冰片对梓醇及葛根素透过局灶性脑缺血模型大鼠血脑屏障作用的研究

该研究通过观察冰片是否具有促进梓醇、葛根素透过局灶性脑缺血模型大鼠血脑屏障的作用,及其是否与激活β_2肾上腺素受体-eNOS-NO途径有关,从医学生物学作用角度阐释冰片"通窍引经"的传统功效及其机制。该研究采用大鼠大脑中动脉阻塞局灶性脑缺血模型,5 d后神经功能障碍评分达5分者为造模成功。将模型成功大鼠随机分为7组,用药前经统计学检验各组间无显著性差异后,灌服给予相应药物[梓醇45 mg·kg~(-1)、葛根素200 mg·kg~(-1)、冰片200 mg·kg~(-1)、布他沙明(Butoxamine,BTX)1.5 mg·kg~(-1)]:模型组(M组,溶剂)、梓葛组(ZG组)、梓葛冰组(ZGB组)、梓冰组(ZB组)、葛冰组(GB组)、β_2受体阻断剂+梓葛组(BTX+ZG组)、β_2受体阻断剂+梓葛冰组(BTX+ZGB组),另设假手术组(S组,溶剂),每组10只。各组给药10 min后取材,采用UPLC-MS测定脑脊液中梓醇和葛根素含量,Western blot法测定脑组织中eNOS含量、β_2受体表达,Griess法检测脑组织中NO含量。结果显示,与假手术组相比,造模大鼠神经功能得分均值均在5分以上,具有显著差异(P0.05),显示造模成功。除假手术组外,经单因素方差分析,给药前各组之间的神经功能评分均无显著性差异。给药后与模型组相比,ZG组梓醇质量分数为26.673μg·L~(-1),葛根素含量在检测限以下,脑组织中eNOS表达和NO含量、β_2受体表达没有显著差异;与ZG组相比,ZGB组、ZB组、GB组脑脊液中梓醇质量分数增加至40~43μg·L~(-1)、葛根素质量分数增加至72~75μg·L~(-1),脑组织中eNOS表达和NO含量、β_2受体表达均有显著升高(P0.05),显示冰片有促进作用;与ZG组相比,BTX+ZG组大鼠脑脊液中梓醇质量分数为21.401μg·L~(-1),葛根素检测不出,2组无显著差异,显示BTX无抑制作用;与ZGB组相比,BTX+ZGB组脑脊液中梓醇质量分数32.826μg·L~(-1)、葛根素质量分数47.820μg·L~(-1),脑组织中eNOS表达和NO含量均有显著下降(P0.05),显示BTX有抑制作用。该研究说明冰片能够显著促进梓醇、葛根素透过局灶性脑缺血大鼠血脑屏障,其作用可被β_2肾上腺素受体阻断剂布他沙明所阻断,其机制可能与上调β_2肾上腺素受体从而促进eNOS表达,进而使NO含量升高有关。     

基于细胞色素P450酶的丹参代谢及其药物相互作用的研究进展

近年来,丹参被广泛应用于心脑血管疾病的治疗,因此,丹参活性成分的体内代谢及其药物间相互作用越来越受关注。就丹参提取物、主要单体成分和丹参复方基于细胞色素P450酶(CYP450s)的代谢及药物间相互作用的研究进展进行综述,为丹参及其活性成分的应用和研究提供参考。     

梓葛冻干粉针对大鼠急性脑微循环障碍的改善作用

目的：探讨梓葛冻干粉针对大鼠急性脑微循环障碍的改善作用。方法：大鼠给药 14 d后开颅窗,利用高分子葡聚糖复制实验性微循环障碍模型,生物显微镜下观察记录给药后各组大鼠不同时间点软脑膜微动静脉直径,激光多普勒血流仪监测血流量,电阻法测红细胞压积,全自动血液流变仪测流变学指标。结果：梓葛冻干粉针（16.40,32.70,65.40 mg·kg^-1）能显著扩张软脑膜的微动静脉内径、改善血流量下降的趋势和降低血液流变学各项指标。结论：梓葛冻干粉针具有改善脑部微循环的作用。     

银冬颗粒中总黄酮含量的测定

目的:建立紫外分光光度法测定银冬颗粒中总黄酮含量的方法.方法:紫外分光光度法测定总黄酮的含量,检测波长为510 nm.结果:总黄酮的检测浓度在6.45～51.6μg· mL-1范围内与吸光度呈良好线性关系(r=0.9997);平均回收率为99.85％,RSD=2.35％ (n=5).结论:该方法的精密度,重复性,稳定性,加样回收率良好,能用于银冬颗粒的质量控制.     

心率变异性、心电图QRS波时程比值与LVE心衰患者NYHA分级的相关性

目的:分析心率变异性(HRV)、心电图QRS波时程(QRSd)比值(TEF)与LVE(左心室射血)心 衰患者NYHA(美国纽约心脏病协会)心功能分级的相关性.方法:选取2019-03～2020-11我院收治的126例LVE心衰患者,按照NYHA心功能分级标准分组,Ⅰ～Ⅱ级组63例,Ⅲ级组56例,Ⅳ级组7例,均进行心电图...     

