基于响应面法的茯苓液体发酵工艺优化及其活性成分含量测定

目的:应用液体发酵工程技术开发茯苓资源,为解决茯苓菌木矛盾提供新思路。方法:采用响应面设计法,从接种量、碳源浓度和氮源浓度三个方面来优化茯苓的液体发酵工艺。总多糖含量测定采用苯酚硫酸法,总三萜含量测定采用香草醛-冰醋酸-高氯酸显色法,比较液体发酵茯苓和栽培茯苓间的含量差异。结果:优化的最佳茯苓液体发酵工艺为接种量6.90%、碳源浓度3.10%、氮源浓度1.00%,此工艺下得到的菌丝干质量为(8.26±0.05)g/L。液体发酵茯苓和栽培茯苓的总多糖含量分别为44.80%和76.63%,总三萜含量分别为2.48%和5.74%。结论:本论文建立的液体发酵茯苓培养工艺切实可行,茯苓的液体发酵有望为茯苓资源的开发提供新途径。     

银杏内生真菌菌种的分离及鉴定

目的对4个不同来源银杏G inkgo bilobaL.的根、茎中内生真菌进行分离、鉴定。方法用组织块法分离,用点植法对分离菌株进行分类鉴定。结果分离获得内生真菌178株,鉴定为1纲、4目、6科、28属。结论不同来源的银杏内生真菌的种群、数量及分布部位存在着显著差异。     

热毒宁注射液中细菌内毒素的测定研究

目的 对热毒宁注射液进行细菌内毒素定量检查试验,建立定量检测热毒宁注射液中细菌内毒素的试验方法.方法 采用<中国药典>2005年版二部附录检测细菌内毒素的动态浊度法.结果 热毒宁注射液在稀释至120倍时用细菌内毒素定量法检测无干扰因素影响,内毒素回收率在50%～200%.结论 使用动态浊度法可以高效地测定热毒宁注射液的细菌内毒素.     

丹参EST序列中SSR信息的分析及分子标记的建立

本文对从NCBI下栽的鼠尾草属11747条EST序列（其中,丹参10228条）进行分析,搜索到含SSR的序列1911条,共合有SSR2156个,出现频率为18．35％。在丹参EST—SSR中,核苷酸重复基元种类共77种。单核苷酸重复最多,出现频率为10．45％,二、三核苷酸的出现频率为3．72％、4．40％。三核苷酸重复中ACG／CTG为主要类型,占27．3％。共设计引物143对,合成13对（其中,丹参6对,Salvia fruticosa7对）,在对引物、dNTP、MgCl2进行测试后,建立了合适的PCR反应体系。引物筛选发现7对引物（丹参6对,S．fruticosa 1对）对丹参基因组DNA均有良好的扩增,并对11个不同产地丹参样品进行扩增均呈现良好的多态性。本研究结果证明根据丹参EST资源建立丹参EST—SSR标记是可行的。     

桃仁脂肪酸GC-MS指纹图谱研究

目的：对桃仁脂肪酸进行气相色谱指纹图谱研究,为桃仁的质量评价提供依据。方法：利用毛细管气相色谱对桃仁脂肪酸进行分析,并利用GC-MS 技术确认指纹图谱中的特征指纹信息,进行系统聚类和相似度分析。结果：对34批不同产地、品种的桃仁进行了测定,获得了较为理想的包含特征信息的桃仁GC 指纹图谱。结论：本方法重复性好,所建立的指纹图谱为桃仁药材的质量控制提供了有效手段。     

乳腺癌患者发生静脉血栓栓塞症危险因素分析

目的 探讨乳腺癌患者发生静脉血栓栓塞症的危险因素.方法 回顾性分析自2014年7月至2020年3月新汶矿业集团莱芜中心医院收治的90例女性乳腺癌患者临床资料,根据静脉血栓栓塞症发生情况分为未发生静脉血栓栓塞症的A组(n=60)与发生静脉血栓栓塞症的B组(n=30).记录两组患者的年龄、体质量指数、糖尿病病史、冠心病病史...     

