银杏叶提取物对核因子-κB转录通路干预作用的研究

目的:通过探讨HL-60细胞被TNF-α激活后NF-κB及IκBα活化的改变,了解银杏叶提取物(GbE)在治疗哮喘中部分可能的分子机理.方法:以HL-60细胞作为工具细胞,分別经TNF-α、GbE刺激,转染带有报告基因的质粒pNF-κB-Luc,通过荧光素酶的表达情况检测NF-κB活性变化;用免疫印迹方法检测IκBα的活化状况.结果:检测结果显示,以GbE预处理HL-60细胞可以明显抑制TNFα诱导的NF-κB转录激活的活性;但用GbE预处理细胞并不能拮抗TNF-α诱导的IκBα的磷酸化和降解,将GbE处理细胞时间延长和加大GbE的浓度同样不能阻止IκBα的磷酸化和降解.结论:GbE能抑制NF-κB激活的基因转录但并不是通过干扰经典的NIK/ IKK/IκBα活化途径,而是通过干扰其它途径或采用其它方式来实现的.     

基于钩状效应报警设置的乳胶增强免疫比浊法检测血清淀粉样蛋白A的性能验证

目的采用乳胶增强免疫比浊法在贝克曼库尔特AU5800全自动生化分析仪上对血清淀粉样蛋白A(SAA)进行测定,以验证其性能是否满足厂家声明和临床需求。方法依据行业标准,对项目的功能灵敏度、精密度、正确度、分析测量范围、临床可报告范围和生物参考区间进行验证评价。收集分析测量范围最大值附近标本,通过观察反应曲线找出最大吸光度(OD)值,将此OD值设为超线性报警参数并验证正确度。结果该方法检测功能灵敏度为1.00mg/L。高、低浓度质控品的批内不精密度分别为1.17%、1.27%,日间不精密度分别为3.38%、2.72%。正确度偏倚分别为-3.69%、4.38%。验证后分析测量范围为3.99～286.37mg/L,临床可报告范围为1.00～9 163.84mg/L,生物参考区间为0～10mg/L。将最大反应OD值设置为1.87可以成功识别超过分析测量范围的标本。结论血清SAA测定试剂盒在AU5800生化分析仪上设置的性能满足厂家声明,并可达到预期用途要求。对标本反应区间OD值设置有助于识别钩状效应,为临床提供准确结果。     

导赤散合清胃散治疗磷毒性口腔病30例

运用导赤散合清胃散治疗30例因火柴生产而致的磷毒性口腔病患者。认为本病属中医之口疮,病机为心胃热盛,火热磷毒上熏。治以清心胃之火,利水通淋,凉血解毒。结果治愈29例。     

肺炎链球菌在体外触发人肺Ⅱ型上皮细胞F-actin细胞骨架重排

目的　通过体外实验研究肺炎链球菌 (Streptococcuspneumoniae ,S .pn)侵袭A54 9细胞和微丝肌动蛋白细胞骨架重排之间的关系。方法　采用F actin特异性FITC phalloidin荧光染料 ,观察S .pn作用于A54 9细胞前后的F actin细胞骨架重排情况 ;用F actin细胞骨架重排抑制剂———细胞松弛素D预处理A54 9细胞 ,观察S .pn对A54 9细胞的侵袭率 ;分别使用PLC、TPK信号转导抑制剂U7312 2、Genistein处理因素预处理A54 9细胞 ,观察其与F actin细胞骨架重排的关系。结果　S .pn作用A54 9细胞后 ,F actin细胞骨架呈块状、丝状聚集 ;F actin细胞骨架重排抑制剂细胞松弛素D可明显降低S .pn对A54 9细胞的侵袭率 ,在其浓度为 0 .2 5 μg ml时 ,未得到可测的细菌数 ;PLC(磷脂酶C)、TPK(酪氨酸蛋白激酶 )信号转导途径抑制剂可部分抑制A54 9细胞F actin细胞骨架重排 ,其相关系数分别为 :rPLC =- 0 .88(P <0 .0 5 ) ;rTPK =- 0 .91(P <0 .0 5 )。S .pn细胞壁作用A54 9细胞后 ,F actin细胞骨架呈块状、丝状聚集 ,二者间存在剂量依赖关系。结论　S .pn可通过PLC、TPK细胞信号转导途径触发A54 9细胞F actin细胞骨架重排 ,进而导致S .pn侵袭A54 9细胞。     

