317细胞 ,将转染细胞分泌的假病毒颗粒感染 2 2 15细胞 ,酶联免疫吸附法 (ELISA)检测其上清HBsAg和HBeAg ,定量检测HBVDNA。结果 :成功筛选出HBsAgScFv ,PCR扩增出 75 0bp的全基因 ,构建HBsAgScFv基因的逆转录病毒载体 ,转染PA317细胞 ,在上清中检测出含HBsAgScFv假病毒颗粒的存在 ,上清感染 2 2 15细胞后第 3、5、7、14天 ,HBsAg、HBeAg逐渐下降 ,到第 14天时HBsAg已变为阴性 ,DNA定量检测无明显变化。结论 :HBsAgScFv能成功地在逆转录病毒载体中表达 ,并有抑制HBsAg、HBeAg表达的作用     

白细胞直方图分类内定警告者细胞形态学分析

目前ＣｏｕｌｔｅｒＪＴ ＩＲ血细胞分析仪已在国内外广泛应用 ,对白细胞 (ｗｈｉｔｅｂｌｏｏｄｃｅｌｌ,ＷＢＣ)分类异常报警现象 ,国内外已有文献报道[1,2 ] ,但细胞形态学方面的报告很少。仪器设定内定警告 ,通常是仪器对异常细胞出现时的报警。我们对 10 0份有内定警告的标本用显微镜观察了其细胞形态学变化 ,重点对异形淋巴细胞、不成熟粒细胞、嗜酸性粒细胞增高进行了统计 ,现将结果报告如下 :1　资料与方法1.1　材料　ＣｏｕｌｔｅｒＪＴ ＩＲ血细胞分析仪及与仪器配套原装试剂、防凝剂。1.2　标本来源　采用 15%ＥＤＴＡ Ｋ2 防凝…     

病症处理法诊治男性泌尿系统性传播疾病200例

目的探讨病症处理法对诊治男性泌尿系统性传播疾病的效果。方法本研究以200例患有泌尿系统性传播疾病的男性患者为例,随机将其分为观察组和对照组,每组各100例。结果观察组的转阴率要明显高于对照组(P<0.05),观察组总体有效性也明显优于对照组,且组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论病症处理法被有效运用于诊治男性泌尿系统性传播疾病中,可以有效杀灭病原体,提升疾病转阴率,值得在临床中广泛推广使用。     

酵母双杂交技术筛选与克隆白细胞中与NS5ATP7蛋白结合的蛋白编码基因

目的 应用酵母双杂交体系寻找与丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白5A反式激活蛋白7(human gene 5 transactivated by nonstructural protein 5A of hepatitis C virus,NS5ATP7)相互作用的白细胞蛋白,以探讨SN5ATP7的生物功能。方法 应用酵母双杂交系统3,构建NS5ATP7诱饵质粒,转化酵母AH109,与含人白细胞cDNA文库质粒的酵母Y187进行配合,于涂有X-α-gal营养缺陷型培养基(SD／-Trp-Leu-His-Ade)上筛选生长。挑选蓝色克隆,提取此酵母克隆的质粒转化大肠杆菌提取质粒。DNA后进行测序,然后进行生物信息学分析。结果 筛选出15个与NS5ATP7特异性相互作用的克隆,其中包括人类RhoGDF分裂抑制剂α、人类细胞色素b558a亚单位、人类MLL(MLL)基因外显子、人类S100钙结合蛋白A9(钙粒蛋白B)、人类移动抑制因子相关蛋白14变体E(S100A9)、人类金属硫蛋白2A、人类染色体序列及人类cDNA序列等,1个是未知功能基因。结论 初步克隆了NSSATP7与白细胞结合蛋白基因,根据所克隆到的基因,对以后研究NS5ATP7的功能有一定的提示作用;为以后研究这些能与NS5ATP7相互作用的基因在白细胞中的生理功能奠定了基础。     