亚洲薄荷的快速繁殖及炼苗

目的建立亚洲薄荷的快速繁殖及炼苗方法。方法采用正交设计试验,对影响亚洲薄荷生根的3个主要因素吲哚乙酸（indole butyric acid,IBA）,萘乙酸（naphthalene acetic acid,NAA）及Marshing-Shong（MS）培养基的3个水平进行考察,检测亚洲薄荷的平均根长和平均根数,优化亚洲薄荷的生根培养基;经过炼苗达到种植要求。结果综合考虑平均生根数和平均根长指标,并考虑到培养基配制方便,确定亚洲薄荷最佳生根培养基为：1/2 MS＋IBA（0.4 mg/L）＋NAA（1.0 mg/L）。结论该优化方案切实可行,能够满足亚洲薄荷下一步互作研究。     

经乳晕单孔腔镜甲状腺手术55例临床观察

探讨经乳晕单孔腔镜甲状腺手术治疗甲状腺良性疾病的临床治疗效果。2012年1月至2013年3月的55例经乳晕单孔腔镜甲状腺切除术患者(研究组),同期58例行传统开放甲状腺手术患者(对照组),分别对两组患者的手术治疗情况和术后改善情况进行比较和分析。结果显示,与对照组相比,研究组的术中出血量明显减少,术后引流量明显增加,术后住院时间明显缩短(P0.05);研究组发生术后疼痛和出现并发症的比率均显著降低,患者满意度则显著提升(P0.05)。结果表明,采用经乳晕单孔腔镜甲状腺手术治疗甲状腺良性疾病较传统手术安全、可靠、切口小、出血少及术后恢复快。     

稳定敲低SIGIRR的人肾小管上皮细胞的构建及其初步功能的研究

目的：建立稳定敲低单免疫球蛋白白介素1相关受体(SIGIRR)基因的人肾小管上皮细胞株(HKC),并初步研究其功能。方法针对SIGIRR基因的有效靶点设计shRNA序列,与 GV248-GFP-Puro 慢病毒载体连接产生重组体( GV248-GFP-Puro-shSIGIRR)。将测序验证正确的重组体与包装质粒(pMDL、pRev、pVSVG)共转染293T细胞进行病毒包装,收集病毒并感染HKC细胞。实时荧光定量PCR( qRT-PCR)和Western blot法分析检测HKC细胞中SIGIRR干涉效率。应用白细胞介素-1β( IL-1β)刺激成功敲低SIGIRR的HKC细胞及对照细胞, Western blot法检测其下游核转录因子NF-κB(p65)的磷酸化水平,qRT-PCR分析单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、正常 T细胞表达和分泌的活化调节蛋白( RANTES) mRNA水平。结果成功构建重组慢病毒载体GV248-GFP-Puro-shSIGIRR。 qRT-PCR 和 Western blot 法均证实在HKC细胞中成功敲低SIGIRR的表达。此外, IL-1β刺激后,与对照细胞相比,敲低SIGIRR的HKC细胞( HKC/shSIGIRR)的p65磷酸化水平上调, MCP-1和 RANTES mR-NA表达水平升高。结论 HKC的炎症反应中,SIGIRR蛋白对Toll样受体/白介素1受体(TLR/IL-1R)通路起“刹车”作用。该研究为狼疮性肾炎的治疗提供了新的潜在的靶点。     

五环三萜皂苷生物合成与调控的研究进展

五环三萜皂苷是一类重要的天然产物,具有多种生理活性,临床应用前景诱人,但自然界中,其产量较低。采用分子生物学与蛋白质组学相关知识,通过代谢工程或基因工程进行五环三萜皂苷生物合成的工厂化生产,具有广阔的市场前景。综述了五环三萜皂苷生物合成途径及其调控因子的研究进展,并简要探讨了五环三萜皂苷生物合成的研究方法。