肺炎链球菌的转化缺陷导致细菌毒力减弱

的探讨肺炎链球菌的自然转化与其条件致病的关系。方法采用插入失活的方法制备肺炎链球菌的转化缺陷菌株，通过黏附实验和小鼠毒力实验观察它们毒力的变化，应用RT-PCR测定黏附因子PsaA在野生和缺陷菌株中的表达。结果实验获得了3株肺炎链球菌(1、2和22)的转化缺陷菌株(1d、2d和22d)。毒力研究发现转化缺陷菌株对ECV 304细胞的黏附能力显著弱于相应的野生菌株，1和2株肺炎链球菌腹腔感染BALB／c小鼠的能力显著强于相应的转化缺陷菌株；研究还发现PsaA基因在2和22株肺炎链球菌中的表达量显著高于其缺陷菌株。结论肺炎链球菌具有自然转化的能力有助于其毒力的表现，且可能通过黏附因子PsaA等相关毒力因子表达增加而增强其毒力。     

大肠癌患者血清CEA和CA199表达与临床病理因素相关性的回顾性分析

目的:分析Ⅱ期大肠癌(CRC)肿瘤部位与肿瘤标志CEA和CA199表达差异,探讨大肠癌临床病理及分子生物学因素与预后的相关性。方法:对近10年中山大学附属肿瘤医院217例临床Ⅱ期左右侧CRC术后患者进行回顾性分析。结果:左大肠癌89例(41.0%),右大肠癌128例(59.0%)。经χ2检验,左右侧大肠癌肿瘤标志CEA水平差异有统计学意义,P=0.029;年龄差异也有统计学意义,P=0.005。生存亚组分析结果显示,右侧大肠癌CA199阳性患者生存率低于阴性,P=0.160,而左侧则无统计学意义,P=0.256。独立预后因素为肿瘤部位、肿瘤大体和术后复发转移(HR分别为1.97、0.47和6.74)。结论:CEA、肿瘤部位、肿瘤大体和术后复发转移是独立预后因素;右侧大肠癌患者血清CA199阳性与预后差相关。     

临床Ⅱ期左右侧大肠癌患者癌胚抗原检测值差异研究

目的 探讨肿瘤发生在左大肠和右大肠时Ⅱ期大肠癌术后化疗患者肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)表达是否存在差异.方法 对近10年中山大学附属肿瘤医院217例临床Ⅱ期大肠癌术后化疗患者资料进行回顾性分析.结果 左大肠癌患者89例(41%),右大肠癌患者128例(59%).CEA左、右侧的阴、阳性率比较,差异有统计学意义(P=0.029),发病年龄比较,差异有统计学意义(P=0.005).结论 临床Ⅱ期左侧大肠癌患者CEA阳性率低于右侧.     

虎杖水提液对非酒精性脂肪肝大鼠的干预效果

目的分析虎杖水提液对非酒精性脂肪肝大鼠进行干预的效果。方法以高脂饲料饲养Wistar大鼠12周,诱发NAFLD,然后转以基础饲料饲养4周,并对NAFLD大鼠进行虎杖水提液干预与对照实验。通过生化检测方法分析各组大鼠血清和肝组织甘油三酯、总胆固醇和葡萄糖水平的变化。结果干预组大鼠的肝组织和血清的甘油三酯、总胆固醇和葡萄糖含量均低于对照组,其中肝、血总胆固醇和血清甘油三酯含量的差异显著(P<0.05)。结论虎杖水提液能够调整和改善NAFLD大鼠的脂肪和糖代谢,降低肝组织和血清甘油三酯、总胆固醇和葡萄糖水平。     