抑制剂增强碳青霉烯类灭活法对革兰阴性杆菌碳青霉烯酶初步分类的评价

目的评价抑制剂增强碳青霉烯类灭活法(ieCIM)对革兰阴性杆菌碳青霉烯酶检测及初步分类的可靠性。方法分别以他唑巴坦和乙二胺四乙酸作为碳青霉烯酶抑制剂,对CIM进行改良。选取临床分离的198株肠杆菌科细菌和35株非发酵菌,采用ieCIM检测碳青霉烯酶并进行初步分类,以PCR方法检测碳青霉烯酶基因作对比。结果 198株肠杆菌科细菌中碳青霉烯酶基因阳性101株,CIM检测阳性99株;碳青霉烯酶基因阴性97株,CIM检测均阴性。35株非发酵菌中碳青霉烯酶基因阳性25株,CIM检测阳性24株;碳青霉烯酶基因阴性10株,CIM检测均阴性。使用ieCIM初步分类碳青霉烯酶,87株产A类酶菌株中检出85株(97.7%),25株产B类酶菌株中检出22株(88.0%),12株产D类酶菌株和2株同时产A、B类酶菌株全部检出,ieCIM检测敏感性为96%,特异性100%。结论 ieCIM与基因检测结果一致性高,适合临床微生物常规工作中对碳青霉烯酶的检测及初步分类。     

丙型肝炎病毒NS5A蛋白的反式激活作用研究

0引言 丙型肝炎病毒(HCV)是一种单股正链RNA病毒,编码一种多蛋白分子,在病毒和宿主细胞蛋白酶的共同裂解作用下,至少裂解为3种结构蛋白(C、E1和E2)和6种非结构蛋白(NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B)[1,2].NS5 A是非结构蛋白的一种,哺乳动物细胞表达的NS5A蛋白以两种形式存在,分子量分别为56 kD和58 kD.HCV NS5A是HCV基因组编码的一种最为重要的具有多种生物学活性的非结构蛋白质[3-5],是HCV基因组编码的一种具有反式激活作用等多种生物学活性的非结构蛋白质.其基因序列的变异,决定部分HCV病毒株对于IFN-α治疗的疗效应答.HCV NS5A蛋白还具有结合双链RNA激酶(PKR)的生物学活性,对于HCV感染的靶细胞的细胞周期与细胞凋亡的分子生物学调节机制密切相关[6].     

透明质酸敷料治疗颜面再发性皮炎的疗效观察

我院采用透明质酸敷料（商品名益肤,南京天纵易康生物科技有限公司）治疗颜面再发性皮炎,发现其对该病有良好的治疗效果,现报告如下。     

2种生化检测系统电解质结果比对分析研究

目的 :探讨贝克曼C-800全自动生化分析仪和越华MI921电解质分析仪血清电解质检测结果的可比性。方法:选择2014年1月至2014年3月符合纳入标准的病例,分别采用贝克曼C-800全自动生化分析仪和越华MI921电解质分析仪对血清中钾、钠、氯的含量进行检测,并将结果进行比对分析。结果:贝克曼C-800全自动生化分析仪与越华MI921电解质分析仪的钾、钠、氯检测结果比对分析所得到的回归方程分别为:y=0.967x+0.123、y=0.994x+0.975、y=0.811x+19.42;2种电解质检测系统的钾、钠、氯的相关系数(r)分别为0.990、0.976、0.952。结论 :贝克曼C-800全自动生化分析仪和越华MI921电解质分析仪的钾、钠、氯检测结果具有良好的相关性。     

打造"精品杂志"铸就辉煌未来

目前,《实用肝脏病杂志》经过多项学术指标及同行专家评议推荐,被中华人民共和国科学技术部中国科学技术信息研究所正式收录为“中国科技论文统计源期刊”(中国科技核心期刊),这是《实用肝脏病杂志》发展史上一个重要的里程碑,可喜可贺!从《实用肝脏病杂志》创刊到现在,已历经十载有余。在过去艰难的岁月中,《实用肝脏病杂志》的创刊、发展和进步,得到了全国各地著名肝病学家的大力支持和关爱。无论是耆耆老者,还是莘莘学子,他们怀着对肝病事业的热爱,挑灯夜战,为我们写下了一篇又一篇重要的文献,使《实用肝脏病杂志》逐步得到了同行的认可,…     

低密度脂蛋白受体的研究进展

丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)受体的研究,主要集中在CD81分子和低密度脂蛋白受体(loW density li-poprotein-receptor,LDL-R)两种穿膜蛋白分子[1]。最近的研究表明,LDL-R可能是HCV感染肝细胞的受体候选分子[2]。 一、HCV与血清脂蛋白的结合 1992年Thomssen等[3]发现了含有HCV RNA的病毒颗粒