野菊花超声辅助提取工艺优选

目的:优选野菊花提取工艺.方法:以总黄酮、绿原酸和蒙花苷含量为指标,采用超声辅助及正交试验优选野菊花水提和醇提工艺,并与常规回流提取进行比较;采用UV测定总黄酮含量,RP-HPLC测定绿原酸和蒙花苷含量.结果:综合3个指标,最佳水提工艺为加15倍量水提取2次,每次30 min,提取温度75℃;最佳醇提工艺为15倍量80％乙醇提取30 min,提取温度70℃.结论:采用醇提工艺提取野菊花时,总黄酮、绿原酸和蒙花苷得率均较高,可为野菊花综合开发提供实验依据.     

内异消复方缓释滴丸同步释药的处方优化及其释药机制研究

目的优化内异消复方缓释滴丸各组分同步释药的处方,探讨其释药机制。方法以药载比(X1)、乙基纤维素质量分数(X2)、PEG 6000质量分数(X3)和硬脂酸质量分数(X4)为考察因素,以"释放区间"值为指标,采用Doehlert设计-响应曲面优化法对内异消复方缓释滴丸的处方进行优化。用DDsolver软件拟合体外释药规律。结果优化处方:X1为1∶12,X2为12%,X3为30%,X4为20%。模拟的胃肠道环境下,阿魏酸与川芎嗪、阿魏酸与延胡索乙素和川芎嗪与延胡索乙素的相似因子(f2*)值分别为53.37、56.17、57.85。阿魏酸的释放符合一级动力学方程和Higuchi方程,川芎嗪和延胡索乙素符合Baker-Lonsdale方程和Ritger-Peppas方程。结论优化的内异消复方缓释滴丸能实现各组分的同步缓慢释放,其释放机制以扩散为主。     

当归、刺五加对食管癌肿瘤浸润淋巴细胞体外增殖诱导作用研究

目的 寻找新的高效、低毒的TIL刺激物，探索体外迅速解除TIL的抑制状态及提高其扩增效率的最佳条件。方法 对9例食管癌的TIL时行分离培养；采用扶正中药当归、刺五加水提物，单用或与IL－2联合应用作为刺激物，诱导食管癌TIL体外扩增，并与其他细胞因子联合组（IL－2＋IL－4，IL－2＋TNF-α）相比较；采用放射性同位素检测定量分析其增殖力。结果 当归，刺五加在有IL－2（1000u/ml)存在的情况下，对TIL的激活有促进作用。当归＋IL－2或刺五加＋IL－2，对食管癌TIL体外扩增的促进作用强度与IL－2＋TNF－α相当（P＞0.05)，不及IL－2＋IL－4（P＜0.05)。结论 当归、刺五加对于食管癌TIL的体外增殖有促进作用，能够替代或部分替代IL－4、TNF－α用于食管癌TIL体外培养及提高其杀伤活性。     

川芎嗪含药血清对人肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用

目的观察川芎嗪(TMP)含药血清对人肝癌细胞HepG2增殖的影响。方法选用SD雄性大鼠30只,随机分成3组,分别ipTMP143.0、71.5mg/kg、生理盐水0.8mL,制备TMP大、小剂量组及生理盐水组含药血清,采用RP-HPLC法测定含药血清中TMP的质量浓度。将各组含药血清作用于人肝癌细胞HepG248h,MTT法测定不同质量浓度TMP含药血清对人肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用。结果TMP大剂量组血清(20%、10%、5%),TMP小剂量组血清(20%、10%)对人肝癌细胞HepG2增殖较生理盐水组有显著抑制作用(P<0.05),最高抑制率可达46.1%。结论TMP含药血清对人肝癌细胞HepG2增殖有一定的抑制作用。     

人热休克蛋白90β基因沉默质粒的构建及转染效率的观察

目的:构建能表达小发夹RNA,从而特异、有效抑制人Hsp90βmRNA水平的质粒,比较该质粒对不同细胞株的转染效率。方法:合成3条对应于靶基因3个区域的64nt寡聚核苷酸,插入pSUPEREGFP1质粒,用DH5α细菌扩增,用酶切和测序法鉴定。以绿色荧光蛋白表达为标记,比较不同比例脂质体和质粒条件下,HepG2、HUVEC、HeK2933种细胞株的转染效率。结果:构建的pSuper-Hsp90β1、pSuper-Hsp90β2、pSuper-Hsp90β33个重组沉默质粒,插入片段碱基完全正确。在相同条件下,所构建的质粒对HeK293细胞转染效率最高,HepG2细胞最低。结论:利用pSUPER质粒可成功构建人Hsp90β基因沉默质粒,该质粒对细胞株的转染效率可因细胞的不同而有显著差异。