气管外科技术的研究现状与进展

气管疾病,最简单而有效的治疗是环形切除气管病变段,继而行端端吻合。自1884年Kuester等实施首例人工气管手术以来,气管已经不是外科手术的禁区,随着人们不断地深入探索和大胆尝试,新方法、新技术不断地引入,使气管外科技术不断成熟。     

Ac-SDKP抑制SiO2介导的肺泡Ⅱ型上皮MLE-12细胞向间质转化的作用及机制

目的探讨N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸（Ac-SDKP）通过调控刺猬（hedgehog, HH）信号通路,对二氧化硅（SiO2）诱导的肺泡II型上皮MLE-12细胞发生上皮-间质转化（EMT）的作用及其机制。方法体外采用50μg/mL SiO2培养小鼠MLE-12肺泡Ⅱ型上皮细胞。实验分组为:（1）对照组、 SiO2诱导组、 Ac-SDKP组和SiO2+Ac-SDKP组;（2）溶剂对照组、 SiO2诱导组、 GDC-0449组和SiO2+GDC-0449组;（3）溶剂对照组、SiO2诱导组、GANT61组和SiO2+GAN61组。免疫细胞化学染色法检测SMO和Gli1的定位表达。免疫印迹法检测I型胶原蛋白（collagen type I, Col I）、α-SMA、E-cadherin、SHH、Smoothened （SMO）、胶质瘤相关癌基因同源蛋白（glioma-associated oncog... 更多     

筛选转化生长因子诱导血管外膜成纤维细胞表型转化的差异片段

目的 :血管外膜参与血管重塑的病变基础是细胞表型转化 ,其显著特征之一是外膜成纤维细胞 (ＡＦ)被迅速激活并转化为肌成纤维细胞 (ＭＦ) ,后者兼有ＡＦ及平滑肌细胞的双重功能特性 ,增生并迁移至中膜及内膜。本研究应用差别显示聚合酶链反应 (ＤＤ -ＰＣＲ)技术筛选 2种表型细胞间差别表达基因。方法 :1 采用传统贴片法体外培养ＷＫＹ大鼠胸主动脉外膜获ＡＦ ,再用ＴＧＦβ1 ( 2 0ｎｇ/ｍＬ)处理ＡＦ2 4ｈ获ＭＦ。 2 .用免疫细胞化学分别检测ＡＦ及ＭＦ 2种表型细胞内α-ＳＭ肌动蛋白 (αＳＭ -ａｃｔｉｎ)含量。 3.用透射电镜分别观察Ａ…     

雌激素与颅内压力关系的实验研究

雌激素与颅内压力关系的实验研究徐波叶伟丽徐洪刘军马伦近年来一些学者认为特发性颅高压症与雌激素关系密切〔１～４〕。为进一步探讨雌激素与脑组织之间的关系，我们通过建立实验动物模型对动物血浆雌激素水平明显增高后，对其脑组织进行观察研究。１．动物模型的制备：...     

HPLC法测定吉祥草中β-胡萝卜素

目的:建立吉祥草中β-胡萝卜素的高效液相色谱测定方法.方法:以丙酮-石油醚(1∶1v/v)的混合溶液浸提吉祥革中β-胡萝卜素.色谱条件:色谱柱为DiamonsilC18柱(200mm×4.6mm,5μm),流动相:乙腈-甲醇-乙酸乙酯-三乙胺(80∶10∶10∶0.05);流速:1.0ml·min-1;柱温20℃;检测波长为450nm.进行了线性关系、精密度、稳定性、重复性、回收率等项的考察.结果:β-胡萝卜素的质量浓度在0.0074～0.0666μg范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率(n=6)为99.33%,稳定性400分钟内RSD=1.94%.结论:该法专属性强,结果准确,重现性好,可用作吉祥草中β-胡萝卜素的含量测定方法.     

N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸对矽肺大鼠肌成纤维细胞分化的调节

目的研究N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)对矽肺模型大鼠肺内肌成纤维细胞分化的调节作用。方法采用非暴露式气管SiO2(50 g.L-1)灌注法复制大鼠矽肺模型,60只Wistar大鼠随机分为对照4 wk组、对照8 wk组、模型4 wk组、模型8 wk组、AcSDKP治疗组(塑模4 wk后给予AcSDKP 800μg.kg-1至8 wk)和AcSDKP预防治疗组(先给予AcSDKP 800μg.kg-1.d-1,48 h后制模,维持治疗至8 wk),每组10只。羟脯氨酸测量法定量分析肺组织中总胶原蛋白的含量,免疫组织化学法、Western blot检测肺组织内血清反应因子(SRF)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型和Ⅲ型胶原的表达。结果与同时点对照组相比,模型组大鼠肺组织内胶原含量和SRF、α-SMA、Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达均增加(P<0.05)。分别与模型4 wk和8 wk组相比,AcSDKP治疗组和预防治疗组大鼠肺组织内胶原含量和SRF、α-SMA以及Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达均明显降低(P<0.05)。结论 AcSDKP可能通过抑制矽肺大鼠肺内肌成纤维细胞的分化,减少其胶原的合成与分泌,进而发挥抗矽肺纤维化的作用。     