自配HCV-RNA室内质控品稳定性探讨

目的探讨自配HCV-RNA质控品稳定性及对其临床应用价值进行评估。方法第1组实验:配备HCVRNA阳性质控品,分装并随机分为4组,分别为A组:-20℃组,B组:-70℃组,C组:-20℃蛋白酶K组,D组:-70℃蛋白酶K组,定期用实时荧光PCR技术定量检测;第2组实验:将HCV-RNA阳性新鲜血清、HCV-RNA阴性新鲜血清和稳定剂按适当比例混合,分装并随机分成3组,分别为E组:-20℃静置保存,F组:干冰包装邮寄组,G组:模拟卫生部邮寄室间质控品的常温邮寄包装,F和G组经历共2 d邮寄运送后-20℃保存,定期用实时荧光定量PCR技术定量,统计分析,绘制质控图。结果 A、B、C和D组28周前病毒载量对数分别为(5.39±0.11)、(5.44±0.11)、(5.40±0.10)、(5.46±0.12),变异系数为2.00%、2.00%、1.85%、2.20%,差异均无统计学意义(P>0.05),SD和CV均小于临床允许误差,Z-score质控图显示28周前4组测定结果均在可控范围。E、F、G组24周前病毒载量对数分别为(5.22±0.09)、(5.19±0.07)、(5.08±0.15),变异系数为1.72%、1.35%、2.95%;3组均值两两比较,E和G组之间差异有统计学意义(P=0.02);L-J质控图显示E、F组病毒载量均匀分布在均值两侧和±2SD范围内,G组于第12周连续超出-2SD,于16周和20周超出-3SD控制线。结论在自配HCV-RNA质控品中加入蛋白酶K不能有效延长质控品的有效期;自配HCV-RNA质控品在-20℃保存稳定期至少7个月(28周),满足临床室内质量控制的需要;常温邮寄过程可明显缩短HCV-RNA时效性,自配HCV-RNA无需经历运送过程,在稳定性上存在明显优势。     

RBP、HBV DNA和ALB联合检测在监测慢性乙肝患者肝损害的应用意义

目的通过检测慢性乙肝患者(CHB)血清中视黄醇结合蛋白(RBP)、HBV DNA载量和白蛋白(ALB)的变化,研究上述指标在监测肝损害的相关意义及临床价值。方法收集我院402例慢性乙肝患者的血清标本,根据临床分型分为e--CHB组和e+-CHB组。测定血清RBP、HBV DNA载量和ALB水平关系。结果 1HBV DAN:e--CHB组载量(5.04±1.55)比e+-CHB组载量(6.83±1.48)低(t=11.73,P<0.01),有统计学意义。2血清RBP和ALB水平:e--CHB组(RBP:14.37±11.07;ALB:30.85±8.9)比e+-CHB组(RBP:17.12±8.28;ALB:32.24±4.26)低(t=2.85,P<0.05;t=2.06,P<0.05),有统计学意义。3e--CHB组随着HBV DNA载量的升高血清RBP和ALB水平不断降低,高、中拷贝组与低拷贝组比较有统计学意义(P<0.05);而e+-CHB组HBV DNA载量变化与血清RBP和ALB水平变化关系不明显。结论根据慢性乙肝患者(CHB)临床分型,血清HBV DNA载量水平与RBP和ALB水平存在不同的动态变化。对于e+-CHB患者HBV DNA载量变化与上述肝脏损害指标无显著相关性。e--CHB患者HBV DNA载量变化与肝脏损程度明显相关。另外,血清RBP比ALB更能体现肝功能的损害水平,在肝功能损害上RBP优于ALB。