Ac-SDKP对ROCK通路介导的肺成纤维细胞向肌成纤维细胞分化的调节作用

目的 研究N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(Ac-SDKP)是否能够通过对转化生长因子-β1(TGF-β1)介导的ROCK通路的调节,抑制肺成纤维细胞向肌成纤维细胞的分化.方法 胰酶消化法原代培养肺成纤维细胞,取4代肺成纤维细胞分为对照组、TGF-β1诱导分化组、Y-27632干预组和Ac-SDKP干预组.激光共聚焦扫描显微镜观察ROCK、SRF以及d-SMA在细胞内的定位与分布情况;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测ROCK、SFR、α-SMA、Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白在肺成纤维细胞的表达;实时定量荧光聚合酶链反应法(Real time PCR)检测ROCK、SFR、α-SMA mRNA的表达.结果 与对照组相比较,给予TGF-β1诱导刺激后,激光共聚焦扫描显微镜显示胞体内出现大量平行或交叉排列的α-SMA抗体标记的肌丝,诱导刺激6、12、24 h后,ROCK、SRF、α-SMA蛋白和mRNA以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达均增强,差异均有统计学意义(P＜0.05).与TGF-β1诱导分化组比较,给予Y-27632干预后,在相应时间点ROCK、SRF、d-SMA蛋白和mRNA以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达均明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).给予Ac-SDKP干预后,在相应时间点ROCK、SRF、α-SMA蛋白和mRNA以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达也较TGF-β1诱导分化组明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 Ac-SDKP能够通过对TGF-β1介导的ROCK信号转导通路的调控,阻抑大鼠成纤维细胞向肌成纤维细胞的分化和抑制胶原蛋白的合成,可能是Ac-SDKP发挥其抗(矽)肺纤维化的作用机制之一.     

PDGF介导的ERK1/2信号转导通路在大鼠矽肺纤维化形成中的作用

目的 探讨血小板源性生长因子(PDGF)是否通过对细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)途径的调节进而促进矽肺纤维化的形成与发展.方法 采用一次性支气管内灌注二氧化硅(SiO<,2>)粉尘制作矽肺大鼠模型,将其分为对照组(4w组和8w组)、矽肺模型组(4w组和8w组).采用贴块法进行肺成纤维细胞的原代和传代培养.HE...     

OSAHS及合并高血压患者血浆中Ang Ⅱ和ET-1的临床研究

目的 探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstruotive sleep apnea hypopnea syndrome,OSAHS)及阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征合并高血压(Hypertension)患者血浆中血管紧张素Ⅱ(Angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)和内皮素-1(plasma,ET-1)的变化.方法 将符合入选条件的中、重度OSAHS患者分为OSAHS并发高血压组、OSAHS血压正常组,另设正常对照组,每组30例,3组均行PSG监测.采用放射免疫法测定血浆中Ang Ⅱ和ET-1水平,并对比分析3组血浆中Ang Ⅱ和ET-1水平及其相关性,评价血浆中Ang Ⅱ和ET-1变化与检测价值.结果 OSAHS合并高血压与OSAHS血压正常组血清ET-1质量浓度(x±s下同)分别是(58.94±16.37)和(44.75±15.68)ng/L,明显高于正常对照组(33.89±20.12)ng/L(P＜0.01);同时OSAHS合并高血压组与OSAHS血压正常组之间比较血清ET-1质量浓度也明显增高(P＜0.05).两组患者血清ET-1水平与AHI呈明显的正相关(r＝0.334,P＜0.01).OSAHS及合并高血压患者血浆Ang Ⅱ和ET-1水平与正常对照组相比差异有统计学意义(P＜0.01).结论 OSAHS患者存在着明显的睡眠结构紊乱,但合并高血压者并没有特异性改变.ET-1可能在OSAHS合并高血压的发病中起一定作用.     

心理干预对无偿献血不良反应的影响

目的：探讨心理干预对无偿献血者不良反应发生的影响。方法：将510例无偿献血者随机分为观察组和对照组,对照组采用常规献血护理干预,观察组在常规护理干预基础上进行心理护理干预。结果：观察组不良反应发生率为1.5%,低于对照组的5.8%（P<0.05）。结论：心理护理干预能够显著降低献血不良反应发生率,提高护理质量。